幽门螺杆菌感染胃癌组织MMP-2和MMP-9表达及其对胃癌侵袭转移能力的影响

目的:分析幽门螺杆菌感染对胃癌转移侵袭能力的影响,同时对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况进行检测.方法:采用改良的Giemsa法检测幽门螺杆菌感染,免疫组化法检测42例胃癌标本MMP-9和MMP-2表达情况.采用Fisher's exact检验对幽门螺杆菌感染和胃癌患者临床病理特征的相关性进行分析.结果:胃癌组织中幽门螺杆菌感染率为61.9%(26/42).幽门螺杆菌感染与胃癌的分期和淋巴结转移状况相关,与患者性别、发病年龄、及组织类型无相关性.幽门螺杆菌感染与MMP-9和MMP-2表达均具有相关性(χ2=7.77,P<0.01;χ2=8.08,P<0.01).结论:幽门螺杆菌感染能够增加胃癌的侵袭转移能力,其机制可能与MMP-9和MMP-2表达增加有关.     

汉坦病毒S基因真核表达载体的构建及表达

目的 将编码汉坦病毒76-118株核蛋白的S基因片段克隆到真核表达载体DTARGET TM，构建含汉坦病毒核蛋白S基因的重组真核表达质粒pTARGET-hans，并在体外进行瞬间表达。方法 采用PCR产物直接克隆方法，将核蛋白S基因插入到真核表达载体pTARGE TM中；酶切鉴定；用电穿孔法将重组质粒转染入Vero-E6细胞；用间接免疫荧光法检测其表达产物。结果 酶切鉴定证实S基因已被正确地插入pTARGET TM中；在部分转染重组质粒的Vem-E6细胞胞质内观察到中等强度的特异性荧光。结论 重组的真核表达载体pTARGET-hans已被成功地构建并可在体外表达．为下一步基因免疫打下基础。     

斑须按蚊产卵对不同器官出丝诱导物质的影响

目的 探讨雌性斑须按蚊产卵对蚊体内不同器官中疟原虫雄配子体出丝诱导物质的影响。方法 应用体外雄配子体出丝分析方法，检测吸血后产卵的雌性斑须按蚊头、唾液腺和卵巢组织中出丝诱导物质对柏氏疟原虫雄配子体出丝诱导活性的变化。结果 斑须按蚊头匀浆上清中所含出丝诱导物质的活性与产卵是否完成没有显关系；按蚊产卵完成后，唾液腺抽提物的出丝诱导活性显升高，而卵巢匀浆上清的诱导活性显降低。结论 雌性斑须按蚊产卵影响唾液腺雄配子体出丝诱导物质的活性。     

斑须按蚊头及唾液腺疟原虫出丝诱导物质的比较

目的 比较斑须按蚊头与唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质的相对含量。方法 应用体外雄配子体出丝分析方法，分别检测斑须按蚊头及唾液腺匀浆上清在单位器官和单位蛋白浓度条件下的出丝诱导活性。结果 斑须按蚊头和唾液腺含有疟原虫雄配子体出丝诱导物质；在相同单位器官浓度条件下，斑须按蚊头部匀浆上清的雄配子体出丝诱导活性高于唾液腺上清：在相同单位蛋白浓度条件下，斑须按蚊唾液腺匀浆上清的出丝诱导活性高于头部上清。结论 雌性斑须按蚊唾液腺含有较高浓度的疟原虫雄配子体出丝诱导物质，并在蚊胃腔内疟原虫雄配子发生过程中发挥重要的生理作用。     

滤纸片收集样品分离恶性疟原虫DNA的方法

滤纸片收集样品分离恶性疟原虫ＤＮＡ的方法牟玲（沈阳市传染病院，沈阳１１０００６）罗恩杰（中国医科大学寄生虫学教研室）关键词恶性疟原虫滤纸片干血滴ＤＮＡ分离聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以其操作简便、特异性强、敏感性高为特征，被广泛地应用于疟疾的诊断、流行...     

迷你SCC重组质粒的构建及ccr重组酶对SCCmec基因岛的整合功能研究

目的构建4组迷你SCC重组质粒载体,并导入受体菌N315ex中,验证并比较ccrC和ccrAB重组酶具有识别特异性DNA片段,进而把Ⅴ型或Ⅱ型SCCmec基因岛整合入细菌染色体上的功能。方法以转化株0342（pSR5C）和N315（pSR2AB）中抽提的染色体DNA为模板,PCR扩增DNA片段attⅤ和attⅡ,并连接到pYT3载体上,构建pYTattⅤ和pYTattⅡ;将PCR扩增的重组酶基因ccrC0342和ccrAB315分别交叉克隆到pYTattⅤ和pYTattⅡ上,构建重组质粒,并导入N315ex受体菌,在适宜温度培育下充分表达质粒,应用在不同温度培养下含药培养基上菌落数量变化及PCR方法,检测各转化株中质粒整合频率,验证质粒插入方向。结果成功构建4组迷你SCC重组质粒。转化株N315ex（pSR5attⅤ）、N315ex（pSR5attⅡ）和N315ex（pSR2attⅡ）中迷你SCC质粒以不同频度和特定方向整合入细菌染色体中,整合效率分别为8.600%、0.005%和7.200%。N315ex（pSR2attⅤ）中未见整合发生。结论与ccrAB仅可识别Ⅱ型SCCmec基因岛的attⅡ相比,ccrC重组酶可识别V型SCCmec的attⅤ和Ⅱ型SCCmec的attⅡ两组DNA片段,发挥其重组整合作用。     

DNA疫苗的转运途径及其安全性研究进展

目的总结DNA疫苗主要转运途径及其安全性的研究现状,探讨DNA疫苗的不同转运途径在动物实验和人类试验中的应用。方法应用M ed line、PubM ed及CNK I期刊全文数据库检索系统,以"DNA疫苗、电穿孔、基因枪、直接注射、喷雾、脂质体包裹"等为关键词,检索2008-2011年的相关文献,总共检索到英文文献97条。纳入标准:①DNA疫苗的一般特性;②DNA疫苗电传孔转运途径;③DNA疫苗基因枪注射途径;④DNA疫苗直接注射途径;⑤DNA疫苗黏膜免疫途径。根据纳入标准,符合分析的文献33篇。结果 DNA疫苗自偶然被发现以来,显示出了无法比拟的优越性,一举成为第三代疫苗。使用合适的转运途径能增加DNA疫苗在体内的免疫原性和转染效率。然而,转染效率的增加,使得人们对基因整合等安全性问题的担心更甚。结论 DNA疫苗通过合适的转运途径能够增加其在体内的免疫原形和转染效率,各种转运途径均是安全的。在不久的将来,DNA疫苗将能应用于人类,造福世界。但是在实验或临床试验中还是要关注并防止DNA疫苗安全性问题的发生。     

斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质的初步研究

目的：探讨斑须按蚊体内疟原虫雄配于体出丝的发生机制。方法：应用体外雄配于体出丝分析方法，检测斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配于体出鱼诱导物质对柏氏疟原虫雄配于体出丝的诱导活性并比较其在按蚊吸血前后的变化。结果：斑须按蚊唾液腺抽提物可在中性pH条件下诱导柏氏疟原虫雄配于体出丝；吸血后蚊唾液腺抽提物的雄配于体出鱼诱导活性明显减弱。结论：雌性斑须按蚊唾液腺中合有疟原虫雄配于体出丝诱导物质，并在吸血过程中消耗该物质。     

三种肾综合征出血热诊断方法的比较

目的探索一种更为敏感而特异的肾综合征出血热特异性抗体的检测方法。方法采用免疫-PCR、ELISA和IFAT三种方法检测130份HFRS患者血清中抗HFRS-IgG抗体。结果免疫-PCR方法的灵敏度为78．5％，特异性为100％；ELISA法和IFAT法的灵敏度分别为47．7％和49．2％。结论免疫-PCR方法的敏感性高于ELISA法和IFAT法．是适用于肾综合征出血热特异性抗体检测的好方法。