高糖与同型半胱氨酸对大鼠皮肤成纤维细胞MMP-9表达及活性的影响

目的: 观察不同浓度糖及同型半胱氨酸对大鼠皮肤成纤维细胞MMP-9表达量及活性的影响。方法: 取1 d龄正常SD大鼠背部皮肤分离成纤维细胞,于含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养。2-4代生长状态良好的细胞进行24 h血清剥夺(0.5%FBS)后,分为正常糖浓度组、高糖组、高糖+高同型半胱氨酸组分别培养6 h,之后用RT-PCR、Western blotting和明胶酶谱方法分别检测MMP-9 mRNA、蛋白表达量以及细胞外MMP-9活性。结果: 高糖(22 mmol/L)组MMP-9 mRNA、蛋白表达量及其活性均增高,分别为正常糖浓度组的1.15倍、1.59倍和1.34倍,P<0.05;高糖+高同型半胱氨酸(100 μmol/L)增高组更加明显,依次为正常糖浓度组的1.25倍、2.63倍和2.52倍,P<0.05。结论: 大鼠皮肤成纤维细胞在体外高糖环境下可高表达MMP-9;高同型半胱氨酸在高糖环境下可使MMP-9 表达及酶活性增高更为明显,表明高同型半胱氨酸血症也参与了对MMP-9的调节,可进一步增加高糖环境下成纤维细胞表达MMP-9。     

小鼠抵抗素基因及其反义核酸真核表达体系的构建与鉴定

目的构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒,为下一步进行resistin生物功能研究打基础。方法用resistin基因mRNA编码区序列特异引物,从小鼠脂肪组织中．通过RT—PCR的方法合成resistin cDNA,T4DNA连接酶将resistin cDNA克隆于pGEM-T载体,经双酶切及测序鉴定克隆成功后再亚克隆于pcDNA3．1^（＋）或pcDNA3．1^（-）真核表达载体,并测序鉴定。结果PCR产物长度与resistin cDNA理论长度363 bp相符;重组pGEM—T被EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ内切酶切为约3000bp和355bp两个片段,测序结果表明插入pGEM-T的DNA片段的核苷酸序列与小鼠resistin基因mRNA编码区序列完全一致。重组pcDNA3．1^（＋）和pcDNA3．1^（-）测序结果表明插入的DNA片段分别与小鼠resistin基因mRNA编码区序列和反义resistin基因mRNA编码区核苷酸序列一致。结论成功克隆载有resistin基因和载有resistin基因反义核酸的重组真核表达质粒。     

团体督导中督导的伦理行为及受督导者的伦理意识

目的：调查心理咨询团体督导中督导师的伦理行为和受督导者的伦理意识，以及两者之间的相关性。方法：翻译并改编Smith等人编写的团体督导伦理调查表，最终调查包括七个部分：包容性、多重关系与边界跨越、来访者隐私、伦理意识、胜任力、团体规范和结构及自我暴露。使用问卷星线上调查120名参与过团体督导的心理咨询师关于团体督导的伦理意识和督导师的伦理行为，并针对不同伦理规范部分，对督导师伦理行为和受督导者伦理意识进行相关性分析。结果：受督导者对团体督导师的伦理行为方面整体评价较好，受督导者对督导行为的伦理意识较清楚。但是，仍有少量督导师与受督导者存在多重关系，督导师较少鼓励回避认识的案例和回收案例材料的现象。此外，受督导者在多重关系和保护来访者隐私方面存在不同看法。督导师伦理行为的多数条目得分均与受督导者的伦理态度相关。结论：团体督导师在督导伦理行为方面整体表现较好，但在部分督导伦理意识和行为方面仍有待改进。