p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨p14ARF＜/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤(组织结构良好型,FH型;组织结构不良型,UFH型)中的表达及其意义.方法 收集近6年来本院保存的儿童神经母细胞瘤石蜡标本33例,男17例,女16例;年龄范围1个月～15岁,平均年龄33.1个月;随访时间21～87个月,平均随访时间45.5个月,其中UFH神经母细胞瘤10例,平均肿瘤分期3期;FH神经母细胞瘤23例,平均肿瘤分期2.57期.利用组织芯片的高通量、低误差、经济省时等优点,将二组标本制作成组织芯片,再行免疫组织化学SP法检测p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在神经母细胞瘤中的表达.结果 相对于FH神经母细胞瘤,UFH神经母细胞瘤中的p14ARF/p16β表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而Nestin和GFAP在二组肿瘤中表达均较低,Oct-4二组表达类似.二组之间差异无统计学意义(P0.05).UFH组失随访1例.平均随访时间34.5个月,随访时存活率66.6%;FH组失随访2例,平均随访时间49.5个月,随访时存活率80.9%,二组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 p14ARF/p16β基因的失活在肿瘤的发生中起着重要作用,UFH神经母细胞瘤中p14ARF/p16β的低表达表明了肿瘤分化较差,肿瘤分期较高;而Nestin、Oct-4和GFAP表达类似.表明了不同组织结构类型的神经母细胞瘤(FH型和UFH型)均具有一些最原始的神经干细胞的生物学特征,具有进一步分化的潜力.并使得神经母细胞瘤进展迅速,呈现恶性的组织表型.FH型预后相对较好,可能与患儿不同的年龄、肿瘤分期、是否转移和复发均有关.     

新生儿脐膨出两中心三年临床经验总结

目的 结合文献介绍不同类型新生儿脐膨出的临床处理方法和体会.方法 总结2004年6月～2007年8月间上海交通大学附属上海儿童医学中心和新华医院收治的21例新生儿脐膨出的病例,进行回顾性分析.总结脐膨出处理中的经验和教训.对新生儿脐膨出进行分型并根据不同分型提出不同的处理意见及处理中应注意的事项.结果 21例新生儿脐膨出,治愈15例,死亡5例,因出现并发症家属放弃治疗自动出院1例.总体生存率71.4%.5例死亡原因分别为合并先心肺炎心衰1例;1例腹壁关闭后恢复良好,夜间母亲喂乳不慎窒息死亡;因肝脏嵌顿继发多脏器衰竭死亡1例;新生儿合并颅内出血死亡1例;1例弃婴入院太晚,入院后出现感染致心衰、肾衰,治疗无效死亡;15例痊愈者随访10个月～4年,生长发育良好.结论 应对新生儿脐膨出进行正确的评估和分型,提出增加易嵌顿型脐膨出,根据不同的类型和囊膜情况作出不同的处理方法,以避免处理不当造成的严重后果.     

氰基丙烯酸酯系医用胶提高吻合口抗张力效果的实验研究

目的研究医用胶对肠管吻合术后抗张力的效果，探讨提高食管闭锁术后吻合口抗张力的能力，降低吻合口瘘发生率的方法。方法利用成年雄兔的小肠，使用拉力计增加吻合口张力以及气压计提高肠腔内气压的方法，人为造成在吻合口两端的高张力状态，定量对比手术后即刻及术后3d使用医用胶与否对吻合口抗张力效果的影响。结果手术后即刻的实验结果显示，使用医用胶后吻合口的抗最大拉力值明显高于对照组（P=0．0047），所能承受的最大气压值与单纯缝合组所测值有显著性差异（P〈0．0001）；术后3d，使用医用胶加强的吻合口抗拉力效果也明显高于对照组（P=0．0314）。结论使用医用胶能够增加吻合口抗张力的能力，有效防止吻合口瘘的发生。     

腔镜下矫治儿童先天性膈肌缺陷24例

目的介绍腔镜下手术矫治儿童先天性膈肌缺陷的治疗经验。方法2000年10月至2006年5月本院收治24例儿童先天性膈肌缺陷,其中先天性左后外侧膈疝2例,胸骨后疝1例,右侧局限性膈膨升1例,食管裂孔疝20例。对20例食管裂孔疝患儿采取腹腔镜下食管裂孔修补+胃底折叠术,其余病例均于腹腔镜完成手术。结果20例食管裂孔疝中,2例中转开腹完成手术。2例后外侧膈疝中,1例腔镜下顺利完成修补,另1例因缺损过大,镜下未能将疝入胸腔的脏器回纳腹腔,转开腹手术。1例胸骨后疝和1例右侧局限性膈膨升患儿均经腔镜下完成膈肌折叠修补术。24例均痊愈出院。随访1个月至5年,无复发,2例有轻度胃食管反流。结论腔镜下手术治疗儿童先天性膈肌缺损具有术中出血少、术后进食早、恢复快、切口瘢痕小的优点。     

RNA干扰对人神经母细胞瘤VEGF-A表达的抑制作用

目的 构建VEGF-A的短发夹RNA真核表达载体,并通过其介导的RNA干扰抑制人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y VEGF-A的表达.方法 根据VEGF-A的cDNA序列合成两对寡核苷酸片段,退火后分别插入真核表达载体组成重组质粒psc001、psc002,对重组质粒进行PCR、测序鉴定验证并经Western Blot筛选,然后将筛选所得的质粒转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y.转染48h后行Annexin V和PI双重标记流式细胞仪检测转染细胞凋亡情况,ELISA检测VEGF-A蛋白的表达水平.结果 PCR和测序证实寡核苷酸片段已成功插入质粒psc001、psc002中,流式细胞仪检测结果 显示转染的外源基因未引起显著的神经母细胞瘤细胞凋亡,ELISA结果 显示转染后细胞株SH-SYSY的VEGF-A蛋白表达受到显著抑制(P<0.05).结论 成功构建人VEGF-A的短发卡RNA真核表达载体,转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞后能显著抑制VEGF-A的表达,但没有引起显著的细胞凋亡(P0.05).     

6例Currarino综合征HLXB9基因突变的探讨

目的 研究Currarino综合征患者HLXB9基因突变情况.方法 采用PCR、DNA直接测序的方法对6例Currarino综合征进行HLXB9突变检测,突变经双向测序证实.结果 2例家族性Currarino综合征患儿中均发现1种新的杂合无义突变(c.552C>G;p.Tyr184X),而4例散发性病例未发现异常.结...     

大年龄儿童胃穿孔治疗:开腹与腔镜手术的分析

大年龄儿童胃穿孔在临床上并不常见,通常以急腹症来就诊,腹痛比较剧烈,以腹膜炎表现为主,需要急诊处理,如果延误诊治,会有生命危险.临床上常规需要进行剖腹探查,了解引起腹膜炎的原因.     

左卡尼汀纠治化疗所致儿童肝功能损害

目的探讨化疗导致的肝功能损害与体内左卡尼汀水平之间的相关性,观察左卡尼汀纠治化疗所致儿童肝功能损害的临床疗效。方法 60例既往肝功能损害恶性肿瘤患儿采用随机数字法随机分为对照组和治疗组(各30例),对照组静脉给予甘草酸二铵注射液5 mg.kg-1加入5%葡萄糖注射液100 mL中滴注,治疗组轻度肝损者仅给予左卡尼汀口服液100 mg.kg-1.d-1(10 d),中、重度肝损者同时静脉给予甘草酸二铵注射液,两组均为每日给药1次。采用串联质谱法测定血浆酯酰肉碱谱和血液游离氨基酸水平。并在治疗d 6和d 11,复查血浆左卡尼汀浓度和肝功能。结果治疗组轻度肝功能损害患儿口服左卡尼汀与对照的疗效相似,而治疗组中度和重度肝损患儿联合应用左卡尼汀与甘草酸二铵治疗后肝功能恢复明显快于对照组(P=0.020 4)。治疗组的血浆游离肉碱和丙酰肉碱浓度明显高于对照组[(44.20±18.59)μmol.L-1vs.(30.22±10.34)μmol.L-1,P=0.047,(2.73±1.67)μmol.L-1vs.(1.88±0.59)μmol.L-1,P=0.001],治疗组的乙酰肉碱水平高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.061)。氨基酸谱测定分析显示:肿瘤患儿的精氨酸水平明显低于正常儿童,尤其是化疗后出现肝功能损害时下降更显著(P=0.043 1),予以干预保肝治疗后,随着肝功能恢复精氨酸水平明显升高(P=0.001 7)。化疗后肝功能损害的患儿,丙氨酸转氨酶水平与血浆游离肉碱水平之间存在明显的负相关性(r1=-0.724 8),乙酰肉碱浓度亦随着肝功能损害的加重逐渐下降(r2=-0.651 7)。结论本研究提示恶性肿瘤患儿化疗后肝功能损害与血浆酯酰肉碱低水平密切相关。给予左卡尼汀治疗可减轻化疗患儿的肝功能损害、加速肝功能的恢复。     

缺氧对神经母细胞瘤分化影响的研究进展

神经母细胞瘤是儿童和婴幼儿最常见的实体肿瘤之一,生长迅速,恶性程度高。半数以上患儿就诊时已是晚期(Ⅲ、Ⅳ期),使得治疗效果不明显。但是,少数恶性神经母细胞瘤可以向良性转归;同时,肿瘤生长过程中普遍存在缺氧的现象,在缺     

先天性食管闭锁镜下手术的发展

食管闭锁是腔镜手术涉及较迟的病种之一.自上世纪80年代末期腹腔镜探索性的涉足小儿外科病种后,至上世纪90年代初,开始见有大量腹腔镜应用于各类儿童消化道疾病的临床报告,延至1999年始见首例胸腔镜下新生儿食管闭锁纠治术的报告[1],此后在欧美国家也陆续见有小宗的临床报告[2-4],并且多数见于伴有远端食管气管瘘的Ⅲ型食管闭锁,而所有报告均给出结论,胸腔镜下修复食管闭锁和食管气管瘘是可行的.