三甲基氯化锡对亚慢性染毒大鼠肾氢钾ATP酶活力及蛋白与基因表达的研究

目的 探索三甲基氯化锡(trimethyltin chloride,TMT)对亚慢性染毒大鼠肾氢钾ATP酶活力、蛋白和基因表达水平的影响.方法 取6周龄雌性SD大鼠55只,随机分成对照、低剂量、中剂量、高剂量和超高剂量组,共5组,每组11只,分别按0、8.20、32.81、131.25、262.50μg·kg-1·d-1的TMT剂量经饮水亚慢性染毒,14周后测定血钾水平,取大鼠肾脏,用定磷法测量氢钾ATP活力,用免疫印迹法测定肾氢钾ATP酶蛋白表达水平,用实时定量-聚合酶链反应法测定肾氢钾ATP酶的mRNA表达水平.结果 与对照组[(6.9±0.3)mmol/L]比较,超高剂量组血钾水平[(5.6±0.4)mmol/L]明显降低,差异有统计学意义(P＜.01).低剂量和超高剂量组氢钾ATP酶活力分别为(4.50±1.45)、(435±-0.72)μmolPi·mgprot-1·h-1,明显低于对照组[(6.55±0.77)μmolPi·mgprot-1·h-1],差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,超高剂量组氢钾ATP酶蛋白和mRNA表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 TMT亚慢性接触可抑制氢钾ATP酶的活力,但不抑制该酶的蛋白和基冈表达.

Abstract：

Objective To study the activity、protein and gene expression of renal HK-ATPase (HKA) in rats subchronicly exposed to trimethyltin chloride (TMT). Methods In subchronic toxic test (14-week), 55 female SD rats (age, 6 weeks) were divided randomly into 5 groups: control, low, medium, high and super high dosage, respectively, which drank water with TMT of 0, 8.20, 32.81, 131.25 and 262.50 μg·kg-1 ·d-1 for 14 weeks.Then serum K+ levels were measured; the activities of H K-ATPase (HKA) in kidneys were detected by the method of determinenate phosphorus content;Western Blot assay and real-time PCR were used to exam the protein and mRNA expression levels of HKA in kidneys, respectively. Results The serum K + level in super-high dosage group was (5.6±0.4) mmol/L, which was significantly lower than that [(6.9±0.3) mmol/L] in control group (P＜0.01).The HKA enzymatic activity of kidneys in low and super high dosage groups was 4.50±1.45 and 4.55±0.72 μmolPi·mg prot-1h-1, respectively, which were significantly lower than that (6.55±0.77 μmol Pi ·mg prot-1h-1) in control group (P＜0.05). Conclusion When rats were exposed subchronicly to TMT, the renal HKA activity could reduce, but the expression levels of HKA protein and mRNA did not decrease.     

Ras和TβRⅡ在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Ras和TβRⅡ蛋白与外阴鳞癌发生发展的关系.方法:采用免疫组化法检测Ras和TβRⅡ在外阴鳞癌中的表达情况,并结合临床病理资料进行分析.结果:Ras蛋白在外阴鳞癌的表达明显高于正常外阴皮肤,差异有统计学意义(P＜0.05);在外阴鳞癌Ⅲ期中表达明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P＜0.05);有淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移(P＜0.05);外阴鳞癌低、中分化和高分化之间表达没有统计学差异(P＞0.05).TβRⅡ在外阴鳞癌的表达明显低于正常外阴皮肤(P＜0.05);在外阴鳞癌Ⅲ期中表达明显低于Ⅰ-Ⅱ期(P＜0.05);中低分化的表达明显低于高分化(P＜0.05);有淋巴结转移的表达明显低于无淋巴结转移(P＜0.05).Pearson相关性分析结果表明:在外阴鳞癌中Ras与TβRⅡ蛋白的表达呈负相关.结论:Ras高表达和TβRⅡ低表达可能与外阴鳞癌的发生、发展有关.     

外阴颗粒细胞瘤1例并文献复习

<正>1 病例简介患者,女,26岁,以"发现外阴肿物2年"于2018年10月就诊于我院。患者2年前于右侧小阴唇上方触及1cm左右质硬肿物,无痛,不痒,未就诊,肿物未见明显增大,现因局部不适感来诊。患者在门诊行外阴病灶活检,病理回报:颗粒细胞瘤。查体:双侧腹股沟未触及肿大淋巴结。妇科检查:外阴发育正常;右侧小阴唇上方,靠近阴蒂部位,可见粉白色外生的质硬结节,直径约1.5cm,界限清楚,基底部活动,无触痛。采用外阴肿物局部扩大切除术,术中剖视     

CLC-3与GIRK1基因在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨容量调控性氯离子通道（CLC-3）与内向整流型钾离子通道（GIRK1）在宫颈癌中的表达及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测60例宫颈癌组织,10例经放化疗前后的宫颈癌组织,10例正常宫颈组织中的CLC-3 mRNA 与GIRK1 mRNA的表达。结果:CLC-3 mRNA在正常宫颈组织中与宫颈癌组织中的灰度值的比值为0.691 2及2.393 7,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3 mRNA在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为1.318 7、1.571 8及4.589 9,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为1.084 2,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期表达为3.568 8,差异有统计学意义（P<0.01）。CLC-3基因在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.519 8与放化疗后的0.223 7相比,有显著性差异(P<0.01）。GIRK1 mRNA在正常宫颈组织中与宫颈癌组织中的灰度值的比值为0.025 2及1.547 2,差异有统计学意义（P<0.01）。在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为0.985 5、0.856 4及1.862 7,差异有统计学意义（P<0.05）。GIRK1 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为 0.989 6,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期表达为1.974 2,差异有统计学意义（P<0.01）,GIRK1 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.371 0与放化疗后的0.293 9相比,有显著性差异(P<0.01）。结论:CLC-3及GIRK1基因在宫颈癌中高表达,与宫颈癌的不良预后有关。放化疗可降低CLC-3及GIRK1基因的表达,与疗效相关。     

真菌Aspergillus sp. HT-2次级代谢产物的研究

 目的 对曲霉属真菌Aspergillus sp. HT-2的代谢产物进行研究。方法 应用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱、半制备HPLC等方法进行代谢产物的分离。根据波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。 结果 从中分离得到了13个化合物,分别鉴定为（-）-chaetominine （1）,fumiquinazoline J（2）,fumitremorgin C（3）,cyclotryprostatin B（4）,(3S,6S,12S,13S)-(+)-verruculogen TR-2（5）,gliotoxin（6）,bisdethio-bis(methylthio)gliotoxin（7）,didehydrobisdethio-bis (methylthio)gliotoxin（8）,helvolic acid（9）,pseurotin A（10）,麦角甾醇（11）,2,5-dimethylresorcinol（12）,胸腺嘧啶（13）。结论 所得化合物包括硫代二酮哌嗪类3个,喹唑啉类生物碱2个,吲哚类生物碱3个,螺内酰胺类生物碱1个,降三萜1个,甾体类等共13个化合物。所有化合物均为首次从该属陆地真菌分离得到。     

CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润与外阴上皮内非瘤样病变的相关性

目的 通过检测CD4+T细胞:CD8+T细胞和CD34蛋白表达阳性细胞标记的微血管数目在外阴上皮内非瘤样病变中的表达情况,探讨细胞免疫和微循环改变与外阴上皮内非瘤样病变发生的关系.方法 采用免疫组化S-P法分别检测CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD34阳性细胞在20例外阴鳞状上皮增生和40例外阴硬化性苔藓病变中的表达,取10例正常外阴皮肤作对照.结果 CD4+T细胞在外阴鳞状上皮增生和外阴硬化性苔藓中的表达均明显低于正常外阴皮肤(P均<0.05).CD8+T细胞在外阴硬化性苔藓中的表达明显高于正常外阴皮肤和外阴鳞状上皮增生(P<0.05).CD34 阳性细胞标记的微血管数目在外阴鳞状上皮增生中较正常外阴皮肤稍增多,两者相比无显著性差异(P>0.05);在外阴硬化性苔藓晚期病变中微血管数目明显减少,与正常外阴皮肤相比有显著性差异(P<0.05).结论 外阴鳞状上皮增生真皮内细胞免疫无明显增强,炎性细胞浸润可能与微血管的扩张有关.外阴硬化性苔藓病变组织内存在免疫应答过度,造成局部组织细胞的破坏,进一步证明外阴硬化性苔藓可能是一种自身免疫性疾病.外阴硬化性苔藓病变晚期的胶原纤维化和细胞透明样变,导致微血管数目的 改变.     

三甲基氯化锡的大鼠及小鼠蓄积毒性实验研究

目的 探讨三甲基氯化锡(TMT)在大小鼠体内的蓄积毒性.方法 采用霍恩氏法测定TMT对昆明小鼠急性经口半数致死量(LD50)值;用剂量递增法测定TMT经口灌胃在SD大鼠和KM小鼠体内的蓄积系数,并观察死亡大鼠主要靶器官的病理学变化.结果 TMT经口灌胃对雌、雄性SD大鼠的蓄积系数均为K=1.7;TMT对雌、雄性KM小鼠的LD50分别为3.69和3.16 mg/kg体质量,蓄积系数均为K=3.8.TMT主要引起小脑皮质弥漫性的脂肪空泡形成,脑干神经元肿胀、坏死,脾脏弥漫性纤维化.结论 TMT对大鼠属明显蓄积,对小鼠属中等蓄积,主要病理损伤器官为小脑、脑干和脾脏.     

鼠尾胶原蛋白海绵止血作用研究

目的制备一种高纯度的鼠尾胶原蛋白海绵,研究鼠尾胶原海绵的止血作用。方法用制备的鼠尾胶原蛋白海绵对新西兰兔耳缘静脉、耳缘动脉、肝脏、股动脉创面止血,观察其止血时间、敷料与创面的黏合情况、再出血、渗血和吸收及伤口愈合情况。结果鼠尾胶原海绵组、胶原蛋白海绵组耳缘动脉、肝脏、股动脉创面止血时间与对照组比较明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);同时,鼠尾胶原海绵组在肝脏、股动脉创面止血时间比胶原蛋白海绵组缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。鼠尾胶原蛋白海绵在对创面的修复性能上优于胶原蛋白。结论鼠尾胶原蛋白及其冻干海绵可以作为人工皮肤及创伤敷料研究的首选材料,同时也为鼠尾胶原蛋白海绵用于止血、创面修复及进一步研究其止血机制提供事实依据。     

外阴癌和癌前病变中表皮生长因子及受体的表达

用免疫组化法检测表皮生长因子（ECF）和受体（EGFR）在外阴上皮内瘤变（VIN）和外阴鳞癌（VSCC）中的表达.结果：EGFR在40%的外阴正常鳞状细胞中的少数基底细胞中表达,在40%的VIN Ⅲ高度异型增生的细胞中表达和64%外阴鳞癌的一些恶性细胞中表达.EGF在20%的VIN Ⅰ-Ⅱ,10%VIN Ⅲ和100%的VSCC胞浆中表达.EGF的表达是外阴癌变的早期信号.EGF及其爱体的过度表达导致VIN Ⅲ和癌变的鳞状细胞的增值.EGFR表达与64%VSCC细胞自发癌变有关.