尿激酶的分离与纯化研究

通过大量的文献资料查阅和实验操作,对尿激酶从人尿中分离及纯化的方法技术进行了研究。结果表明:本工艺用硅胶从尿液中提取尿激酶,粗提收率为60%～80%,比活为1000IU(mgpro)-1;利用以Sepharose4B为基质、肌酸为亲和配基的亲和层析柱精制尿激酶,平均活性收率为81%,比活为5.28×104IU(mgpro)-(1纯化倍数为52.8倍)。     

制备型液相色谱法分离千层塔中石杉碱甲

采用高效液相色谱技术,分离制备千层塔中石杉碱甲。制备色谱条件:色谱柱(ID63×700mm,DiamonsilC18,粒径25～40μm);流动相:氯仿—甲醇—氨水(840:24:1.2);流速:70mL/min;检测波长:311nm;进样体积5mL。1.6kg千层塔可提取出320mg石杉碱甲(纯度>90%)。采用高效液相色谱方法进行了纯度检测,符合纯度要求。     

制备色谱纯化冬凌草活性成分冬凌草甲素

冬凌草采用95%乙醇热浸取法保温回流30min,过滤,提取液经浓缩得到粗品冬凌草甲素浸膏。粗品冬凌草甲素经反相制备色谱分离纯化,分离条件为:色谱柱(ID63×700mm,Diamonsil C18,粒径25～40μm);流动相:甲醇-水(55:45);流速:35mL/min;检测波长:239nm;进样体积5mL。将收集到的洗脱液蒸发浓缩干燥,得冬凌草甲素粉末。120g冬凌草可提取得370mg冬凌草甲素(纯度>99%)。所得产品经高效液相色谱方法鉴定纯度。