Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞神经分化中的作用

目的: 探讨Oct3/4在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元中的作用。方法: 构建大鼠 Oct3/4慢病毒载体(Oct3/4 -LV)并感染大鼠MSCs;实验分为感染组(感染 Oct3/4 -LV)、阴性对照组(感染FU-PGC-NC-LV)和未感染组3组;采用β-巯基乙醇诱导各组大鼠MSCs分化为神经元。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后形态学变化;MTT法检测细胞存活率;免疫细胞化学法检测神经元烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白 2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 和Oct3/4的表达变化;Western blotting法检测MAP-2和Oct3/4蛋白的表达变化;RT-PCR法检测MAP-2和Oct3/4 mRNA的表达变化。结果: (1)阳性克隆PCR证明大鼠 Oct3/4 慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为2×10¹¹ TU/L。(2)倒置显微镜下观察大鼠 Oct3/4 慢病毒载体感染成功,感染复数(MOI)值为10,感染48 h时感染率最高,荧光表达最强;感染率可达83.4%±2.2%。感染组中,MSCs形态发生变化;MTT提示感染组细胞存活率显著降低(P<0.05)。(3)β-巯基乙醇可以诱导大鼠MSCs向神经元分化,其中以感染组诱导效果最佳,具有比较典型的神经元形态,NSE和MAP-2的表达率与其它各组相比显著增高(P<0.05)。(4)感染组与其它各组同时点的Oct3/4表达相比均显著增高(P<0.01)。并且随着诱导时间的延长,各组Oct3/4表达持续减少,诱导后5 h与诱导前相比存在显著差异(P<0.05)。结论: Oct3/4在大鼠MSCs分化为神经元的过程中可能起到了重要的调控作用。     

Notch信号在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用

目的 探讨Notch1信号通路在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞分化中的作用。方法 实验分为未转染组、转染组（转染Rn-Notch1-siRNA）、阳性对照组（转染Rn-MAPK-1 Control siRNA）及阴性对照组（转染Negative Control siRNA）等4组。采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测Notch1、Hes1和MAPK1 mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测Notch1、神经元巢蛋白（Nestin） 、神经微丝蛋白亚单位(NF-M) 和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果 1. siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强, 转染率可达91.3%±4.2%;同时,转染组MSCs的Notch1和Hes1 mRNA转录下降（P<0.05）;MTT提示转染组细胞存活率也显著减少（P<0.05）。2. 盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,Nestin、NF-M的表达率显著的高于其它各组（P<0.05）。结论 盐酸法舒地尔在诱导大鼠MSCs向神经细胞分化过程中,可能存在Notch信号通路与RhoA/Rho激酶通路信号的协同作用,共同促进MSCs向神经细胞分化。     

超高压电缆线路局部放电重症监测系统实际应用

在电缆线路的带电局放检测中发现一个较为明显的疑似局放信号时,最需要解决的是如何在较短的时间内定性定量地判别和确认疑似局放的性质包括对疑似信号源的定位。为此,作者团队研发制造出一种适用于超高压电缆线路的局部放电重症监测系统装置,能够三四个测试通道使用同种类型或不同种类型传感器进行同时同步测试;能够同时提供局放信号的原波形（示波器功能）和频率分布（频谱仪功能）;能够对局放源进行定位;能够提供各种三维二维图谱;能够基于多重逻辑门程序和神经网络以及波形相关系数等多种自动局放识别程序进行自动甄别;能够通过网络通信实施多点异地的专家后台会诊。本论文通过实际应用案例,展示和说明了局放重症监测系统装置在实际的电缆线路局放测试中所起到的作用和有效性。     

持续封闭负压引流治疗软组织大面积损伤的护理观察

目的 探讨持续封闭负压引流治疗软组织大面积损伤的临床疗效及护理.方法 使用持续封闭负压引流对16例软组织大面积损伤患者进行治疗.结果 16例患者大面积软组织损伤全部治愈,无全身及局部并发症.其中12例在2周内治愈.结论 持续封闭负压引流是治疗软组织大面积损伤的一种简单、有效的治疗方法,加强持续封闭负压引流的观察、护理是治疗的关键.     

持续封闭负压引流治疗软组织大面积损伤的护理观察

目的 探讨持续封闭负压引流治疗软组织大面积损伤的临床疗效及护理.方法 使用持续封闭负压引流对16例软组织大面积损伤患者进行治疗.结果 16例患者大面积软组织损伤全部治愈,无全身及局部并发症.其中12例在2周内治愈.结论 持续封闭负压引流是治疗软组织大面积损伤的一种简单、有效的治疗方法,加强持续封闭负压引流的观察、护理是治疗的关键.     

COVID-19患者淋巴细胞数及Th/Tc值预测病情进展研究

 目的 探讨新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者病情进展与外周血淋巴细胞数（TLC）、CD4⁺T（Th）与CD8⁺T（Tc）比值变化情况,以及TLC和Th/Tc值作为新冠肺炎病情进展监测指标的可行性。方法 收集2020年1月28日—2月10日某院确诊的12例COVID-19患者的实验室检测资料,根据临床症状分为重型/危重型组、轻型/普通型组两组,采用流式细胞仪检测两组患者外周血TLC,比较不同病情患者TLC、Th/Tc值。结果 COVID-19患者TLC占比低于正常值范围,重型/危重型组较轻型/普通型组更低;COVID-19患者Th细胞占比、Th/Tc值高于正常范围,重型/危重型组比轻型/普通型组患者更高。流式检测结果显示,两组患者T淋巴细胞、Th细胞、Tc细胞绝对值均降低,轻型/普通型组、重型/危重型组T淋巴细胞［（913±275）μL VS（526±228）μL］、Th细胞［（530±99）μL VS（351±41）μL］、Tc细胞［（255±84）μL VS（128±70）μL］绝对值比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 通过TLC、Th/Tc的值判断COVID-19患者免疫状态,预测炎症水平,可为监测COVID-19患者疾病进展和确定抗"炎症因子风暴"治疗时机提供依据。     

Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用

目的:探讨caveolin-1在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。方法:实验分为未转染组、转染组(转染Rn-caveolin-1-siRNA)、阳性对照组(转染Rn-MAPK-1control siRNA)及阴性对照组(转染negative control siRNA)4组。采用β-巯基乙醇诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测caveolin-1和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测caveolin-1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果:(1)siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强,转染率可达(81.5±2.8)%;而且转染组MSCs的caveolin-1mRNA转录下降(P0.05);MTT提示转染组细胞存活率无显著变化(P0.05)。(2)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,NSE、NF-M的表达率显著高于其它各组(P0.01)。(3)随诱导时间延长,各组caveolin-1表达持续增加,诱导6d达到峰值,与诱导前、诱导6h相比有显著差异(P0.05)。此外,转染组与其它各组同时点的caveolin-1表达均显著降低(P0.01)。结论:以caveolin-1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用。     

MicroRNA-9-1慢病毒载体的构建及其对小鼠骨髓间质干细胞诱导分化为神经细胞的影响

目的: 探讨microRNA-9-1在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法: 构建小鼠microRNA-9-1慢病毒载体(microRNA-9-1-LV)并感染小鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI);实验分为未感染组、感染组(感染microRNA-9-1-LV)、阴性对照组(感染FU-RNAi-NC-LV);采用β-巯基乙醇诱导感染后小鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后荧光表达情况;采用免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶(NSE)、神经微管结合蛋白(MAP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;PT-PCR检测MAP-2 mRNA的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果: (1)阳性克隆PCR证明小鼠microRNA-9-1慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为1×10¹² TU/L。(2)倒置显微镜下观察小鼠microRNA-9-1慢病毒载体感染成功,MOI值为20,感染4 d时感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达 91.3%±4.2%。(3)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以感染组诱导效果最佳,NSE和MAP-2的表达率显著高于其它各组(P<0.05)。结论: (1)MicroRNA-9-1-LV可高效感染小鼠MSCs。(2) 感染miRNA-9-1-LV后MSCs经β-巯基乙醇诱导向神经细胞分化比率增加。     

华佗再造丸辅助丁苯酞注射液对脑卒中患者神经功能缺损及血流动力学的影响

目的:研究华佗再造丸辅助丁苯酞注射液对脑卒中患者神经功能缺损及血流动力学的影响.方法:以随机对照法将我院 2020 年 3 月至 2022 年 3 月确诊的脑卒中患者 88 例分为研究组(44 例)、参照组(44 例).参照组行丁苯酞注射液等治疗,研究组在参照组基础上行华佗再造丸治疗.治疗2 w后,比较两组临床疗效、神经功能、血流动力学、凝血功能、炎症因子水平.结果:治疗 2 w后研究组总有效率高于参照组(P＜0.05);治疗 2 w后研究组各神经功能量表评分改善程度优于参照组;治疗2 w后研究组搏动指数低于参照组,收缩期峰值血流速度、平均血流速度高于参照组(P＜0.05);治疗2 w后研究组D-二聚体水平低于对照组,凝血酶时间、凝血酶原时间、部分活化凝血活酶时间改善水平优于参照组(P＜0.05);治疗2 w后研究组超敏C反应蛋白、同型半胱氨酸、肿瘤坏死因子-α水平均低于参照组(P＜0.05=.结论:华佗再造丸辅助丁苯酞注射液治疗脑卒中患者,可改善凝血功能及脑血流动力学,促进神经功能恢复,降低炎症水平,提高临床疗效.