线粒体DNA4个多态性与宁夏汉族乳腺癌无相关性

 目的 探讨线粒体DNA（mtDNA）np16 189、np16 223、np16 519和D310区多态性及其交互作用与宁夏汉族乳腺癌及其临床病理特征的相关性。方法 用病例-对照法和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测195例乳腺癌患者和196例健康体检者各位点基因型,计算基因型频率,用χ2和OR（Odds ratio）检验分析单个、多个位点联合与乳腺癌的相关性,并分析各位点的基因型频率与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 1）mtDNA np16 189、np16 223和np16 519 3个位点的基因型频率在病例组和对照组中的分布无差异;D310区三种基因型在病例组高于对照组（OR=6. 6629,P＞0.05）,携带异质型的个体发生乳腺癌的危险性比携带突变型个体低（OR=0.216,95%CI为0.058～0.809）。2）4个多态性位点之间的交互作用在两组间无差异。3）4个多态性位点与乳腺癌临床病理特征间无相关性。结论 mtDNA np16 189、np16 223、np16 519和D310区及其交互作用与宁夏汉族乳腺癌无相关性。     

Vimentin基因敲除HIV-1 gp120转基因小鼠模型的构建

目的 构建波形蛋白（VIM）基因敲除和gp120转基因（gp120 Tg）小鼠模型。方法 将VIM基因敲除小鼠（VIM-/-）和gp120 Tg小鼠杂交（F0代）,然后在产生的子代（F1）中,取分组为VIM+/-/gp120Tg的小鼠一公一母杂交,得到基因型分别为VIM+/+、 VIM+/-、VIM-/-和VIM+/+/gp120 Tg、VIM+/-/gp120 Tg、VIM-/-/gp120 Tg的6组小鼠。其中VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/ gp120这4组小鼠互为对照。用PCR法鉴定这上述6组小鼠的基因型,免疫印迹法检测小鼠脑组织中VIM和gp120的表达情况。结果 4组基因型VIM+/+、VIM-/-、VIM+/+/gp120Tg和VIM-/-/gp120Tg小鼠的PCR结果符合预期,免疫印迹结果显示VIM-/-/ gp120Tg小鼠VIM无表达,gp120过表达（P<0.001）,符合预期结果。结论 成功构建了VIM基因敲除gp120转基因小鼠模型,为深入研究波形蛋白在gp120神经毒性作用中的作用机制提供了坚实的研究基础。     

SBi4211通过抑制S100B/RAGE表达减轻gp120诱导的中枢神经损伤

目的 研究S100B 抑制剂SBi4211（heptamidine）在人类免疫缺陷病毒-1（HIV-1）包膜蛋白gp120损伤中枢神经系统的作用。方法 通过U251细胞和SH-SY5Y细胞建立非接触式星形胶质细胞-神经元共培养体系,由gp120蛋白处理U251细胞激活神经炎症反应造成神经元损伤,体外水平探讨SBi4211在gp120诱导的中枢神经毒性中的作用;体内实验中,以8月龄gp120转基因小鼠模拟HIV相关神经认知障碍（HAND）模型,实验分为对照组、gp120组以及gp120+SBi4211组（SBi4211处理组）。采用CCK-8、流式细胞术检测神经元活性及凋亡情况,ELISA检测S100B及炎症因子IL-6、TNF-α表达水平,Western blot和免疫组织化学染色分析RAGE、GFAP、NeuN、Syn、MAP-2蛋白表达情况。结果 体外实验结果显示SBi4211可以显著抑制gp120刺激后U251细胞S100B、RAGE的表达（P<0.001）,降低炎症因子iNOS、IL-6和TNF-α的表达水平（P<0.001）,维持神经元相关标记蛋白NeuN、Syn的表达（P<0.001）。体内实验结果显示SBi4211显著降低gp120转基因小鼠S100B、RAGE表达及炎症水平（P<0.05）,并且抑制脑内星形胶质细胞活化,保护神经元的完整性（P<0.05）。结论 SBi4211可能通过下调S100B/RAGE表达,抑制gp120引发的神经炎症反应,继而阻断gp120的中枢神经毒性作用。     

不同海拔和光照对黄芩中7种黄酮类有效成分含量的影响

目的分析不同海拔、光照因素对黄芩中7种黄酮类有效成分量的影响,为黄芩种植最佳生长条件的选择提供理论依据。方法采用HPLC法同时测定人工种植的24批黄芩样品中野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、芹菜素、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A7种成分的含量,并采用方差分析法进行不同海拔、光照环境(阴坡、阳坡)与各成分量的相关性分析。结果同一生长年限,在海拔(550±30)、(650±30)m 2个范围,对黄芩中7种成分的量进行比较,其中黄芩苷、汉黄芩苷有极显著性差异(P0.01),野黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、汉黄芩素、芹菜素有显著性差异(P0.05);阴坡和阳坡2种不同的光照条件下,黄芩中7种成分的量相比,无显著性差异(P0.05)。结论在同一生长年限,随海拔的升高,黄芩中黄酮类成分的量都呈现明显的上升趋势,有显著性差异。而光照(阴坡、阳坡)不同时,黄芩中黄酮类成分的量无显著性差异,但除汉黄芩苷、黄芩素外,其他黄酮类成分含量的均数阳坡高于阴坡。黄芩人工种植宜选择阳光直接照射的平地或阳坡,同时及海拔偏高有利于提高黄芩中黄酮类化学成分总量的积累。     

《医宗金鉴》对张氏正骨流派学术思想的影响

《医宗金鉴》是清代由政府组织编写的综合性医学丛书,其立论精辟,尤重实用,对后世影响甚大。湖南岳阳张氏正骨始于清末,在张氏正骨发展过程中,不断吸收并结合了《医宗金鉴》等医学著作和民间特色技术,在继承的基础上体现了创新,强调“筋骨并重,内外调和”、“去瘀生新,气血相和”,逐渐形成了以“和”为核心的张氏正骨学术思想。本文着重探讨《医宗金鉴》对湖南岳阳张氏正骨相关学术思想和实际应用的影响。认为张氏正骨流派在正骨手法、内外方药、针推技术等方面继承了《医宗金鉴》主要的学术理念,并不断发展创新骨伤技术方法、药物应用等。     

A-40926混合物中B0组分的分离纯化

目的 开发一种高纯度A-40926混合物中B0组分(以下简称A-40926 B0)的分离纯化工艺。方法 采用中压色谱系统,以聚合物微球为载体,A-40926 B0的收率为指标,筛选聚合物微球的类型,优化洗脱条件。结果 型号为UniPS30-300的微球为最佳层析介质,上样量为10mg(每毫升填料),洗脱剂依次为体积分数30%,45%的乙醇溶液,流速为1.5BV/h(BV：层析柱体积);所得产品纯度大于95%,层析总收率大于75%。结论 此种高纯度A-40926 B0的分离纯化方法简单易行,收率稳定,适于工业化生产。     

高压液相色谱技术分离制备杆菌肽各组分的研究

目的 开发制备型高压液相色谱分离杆菌肽各组分的方法.方法 根据杆菌肽各组分化学结构性质,采用纳微UnisilC1s柱,通过改变流动相pH和流动相配比,以及不同的上样量,探索杆菌肽各组分分离的方法.收集分离得到的不同组分,经脱盐-冷冻干燥,得到相应杆菌肽组分冻干粉.结果 纳微Unisil C18柱可以用于杆菌肽各组分的分离,流动相配比为甲醇(A)∶[1.54‰乙酸铵水溶液(乙酸调pH至5.0)-乙腈(9∶1,V/V)] (B)=9.0∶ 11.0(V/V),总流速40 mL· min-1,上样量200mg,检测波长为254 nm.制备得到的杆菌肽各组分纯度均大于95％.结论 该方法上样量大,稳定性好,收集到的各组分纯度高,为杆菌肽各组分的分离制备提供了借鉴.     

距下关节镜辅助下经皮撬拨复位内固定治疗合并糖尿病的跟骨骨折

目的:探讨距下关节镜辅助下经皮撬拨复位内固定治疗合并糖尿病的跟骨骨折的临床疗效和安全性。方法:2016年3月至2019年7月收治22例闭合性跟骨骨折患者。男14例,女8例。年龄36~65岁,中位数48.5岁。根据Essex-Lopresti分型,舌型骨折6例、关节压缩型骨折16例。根据Sanders分型,Ⅱ型14例(ⅡA型5例、ⅡB型7例、ⅡC型2例)、Ⅲ型8例(ⅢAC型4例、ⅢAB型3例、ⅢBC型1例)。所有患者均合并2型糖尿病,1例合并同侧闭塞性下肢动脉硬化,2例合并下肢周围神经病变。均采用距下关节镜辅助下经皮撬拨复位内固定治疗。在X线片上测量患者的跟骨高度、宽度、长度、B-hler角、Gissane角,采用Burwell-Charnley骨折复位放射学标准评定复位情况,采用美国足与踝关节协会(American Orthopedic Foot and Ankle Society,AOFAS)踝与后足功能评分标准评定总体疗效。观察记录治疗及随访期间的并发症发生情况。结果:所有患者均获得随访,随访时间11~37个月,中位数13个月。术后3d拍摄的X线片显示,患侧的跟骨长度、跟骨高度、B-hler角、Gissane角均较术前增大[(73.41±4.51)mm,(81.21±2.20)mm,t=2.121,P=0.031;(32.34±3.60)mm,(41.21±3.20)mm,t=1.945,P=0.021;8.3°±2.1°,24.8°±3.2°,t=3.931,P=0.008;91.1°±4.7°,112.2°±1.4°,t=2.224,P=0.040],跟骨宽度较术前减小[(44.25±2.50)mm,(34.21±2.10)mm,t=-3.112,P=0.011]。术后1周时,按照Burwell-Charnley骨折复位放射学标准评定,解剖复位16例(SandersⅡ型13例、Ⅲ型3例),复位一般5例(SandersⅡ型1例、Ⅲ型4例),复位差1例(SandersⅢ型);复位评定为差的患者,随访期间未出现骨关节炎表现,未进行处理。末次随访时所有骨折均达到临床愈合标准;AOFAS踝与后足功能评分为(90.00±2.18)分;20例糖化血红蛋白<7%,2例糖化血红蛋白>7%,但均无糖尿病足表现。所有手术切口均愈合,其中21例3周内甲级愈合,1例术后6周时乙级愈合。所有患者均未发生跟骨骨髓炎、跟腱挛缩、创伤性马蹄内翻足、踝关节僵硬等并发症。结论:采用距下关节镜辅助下经皮撬拨复位内固定治疗合并糖尿病的跟骨骨折,可实现骨折的精准复位和有效固定,术后关节功能恢复好,并发症少。     

乙型肝炎患者骨髓间充质干细胞培养方法的优化和生物学特性

目的比较乙型肝炎患者骨髓间充质干细胞（MSCs）多种体外培养方法的效果，确定乙型肝炎患者MSCs的最佳体外培养方案；并对其生物学特性进行初步研究。方法比较2种接种方案和5种不同成分培养液的乙型肝炎患者MSCs体外培养成功率。比较5种不同成分培养液和4种换液方案的乙型肝炎患者MSCs生长曲线。进行乙型肝炎患者MSCs的形态观察和表面分子鉴定，传代培养以初步了解其生长特性。结果密度梯度离心接种法的体外培养成功率（88％）高于全骨髓接种法（76％），但差异无统计学意义。5种培养液的体外培养成功率差异有统计学意义（P〈0．01），其中患者自体血清培养液的培养成功率最高（100％），3种FBS培养液的培养成功率次之，健康成人血清培养液的最低（56％）。患者自体血清培养液的MSCs生长曲线最高，健康成人血清培养液的生长曲线最低，3种FBS培养液的MSCs生长曲线集中位于上述两者之间。以2d或者3d一次全量换液的MSCs生长曲线较高。乙型肝炎患者MSCs与正常人MSCs形态相同，表面分子表达一致，生长特性近似。结论乙型肝炎患者MSCs的体外培养方案以密度梯度离心法分离后，自体血清培养液进行培养，2～3d全量换液为佳，可以较快获得纯度较高的MSCs。乙型肝炎患者MSCs的生物学特性和正常人的近似。     

深海鱼油对人体安全性及降血脂作用研究

目的探讨深海鱼油对人体的安全性和降血脂作用。方法将120名符合条件的志愿者按血清TC水平分层随机分为试食组和对照组,试食组连续服用深海鱼油60 d,对照组服用安慰剂,然后分别测定两组人群血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平以及各项生理生化指标。结果试食组血清TC、TG和LDL-C水平均有下降,试食前后自身比较及试食后的组间比较结果差异均有统计学意义(P0.01)。试验前后两组人群除血脂外各项生理生化指标均未见异常。结论深海鱼油可以降低高血脂人群的血脂水平,且对人体健康无损害作用。