苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的克隆及原核表达

以载有银田牌长白苦瓜MAP30基因(YT-MAP30,Genebank accession No:DQ643968)的质粒DNA(pMD-YT-MAP30)为模板,PCR扩增其成熟肽编码区YTm-MAP30,与原核表达载体pET-30a(+)连接构建重组表达质粒pET-YTm-MAP30,酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS感受态细胞,菌落PCR筛选鉴定阳性菌落。30℃培养阳性菌落,IPTG诱导表达不同时间,其表达产物用SDS-PAGE检测并进行可溶性分析。DNA测序结果表明重组质粒pET-YTm-MAP30中YTm-MAP30的序列和插入位点正确。SDS-PAGE分析结果显示IPTG诱导4 h后在35 kD处出现一条增加的表达蛋白条带,且以可溶形式表达。为应用原核表达系统生产MAP30蛋白提供了实验依据。     

仙人掌抗菌肽的筛选、分离纯化及性质研究

目的:研究仙人掌植物是否具有起抑菌作用的抗菌肽,并对其进行分离纯化和部分性质研究。方法:采用梯度盐析的方法提取6种仙人掌不同饱和梯度硫酸铵沉淀的蛋白质组分进行抑菌性试验,筛选蛋白质组分具有抗菌效果的仙人掌品种。用Sephadex G-75和Sephadex G-25柱层析对抗菌效果最为显著的蛋白质组分进一步分离纯化,并对纯化到的具有抗菌活性的多肽物质进行分子量、理化性质和抗菌活性检测。结果:发现4种仙人掌中存在对金黄色葡萄球菌有抗菌作用的小分子量蛋白质成分。其中金手球所含蛋白质组分的抗菌效果最为显著,并从中分离纯化得到具有抗菌活性的多肽物质,命名为MH-AMP-1。MH-AMP-1的分子量(Mr)约为8511 Da,在pH 2.5~7.5的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,且具有一定的热稳定性,对检测的病原菌具有广谱抗菌活性。     

溴甲烷和硫酰氟对进境美国苜蓿草的穿透效果研究初探

为明确溴甲烷和硫酰氟对捆包苜蓿草的熏蒸穿透效果,本文分别使用溴甲烷和硫酰氟对捆包苜蓿草进行了帐幕熏蒸,并研究了2种熏蒸剂在苜蓿草不同深度内的穿透。结果表明,随熏蒸进行,2种熏蒸剂均可逐渐穿透到捆包苜蓿草内部(60 cm深度),其中溴甲烷完全穿透至60 cm深度的时间为24 h,高浓度熏蒸48 h后,苜蓿草内部20 cm、40 cm和60 cm处的溴甲烷浓度仍仅有外部空间的77.3%、57.8%、56.2%;硫酰氟完全穿透60 cm深度的时间为8~12 h,高浓度熏蒸48 h后,20 cm、40 cm、60 cm深度内的硫酰氟浓度分别是空间硫酰氟浓度的102.2%、101.8%、97.2%,苜蓿草内部硫酰氟浓度与外部空间浓度基本达到平衡。这些结果表明,硫酰氟熏蒸对进境捆包苜蓿草的穿透力强于溴甲烷。     

柳叶蜡梅醇提物对大黄鱼营养代谢的影响

在水温15℃～25℃和盐度24.2～27.7下，将体质量（10.31±2.88）g的大黄鱼（Larimichthys crocea）饲养在长4 m×宽2m×高2.5 m的养殖池中，投喂添加0.5%、1%、2%和4%柳叶蜡梅（Chimonanthus salicifolius）乙醇提取物的饲料，8周后采集大黄鱼的肌肉、肠、胃和肝脏组织，分析消化酶及肝脏中营养物质代谢酶活性的影响，探究柳叶蜡梅醇提物对大黄鱼营养物质消化和代谢的影响。结果发现：4%的柳叶蜡梅醇提物能提高了大黄鱼肝脏和胃肠道中α淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的活性，促进大黄鱼胃肠道中消化酶的分泌，改善大黄鱼对饲料中营养物质的吸收；柳叶蜡梅醇提物通过提高丙酮酸激酶（PK）、己糖激酶（HK）和超氧化物歧化酶（SOD）酶的活性，增强鱼体内糖酵解能力和抗氧化能力；柳叶蜡梅醇提物可以有效降低大黄鱼体内脂肪合成酶（FAS）、苹果酸脱氢酶（ME）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH）的活性、丙二醛（MDA）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量，提高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、高激素敏感性甘油三酯脂肪酶...     

不同番茄品种番茄黄化曲叶病毒抗性基因分析及田间抗性评价

为了明确抗性基因对番茄黄化曲叶病毒的抗性水平及田间应用效果，本研究利用已报道的番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1、Ty-2、Ty-3及Ty-3a的分子标记对43个番茄品种(含供试品种37个，对照品种6个)进行抗性基因型分析，并采用田间自然鉴定方法验证不同抗性基因型的抗性水平。结果表明：43份参试番茄品种中，31个品种携带抗病基因，占全部参试品种的72.09%,其中Ty-1检出率为65.12%,在番茄抗病毒病育种中应用最为广泛；共检出10种抗性基因型，分别包括1～3种抗性基因，对番茄黄化曲叶病毒的抗性由高到低依次为：Ty-1/ty-1+Ty-2/ty-2+Ty-3a/ty-3a、Ty-1/Ty-1+Ty-2/ty-2+Ty-3a/ty-3a、Ty-1/Ty-1、Ty-1/ty-1+Ty-3/ty-3、Ty-1/ty-1+Ty-3a/ty-3a、Ty-1/Ty-1+Ty-3a/ty-3a、Ty-3a/ty-3a、Ty-1/ty-1+Ty-2/ty-2、Ty-1/ty-1、Ty-2/ty-2,其中含有单基因杂合抗性的番茄品种，抗性表现为中抗或感病；含有2个及2个以上抗性基因的品种表现为中抗或以...