复方“前愈”总黄酮部位的分离纯化与含量测定

摘要 目的 从中药复方“前愈”中提取分离总黄酮化学部位,建立总黄酮及淫羊藿苷的含量测定方法。方法采用溶剂法结合聚酰胺树脂柱层析法分离纯化总黄酮部位;应用紫外分光光度法和高效液相色谱法,分别测定分离提取液及纯化液中总黄酮及淫羊藿苷的含量。结果溶剂法提取分离所得总黄酮含量8.86%,淫羊藿苷含量为0.14%;纯化后总黄酮含量为28.36%,淫羊藿苷含量为3.19%。结论该分离纯化方法操作简便合理,可显著提高前愈复方中总黄酮及淫羊藿苷含量。     

棘球蚴病治疗的研究进展

棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫寄生于人体内所引起的一种人畜共患寄生虫病,主要流行于畜牧业发达的地区,严重影响了人类的健康,也是世界范围的一个重要的公共卫生和经济问题。目前,棘球蚴病的治疗主要还是以手术治疗为主,药物治疗及免疫预防等为辅。随着临床治疗经验的不断积累和对棘球蚴病发病机制的进一步认识,棘球蚴病的手术治疗、药物治疗及免疫预防都已有了一定程度的进展。     

新冠肺炎疫情期间武汉市三级定点医院药学服务调研及分析

目的:研究新型冠状病毒肺炎疫情期间武汉市19家三级定点医院药学服务开展情况,分析疫情期间药学服务内容及存在的问题,提出医院药学发展建议。方法:通过在线填写问卷的方式,对武汉市19家三级定点医院药学服务进行调查,搜集在新型冠状病毒肺炎疫情防控期间各医院运行的基本资料,统计分析药品供应与调剂、药师岗位调动、临床药学服务、药学科研四方面工作的开展情况。结果:在疫情防控期间,武汉市19家三级定点医院的药学服务主要以药品调剂工作为主,存在部分新型冠状病毒肺炎药品短缺、药师岗位调整、临床药学服务内容简单且形式单一,以及科研开展少等问题。结论:建议提升医院药学服务内涵、加强药学人才培养力度、推进药学信息化建设、丰富临床药学服务模式和内容,为以后在重大卫生公共安全事件下各医院开展药学服务提供参考。     

基于药效学评价的烧伤愈合水凝胶制备工艺优化及其药效成分的含量测定

目的:利用药效学指标优选烧伤愈合水凝胶的制备工艺,结合药效成分含量测定进行再评价。方法:采用不同工艺方法制备水凝胶,利用大鼠烫伤模型,观察各工艺制剂对创面组织病理结构改善及创面面积愈合情况的影响,测定治疗后大鼠血清肿瘤坏死因子-α,白细胞介素~(-1)β和髓过氧化物酶水平。利用高效液相色谱法和气相色谱法分别测定最佳工艺水凝胶与原工艺愈合膏中主要化学成分的含量。结果:治疗21 d后,烧伤愈合膏组、半提取水凝胶组和湿润烧伤膏组大鼠烫伤创面面积分别为(0.28±0.15),(0.31±0.36),(0.29±0.17)cm~2,愈合情况均良好。但半提取水凝胶组对减轻炎性细胞浸润程度、降低3个炎症因子含量的作用优于原剂型烧伤愈合膏组,与湿润烧伤膏组结果较接近。水凝胶中3种生物碱成分盐酸小檗碱、盐酸巴马汀及盐酸黄连碱含量均值分别为1.609,0.247,0.335 mg·g~(-1),均高于同批次愈合膏中相应成分的含量;水凝胶中α-蒎烯、柠檬烯、异龙脑及龙脑质量分数分别为0.052,0.149,1.438,1.643 mg·g~(-1),均高于同批次愈合膏中相应成分的含量。结论:采用最佳工艺制备的水凝胶除了创面愈合面积稍小于原工艺外,其余药效学指标均优于原工艺,且药效成分的含量更高,更适用于烧伤创面的治疗。     

麦芽发芽过程中HPLC指纹图谱及生物碱含量变化规律

目的:研究发芽过程中不同芽长麦芽HPLC指纹图谱及生物碱动态变化规律,从化学成分角度优选麦芽适宜发芽芽长。方法:用Wonda SilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长270 nm。测定10批麦芽药材HPLC指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004版)对其进行相似度评价,同条件下比较麦芽发芽过程HPLC指纹图谱差异;采用HPLC及酸性染料比色法研究麦芽发芽过程生物碱物质动态变化。结果:10批不同芽长麦芽样品HPLC指纹图谱中有19个共有峰,7号峰为大麦芽碱。大麦在发芽炮制后,新增加了5,7,8,10,12,15,16,17号峰;在发芽过程中,1,6,9,13号峰的峰面积逐渐增大后减小,在芽长为0.75 cm时达到最大;3,5,8,17,18,19号峰的峰面积逐渐增大后趋平。麦芽芽长为0.75 cm时,总生物碱含量最大。结论:建立的麦芽药材HPLC指纹图谱可为麦芽药材的质量控制提供参考。麦芽含有的化学成分在发芽炮制过程中产生明显变化,以麦芽生物碱成分含量为指标,则麦芽最佳芽长应为0.75~1.00 cm。     

麦芽有效部位对高泌乳素血症模型大鼠激素水平及脑垂体PRL mRNA表达的影响

目的：比较麦芽不同化学部位（总多糖、总黄酮、总多酚、总生物碱）对高泌乳素血症（hyperprolactinemia，HPRL）模型大鼠泌乳素水平、脑垂体泌乳素细胞阳性率及mRNA表达影响的差异，阐明麦芽药材回乳作用的药效物质。方法：分别提取4个化学部位，采用比色法测定总生物碱、总黄酮、总多糖及总酚含量；采用皮下注射盐酸甲氧氯普胺复制高泌乳素血症大鼠模型，酶联免疫法测定大鼠血清中泌乳素（PRL）、雌二醇（E2）与孕激素（P）含量，免疫组化法检测脑垂体泌乳素细胞阳性率，荧光定量PCR法检测脑垂体泌乳素mRNA表达。结果：3批药材的总多糖、总黄酮、总酚、总生物碱含量稳定可控，纯化后总生物碱含量均值为57%（g·g^-1）。与模型组比较，纯化生物碱高剂量组可显著降低泌乳素水平（P<0.05），减少脑垂体泌乳素细胞阳性反应（P<0.05），下调泌乳素mRNA表达水平（P<0.05），且与纯化前比较作用增强。结论：麦芽生物碱是其回乳作用的药效物质基础，其作用机制是通过直接作用于脑垂体泌乳素细胞，降低细胞阳性反应，下调泌乳素细胞mRNA表达，减少细胞分泌催乳素。     

回乳抑增Ⅰ号对实验性乳腺增生大鼠的作用及其机制研究

目的:研究回乳抑增Ⅰ号对实验性乳腺增生大鼠的影响,并探讨其作用机制.方法:80只大鼠随机分为正常组、疾病模型组、病证结合模型组、三苯氧胺组(1.57 mg·kg-1)、乳癖散结组(0.50 g·kg-1)和回乳抑增Ⅰ号高、中、低(31.6,15.80,7.9 g·kg-1)剂量组.采用肌肉注射苯甲酸雌二醇联合黄体酮的方法复制乳腺增生大鼠模型,在疾病模型基础上用鼠夹夹尾复制病证结合模型,造模后给予不同剂量药物治疗,连续4周.测定乳房直径、体重和血清激素(ELISA法检测)等指标,显微镜下观察各组大鼠乳腺组织病理形态学变化.结果:与病症结合模型组比较,回乳抑增Ⅰ号高剂量能显著缩小大鼠乳房直径(P＜0.01),恢复大鼠体重(P＜0.01);明显降低血清雌二醇(P＜0.01)、泌乳素(P＜0.05)、促卵泡激素(P＜0.05)、促性腺激素释放激素(P＜0.01)和5-羟色胺(P＜0.05);提高孕酮(P＜0.05),促黄体生成素(P＜0.01);显著减轻乳腺小叶数、小叶内腺泡数和分泌物.结论:回乳抑增Ⅰ号能显著改善血清激素水平的紊乱,抑制乳腺增生的发生.     

大麦芽碱对B16细胞黑色素合成的影响及其机制研究

目的：探讨大麦芽碱对B16细胞黑色素合成过程的影响及其作用机制。方法：Western blot检测大麦芽碱(50,100,200μmol·L^–1)处理B16细胞后TYR、TRP1、TRP2的表达,判断对黑色素合成过程的影响;通过PKA激动剂处理细胞,研究大麦芽碱对B16细胞黑色素合成过程的影响与cAMP/PKA/CREB/MITF信号通路的关系。结果：大麦芽碱(50,100,200μmol·L^–1)可以抑制B16细胞黑色素组cAMP、PKA、P-CREB、MITF蛋白的表达,从而抑制黑色素合成过程中TYR、TRP1、TRP2的表达。结论：大麦芽碱可以抑制B16细胞黑色素的合成过程,其机制可能与抑制cAMP/PKA/CREB/MITF信号通路有关。     

槲皮素通过调节TGF-β1/Smad抑制增生性瘢痕的形成

目的：探讨槲皮素对人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFb）及其介导的TGF-β₁/Smad信号通路中相关蛋白表达的影响。方法：提取人增生性瘢痕成纤维细胞进行原代培养并鉴定;采用CCK-8法检测不同浓度的槲皮素（50~600 μmol·L^-1）处理后的HSFb细胞活力;Western blot检测α-SMA、COL-Ⅲ、TGF-β₁、Smad2、Smad7的蛋白表达,免疫荧光检测α-SMA的表达以及HSF和HSFb中波形蛋白的表达。结果：与模型组相比,槲皮素（250,500 μmol·L^-1）可降低α-SMA蛋白的表达（P<0.05）并显著下调COL-Ⅲ蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）,其中500 μmol·L^-1槲皮素组对HSFb细胞Ⅲ-型胶原分泌的抑制作用最强,并显著降低TGF-β₁和Smad2的蛋白表达;显著上调Smad7蛋白表达并且呈浓度依赖性,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：槲皮素主要通过抑制COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β₁/Smad通路的活化从而抑制增生性瘢痕的形成。