APP695K595N/M596L突变转基因小鼠的建立和病理表型动态分析

目的建立APP695K595N/M596L(Swedish突变)转基因小鼠和评价痴呆表型的发生和发展过程。方法将APP695K595N/M596L突变基因插入到小鼠朊蛋白(mouse prion protein)启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695K595N/M596L突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,Western blotting检测APP突变基因表达。Thioflavin-S染色检测不同年龄转基因小鼠大脑病理改变。Morris水迷宫动态观察小鼠行为学改变。结果建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,Thioflavin-S染色显示转基因小鼠9月龄时在脑海马区可检测到老年斑形成,并且在11、12月龄时明显增多。Morris水迷宫结果发现与同月龄野生型小鼠相比,该转基因小鼠5月龄开始出现学习记忆能力缺陷,7、9、11月行为学结果证实转基因小鼠的学习记忆能力缺陷随年龄增加而日趋严重(P<0.05)。结论建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,并能再现人类阿尔茨海默症的行为学及神经病理学特征,为阿尔茨海默病发病机制研究和药物研发提供了有价值的动物模型。     

秦岭白蜡树属药用植物体外抗菌作用实验研究

目的:探讨秦皮类中药来自木犀科白蜡属多种植物,体对抗菌作用机制,方法:采用试管法,对白蜡树属药用植物进行了初步的抗菌实验研究。选常见易产生耐药性的化脓性病原菌和肠道病原菌,并以黄连、紫花地丁为对照。结果:白蜡树属9种药用植物与核桃木秋对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、宋内氏痢疾杆菌、志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌等8种致病菌皆有不同程度的抑(杀)菌作用     

MKP1基因对小鼠造血干细胞功能的影响

目的 通过构建MKP1转基因小鼠模型,研究MKP1基因对造血干细胞自我更新能力的影响.方法 运用显微注射法建立MKP1转基因小鼠;PCR和RT-PCR检测MKP1基因在转基因小鼠的表达水平;流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测MKP1转基因小鼠骨髓干细胞的功能.结果 建立了MKP1转基因小鼠;MKP1转基因小鼠骨髓干细胞数量减少;竞争性骨髓移植实验显示MKP1转基因骨髓干细胞来源的外周血细胞总数、B细胞、粒细胞显著减少(P＜0.001),提示MKP1转基因小鼠骨髓干细胞的功能下降.结论 在MKP1转基因小鼠模型中,MKP1基因的过表达影响了小鼠的骨髓干细胞的功能.     

外源性p53基因转导对食管癌细胞株Eca109的生长抑制

本文首扶报道了逆转录病毒载体介导的外源性p53基因导入对食管癌细胞株Eca 109的生长抑制敢应。我们将野生型p53基因全长编码医克隆进逆转录病毒载休pDOR-Neo中，构建了重组病毒pDORp53．转染Eta 109细胞后，获得G418抗性细胞克隆Eca-p53。细胞生物学行为研究显示：生长曲线压低42%；GO／G1期细胞比侧显著增加；细胞增殖指数(PI)降低36.3%；软琼脂中集落形成能力受抑；对裸鼠的致瘤性丧失，结果证明，外源性野生型p53基因转导，对抑制食管癌细胞的恶性行为具有显著的生物学意义。     

腹腔镜与开腹手术治疗异位妊娠的临床分析

①目的 探讨腹腔镜手术治疗异位妊娠的临床价值。②方法 采用腹腔镜与开腹手术对各60例异位妊娠患者进行手术治疗。③结果 60例腹腔镜手术患者无一例中转开腹，两组手术时间差异无显著性。腹腔镜组术中出血，术后住院及恢复时间均短于开腹组，差异有显著性。④结论 腹腔镜手术创伤小、恢复快、术中出血少，住院时间短，比开腹手术更具优越性，值得推广使用。     

London/Swedish双突变APP转基因小鼠的鉴定

鉴定及评价APP双突变阿尔茨海默病的转基因小鼠模型。方法将London/Swedish双突变APP基因插入到PDGF启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695^V652I/K596N/M597L双突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定APP695双突变转基因小鼠的基因表型,RT-PCR和Western blotting检测APP突变基因表达,免疫组化检测APP695双突变转基因小鼠大脑病理改变。水迷宫检测APP695^V652I/K596N/M597L转基因小鼠的行为学改变。结果建立了2个品系的人APP695^V652I/K596N/M597L转基因小鼠。抗Aβ1-17免疫组织化学显示APP695双突变转基因小鼠海马区阳性细胞数较APP695^V652I单突变转基因小鼠,及野生小鼠阳性细胞数明显增多,胞膜着色明显加深。双突变转基因小鼠在5月龄时可检测到老年斑。行为学检测显示APP695^V652I/K596N/M597L双突变转基因小鼠学习记忆能力比APP695^V652I单突变转基因小鼠有明显下降。结论APP695^V652I/K596N/M597L转基因小鼠较APP695^V652I转基因小鼠更早出现老年斑及学习认知能力障碍。成功建立了人APP695^V652I/K596N/M597L转基因小鼠阿尔茨海默病模型,为研究阿尔茨海默病发病机制和药物研发提供了有价值的动物模型。     

兔抗五种鱼免疫球蛋白抗体的制备和HRP标记

目的制备兔抗鱼类免疫球蛋白抗体并进行辣根过氧化酶标记,为鱼类血清学检测系统的建立提供工具。方法利用proteinA亲和层析的方法纯化鱼血清免疫球蛋白,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗鱼免疫球蛋白的抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗鱼免疫球蛋白的抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting来考察标记抗体与其他常见鱼类血清蛋白间的交叉反应。结果纯化了鳙、鲤、乌鳢、黄鳝、鲈五种鱼血清免疫球蛋白,免疫双扩散法测定兔抗这五种鱼免疫球蛋白的抗血清效价均达到1∶32,并对纯化的兔抗鳙、鲤、乌鳢、黄鳝、鲈五种鱼类免疫球蛋白的抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1∶10000左右,Western blots显示标记抗体与部分其他鱼类免疫球蛋白之间存在不同程度的交叉反应。结论成功制备了HRP标记的兔抗鱼类免疫球蛋白抗体,为鱼类血清学检测体系的建立提供了工具。     

华细辛本草考证及其原产地的品种调查

华细辛是陕西省名贵药材之一,为中医常用药,有发表散寒、温肺祛痰之效。《神农本草经》列为上品,《本草纲目》列入草部山草类,以其“根细而味辛,故名曰细辛”。我国古代药用细辛以马兜铃科华细辛 Asarum SieboIdi Miq 为贵,但现时则认为辽细辛 Asarum heteropoidesF.Shin Var mandshuricum(Maxim)Kitag 为细辛中的最佳品,两者皆是药用正品。     

尚志县药用植物资源调查(续) 药材生产上的品种问题

尚志是黑龙江省出产药材较多的县份。几年来,由于当地党政的重视,野生药材产量逐年上升,品种也有所增加,如该县特产的名贵药材老山参、党参,黄、五味子、独活,细辛、平贝等,有力的支援了省内外用药需要。又如铃兰、缬草、福寿草等药用植物亦成为哈尔滨制药厂的重要原料源来。在南药北移、野生药材变家种家养方面,也取得了很大成绩,如从前感到缺少的“地黄”,去年亩产已超过2千斤。在地产药材的收购利用方面,     

五加本草考证及其原产地的品种调查

<正> 中药“五加皮”广泛应用已有悠久历史。汉代《神农本草经》就列为上品,此后历代诸家本草均有记载。近年来,国内外对五加属植物刺五加(Acanthopanax senticosus)进行全面系统的研究,认为它是一种可与人参媲美的珍贵药材,并进一步证实了我国古代本草关于五加“补中益精,坚筋骨,强志意”的论述是正确的。我省自然条件得天独厚,广大山区分布着丰富的五加资源。充分研究、开发、利用它,对扩大药源有着十分重要意义。