脑脉络丛组织中锰毒性差异表达蛋白的体外验证

目的本实验室前期研究在锰染毒体内实验模型的大鼠脑脉络丛组织中鉴定到32个锰毒性相关的差异蛋白。本试验挑选出其中7个差异表达蛋白,包括抑制素蛋白(PHB1)电压阴离子通道(VDAC)、肌动蛋白β亚型(β-Actin)、应激性磷蛋白1(STI1)、热休克蛋白70(HSP70)、转甲状腺素蛋白(TTR)和中间丝波形蛋白(Vimentin),在大鼠永生化脉络丛上皮Z310细胞体外染锰模型中,对其蛋白和mRNA水平的变化趋势进行验证。方法氯化锰(0、50、100和200μmol/l)染毒Z310细胞24 h,采用蛋白印迹法(Western Blot)测定7个锰毒性相关蛋白的蛋白表达水平;同样剂量的氯化锰染毒Z310细胞12 h,以实时定量逆转录聚合酶链式反应法(Real time-RT PCR)测定7个蛋白在mRNA水平的表达情况。结果随着剂量的增加PHB1、β-Actin和STIP1在蛋白表达与mRNA水平均表现为上调的效应趋势,VDAC、HSP70、TTR和Vimentin在蛋白表达与mRNA水平均表现为下调的效应趋势;PHB1、β-actin、STIP1和TTR在Z310细胞中的表达效应趋势与体内动物模型脑脉络丛中锰毒性差异蛋白的变化趋势相符,而VDAC、HSP70和Vimentin在Z310细胞中的表达效应趋势则与之相反。结论氯化锰对PHB1、β-actin、STIP1和TTR的毒性效应在体内和体外是一致的,染锰后其蛋白表达和mRNA水平的变化趋势是可靠准确的。这为开展锰致脑脉络丛组织及其上皮细胞的毒性效应及其分子机制研究提供了有价值的线索。     

超声引导下置中心静脉管治疗肝脓肿37例

目的超声引导下置中心静脉管在肝脓肿治疗中的运用价值。方法对37例肝脓肿大于3cm并有液化的患者,行经皮肝脓肿穿刺中心静脉管置管引流术。结果 37例细菌性肝脓肿患者穿刺术中及术后均未出现出血、胆漏、周围脏器损伤等并发症,治愈出院。结论中心静脉导管经皮肝脓肿穿刺引流可操作性强,创伤小,风险低,疗效确切,并发症少,在能开展上腹部手术的基层医院应该得到广泛应用。     

非诺贝特缓释胶囊栓的制备及其生物利用度研究

 目的 采用乳化固体分散技术制备非诺贝特缓释胶囊栓。并以非诺贝特为模型药物来说明制剂方法及原理。方法 混合存在极性差异的低熔点原辅料,加热使混合物液化,在乳化剂的作用下,使原本分离的两相混合,形成分散相和连续相,所形成的乳液灌装胶囊,冷却后形成乳化固体分散体胶囊栓。考察该胶囊栓的溶出及所形成的微粒粒径。并与市售缓释品种进行生物利用度比较。并探讨该制剂方法的制剂原理。结果 该胶囊栓具有缓释特征;电镜检查结果显示,该胶囊栓中所形成的微粒粒径可达到1 μm左右;与市售产品相比,生物利用度有了大幅度提高。结论 该制剂方法可以以低成本制备高生物利用度的非诺贝特缓释胶囊栓。     

胃癌血清CA72-4、MG7-Ag、CEA与临床生物学行为的关系

目的检测胃癌患者血清CA72-4、MG7-Ag、CEA含量,并分析其与胃癌临床生物学行为的关系。方法应用酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法对61例胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量进行检测,并分析与胃癌临床生物学行为的关系。结果胃癌患者血清CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明显高于相应的正常对照组（P〈0.01）;三者联合检测较单一指标检测阳性率明显升高（P〈0.01）;胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag含量与胃癌Borrmann分型、浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关;CEA含量与肿瘤大小、Borrmann分型、浸润深度、临床分期密切相关（P〈0.05或〈0.01）。结论检测血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA将有助于判断胃癌的转移、复发及监测预后。     

大鼠重症急性胰腺炎肝损伤经胸导管引流干预时NF—κB、IL-6、TNF-α的表达及意义

目的探讨胸导管引流减轻大鼠重症急性胰腺炎肝损伤的作用及机制。方法采用经胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠法制备大鼠急性胰腺炎模型。大鼠随机分为假手术（sham operation. SO）组、重症胰腺炎模型（severe acute pancreatitis , SAP）组、重症胰腺炎＋胸导管引流（ cervical thoracic duct drainage, DC）组,各组均在2、6、12h3个时间点进行观察。酶联免疫法检测大鼠血浆谷氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（ aspartate aminotransferase, AST）、肿瘤坏死因子-α（ tumor necrosis factor - α, TNF - α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的含量;以Westernblot法检测各组动物在各时间点肝脏组织中核因子一KB（nuclear factor—κB,NF—κB）p65蛋白表达情况。结果①3个时间点SAP组和DC组血浆ALT、AST、TNF—d和IL一6的含量均明显高于SO组,SAP组各指标均高于DC组（P〈0．05）;②2h时3组动物NF—KBp65表达SAP组和DC组已明显高于SO组（P〈0．05）;6h时SAP组、DC组NF—KBp65表达进一步升高,SAP组升高更为明显（P〈0．01）;12h时SAP组NF～κBp65表达又有增强,与DC组相比明显升高（P〈0．05）,Dc组高于SO组（P〈0．05）。结论胸导管引流对减轻重症急性胰腺炎合并的肝脏损伤有积极作用,其机制可能是胸导管引流可减少NF-κB的激活,使炎症因子TNF-α、IL-6分泌减少。     

HepG2细胞系皮下接种与肝原位接种成瘤的比较研究

目的 探讨皮下接种成瘤与原位接种成瘤在内环境不同情况下对肿瘤生长、侵袭转移能力的影响.方法 选取人肝癌细胞系HepG2进行体外培养.将BALB/c裸鼠随机分为皮下瘤接种、肝脏原位细胞接种两组.观察裸鼠成瘤率、裸鼠存活率、肿瘤生长速度、肿瘤病理学特点及远处脏器转移.结果 HepG2细胞体外生长状态良好,增殖活跃.皮下接种成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围组织有侵袭,但无转移.肝脏原位细胞接种组成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围肝组织和腹壁有侵袭,肝内转移率70%,肺转移50%.结论 HepG2细胞皮下和肝原位接种易成瘤,可用于肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)体内研究的实验模型.如果进行HCC的侵袭转移的机制及药物干预治疗等方面的研究,肝原位接种成瘤更能模拟人类肿瘤生长的条件.     

奥氮平治疗老年精神分裂症对照观察

本研究用奥氮平治疗老年精神分裂症,以氯氮平为对照进行观察,报告如下. 1 对象和方法 为近5年来我院住院老年患者,均符合中国精神障碍分类与诊断标准第3版精神分裂症诊断标准;年龄60～70岁;1个月内未服用抗精神病药;排除高血压、糖代谢异常、药物、酒依赖;实验室检查及心电图均正常.     

胃癌组织核转录因子κB p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性的关系

目的 分析胃癌组织中核转录因子κB（NF-κB）p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性（MDR）的关系,并探讨其意义。方法 选取2013年1-12月在河北医科大学第四医院外三科手术切除并经病理证实的68例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织。采用免疫组化（SP）法检测胃癌组织及癌旁组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2、Bax蛋白表达;采用体外药物敏感实验（MTT法）检测胃癌组织细胞对氟尿嘧啶（5-FU）、长春新碱（VCR）、紫杉醇（PTX）、奥沙利铂（L-OHP）、表阿霉素（eADM）的体外化疗药物敏感性。结果 胃癌组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2蛋白强表达率均高于癌旁组织,Bax蛋白强表达率低于癌旁组织,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织NF-κB p65与P-gp蛋白表达呈正相关（rs=0.321,P=0.008）,NF-κB p65与Bax蛋白表达呈负相关（rs=-0.333,P=0.006）,NF-κB p65与Bcl-2蛋白表达无直线相关关系（rs=0.231,P=0.058）。在胃癌组织中,5-FU、PTX对NF-κB p65强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、PTX、L-OHP对P-gp强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、PTX、eADM对Bcl-2强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、L-OHP、eADM对Bax强表达者肿瘤细胞抑制率高于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃癌组织中NF-κB p65表达增高,其可能通过调控P-gp、Bax蛋白表达而参与胃癌MDR。     

胃癌耐药细胞株SGC7901/阿霉素中miR-185的表达及对细胞多药耐药性的影响

目的 检测miR-185在胃癌组织及细胞株中的表达,探讨miR-185在胃癌多药耐药性（MDR）发生机制中的作用。方法 选取2014年3-5月于河北医科大学第四医院行胃癌切除术的20例患者胃癌及癌旁组织标本,荧光定量PCR技术检测胃癌及癌旁组织和人胃腺癌细胞株SGC7901、正常胃上皮细胞株GES-1、耐阿霉素（ADR）的胃癌MDR细胞株SGC7901/ADR的miR-185表达水平。采用miR-185模拟物或无关对照序列转染细胞株SGC7901/ADR,检测其对化疗药物ADR、5-氟尿嘧啶（5-FU）、草酸铂（L-OHP）的敏感性,荧光定量PCR和Western blotting技术检测多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1、GST-π、LRP的mRNA及蛋白表达水平。结果 癌旁组织和胃癌组织miR-185相对表达水平分别为（0.910±0.142）、（0.243±0.045）,差异有统计学意义（t=20.025,P＜0.001）。细胞株GES-1、SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平分别为（0.903±0.117）、（0.630±0.101）和（0.191±0.030）,差异有统计学意义（F=46.850,P＜0.001）。其中,细胞株SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于GES-1,细胞株SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于SGC7901（P＜0.05）。ADR、5-FU和L-OHP对不同转染处理后的细胞株SGC7901/ADR抑制率比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。其中,ADR、5-FU和L-OHP对miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR抑制率高于未转染和无关对照序列转染（P＜0.05）。经不同转染处理后,细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。其中,miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平低于未转染和无关对照序列转染（P＜0.05）。结论 胃癌细胞miR-185表达下调,通过上调miR-185的表达可提高胃癌细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能是miR-185调控部分多药耐药基因的表达。     

应用不同版智商常模对同一批儿童智商的分析

目的 验证第二次修订的中国联合型瑞文测验智商常模的实用性和准确性。方法 应用中国联合型瑞文测验图册和ＣＲＴ－ＲＣ,ＣＲＴ－ＲＣ２及ＣＲＴ－ＣＣ,ＣＲＴ－ＣＣ２,测验及判定同一批农村,城市的７－１４岁儿童智商水平。结果 ＣＲＴ－ＲＣ的智商均值为１０４．７５±１３．８３,智商呈轻度偏态分布,ＩＱ≤７９占７．６％,ＩＱ≥１２０占１２．７％,两者差异显著;