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胰高血糖素基因克隆、表达及鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 研制基因工程胰高血糖素,用于治疗因注射胰岛素或口服抗糖尿病药物而引起的严重低血 糖反应。方法 依据人胰高血糖素氨基酸组成序列,采用大肠杆菌出现频率高的氨基酸密码子,体外合成胰高血 糖素基因序列,克隆于pGEX-1N质粒,转化人BL21(DE3)菌中,对阳性克隆转化质粒进行DNA测序。用IPTG诱导 转化的胰高血糖素工程菌,产生谷胱苷肽转移酶的融合蛋白,经谷胱苷肽Sepharose4B亲和层析后,由 Factor Xa酶 进行柱上切割,最后用RP-HPLC得到纯化产物。产品用质谱法测相对分子质量,并对N末端15个氨基酸测序。 结果DNA测序显示克隆基因序列正确,产品相对分子质量为3486J末端15个氨基酸序列与理论值相同,产率为 1.9mg/L。结论 获得以可溶性融合蛋白方式表达的胰高血糖素基因工程菌,适于快速生产天然序列重组胰高血 糖素。 相似文献
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加筋生态护坡是土工织物与植草相结合形成的一种护坡形式,在保证工程生态性的同时大大提高了生态护坡的强度,有广泛的应用前景。以黑龙江同抚堤防工程粉砂土岸坡防护工程为例,开展了三维加筋生态护坡结构的现场原位测试与加筋土体力学特性室内试验研究,揭示了该护坡技术固土护坡力学效应。试验结果表明:对比纯植被护坡和遮阳网表层覆盖护坡方式,三维加筋生态护坡结构对土体加筋作用最为有效。土工网可以帮助植被根系在岸坡表层形成良好的加筋层,而植被根系则帮助土工网与岸坡土体更紧密地结合。加筋生态结构效果主要表现为增加了土体黏聚力,但对内摩擦角影响不大;一个生长周期内草本型植被根系加筋区域集中在地面以下20cm左右的深度;土体含水率和含根量对根土复合体抗剪强度有明显影响,随着土体中含根量和含水率的增加,根土复合体抗剪强度呈先增加后减少的趋势,即对于高羊茅这类抗剪型根系,其加固土体时存在最佳含根量和含水率使其强度最高。 相似文献
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1996年5月,中国计量科学研究院参加了电压交直流转换标准国际比对。比对结果为,国际传递标准相对于全国的基准在1kHz频率下,交直流转换误差为(-0.46±0.31)×10-6(k=1),与国际平均值相差0.5×10-6。 相似文献