斑茅δ-OAT基因克隆及其序列分析

利用RT-PCR和RACE技术从斑茅（Erianthus arundinaceus）中分离出编码鸟氨酸-δ-氨基转氨酶基因的全长cDNA序列,序列全长1 680 bp,编码454个氨基酸。通过对哺乳动物、高等植物、微生物的δ-OAT基因编码的氨基酸序列进行同源比对,发现斑茅δ-OAT基因同其近缘属植物甘蔗的同源性最高（87%）,同其他高等植物的同源性次之（约为70%）,而同动物的同源性最低（约为60%）。在斑茅δ-OAT基因编码的氨基酸序列的5′端未发现线粒体定位序列,同甘蔗δ-OAT基因一样。斑茅δ-OAT基因具有完整的鸟氨酸转氨酶功能区rocD。利用定量RCR（real-time PCR）对30%PEG胁迫下的斑茅δ-OAT基因表达量进行研究,结果表明δ-OAT基因在胁迫12 h表达量达到最高,约为对照的4.1倍;胁迫2 h δ-OAT基因表达量反而有所降低。     

中国斑茅种质资源分子多态性分析

采用ISSR分子标记技术,对采自我国8省区的30个斑茅[Erianthus arundinaceus (Retz.) Jesw.]无性系的分子多态性进行了分析, 共扩增出87条多态带, 平均每个引物扩增的多态带数为 5.1条, 多态性条带比率(PPB)为 64.89%,多态信息量(PIC)为0.58,说明我国斑茅具有较丰富的遗传多样性.根据研究结果进行聚类和主成分分析,可将30个斑茅无性系归为4大类,同一地区的斑茅无性系基本聚在同一类,呈现出一定的地域性分布规律.     

多胺对渗透胁迫下甘蔗愈伤组织诱导和分化的作用

0．4mmol／L的多胺（精胺、亚精胺和腐胺）处理渗透胁迫下的甘蔗心叶或愈伤组织后,愈伤组织的诱导和绿苗的分化受到促进,苗重增加;SOD和过氧化氢酶活性增强,谷胱苷肽含量增多,MDA含量下降。精胺、亚精胺的效果优于腐胺。     

绿色荧光蛋白及其在GMOs 生态监测中的应用

绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein, GFP)是在海洋无脊椎动物水母(Aequorea victoria)中获得的一种由238个氨基酸组成的多肽。该多肽通过翻译后加工形成生色基团, 产生稳定的荧光, 而且这种荧光很容易被检测。GFP作为动、植物以及微生物基因工程研究上的一种广泛的选择标记, 具有检测灵敏度高、操作简便、不需要添加任何底物或辅助因子等优点, 更重要的是利用GFP可对GMOs进行快速、原位、实时、活体监测。本文概括介绍了GFP的特性、改造及其检测, 并从生态学角度论述了GFP在GMOs生态监测研究中的应用及其发展前景。     

斑茅两个看家基因片段的克隆及其在基因芯片中的应用

根据已发表的同源基因序列,利用RT-PCR技术分离了斑茅(Erianthus arundinaceus)的GAPDH和APRT两个看家基因片段,用它们作为cDNA芯片阳性参照,以未经聚乙二醇(PEG)胁迫处理的斑茅叶片为对照,和PEG胁迫的4组材料同cDNA芯片进行杂交分析。杂交结果显示,GAPDH杂交的Cy5与Cy3平均信噪比(Signal/Noise,S/N)分别为56.12和60.8,APRT杂交的Cy5与Cy3平均信噪比分别为51.06和47.25,信噪比均很高;同时两个看家基因的杂交都显示出极强的信号,其中GAPDH的杂交信号值大于10000,APRT也在8000以上,杂交结果可靠。分析了PEG胁迫4个时段BADH与两个看家基因的表达,BADH的表达有明显变化,而看家基因表达均较稳定。上述结果表明所克隆的两个看家基因在斑茅中表达量高,且PEG胁迫下表达较为稳定,是基因芯片理想的阳性参照。     

绿色荧光蛋白及其在GMOs生态监测中的应用

绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）是在海洋无脊椎动物水母（Aequorea victoria）中获得的一种由238个氨基酸组成的多肽。该多肽通过翻译后加工形成生色基团,产生稳定的荧光,而且这种荧光很容易被检测。GFP作为动、植物以及微生物基因工程研究上的一种广泛的选择标记,具有检测灵敏度高、操作简便、不需要添加任何底物或辅助因子等优点,更重要的是利用GFP可对GMOs进行快速、原位、实时、活体监测。本文概括介绍了GFP的特性、改造及其检测,并从生态学角度论述了GFP在GMOs生态监测研究中的应用及其发展前景。     

动脉硬化早期检测187例临床分析

慢性动脉硬化闭塞症(ASO)是外周血管疾病之一.我们应用科林BP-203RPEII(VP-2000/1000)全自动动脉硬化检测仅,进行踝肱脉搏波传导速度(baPWV)和踝臂指数(ABI)检测187例,现报告如下.     

不同地理种源杉木的分子多态性分析

利用ISSR分子标记技术和筛选出的22条ISSR引物,对24个不同地理种源杉木的DNA进行扩增,共扩增出188条谱带,其中多态条带173条,占总数的92.0%.经计算,平均位点的有效等位基因是13408,Nei's基因多样性指数是0.2154,Shannon多态性信息指数为0.3458,表明不同杉木种源间具有较高的遗传多样性.通过UPGMA法聚类分析,可把24个种源杉木分为五个类群:中带东区生态型、中带东南区生态型、中带中区生态型、南带生态型和北带生态型,表明杉木地理种源遗传距离聚类呈现出一定的地域性分布规律.     

多荧光标记引物增强甘蔗染色体寡聚核苷酸探针杂交信号

荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization, FISH）是植物分子细胞遗传学研究最为重要的手段之一。近些年，基于参考基因组设计的低拷贝寡聚核苷酸探针在FISH中应用得越来越广泛。然而，由于植物基因组中分布大量的重复序列，这使得oligo-FISH的分辨率存在一定局限性。利用包含多个荧光基团的荧光PCR引物，扩增出甘蔗染色体特异oligo探针，并进一步优化甘蔗的荧光原位杂交体系，提高了甘蔗oligo探针识别近缘物种染色体的效率。通过开发多荧光标记的甘蔗oligo探针以及甘蔗荧光杂交体系的优化，有效拓宽荧光信号的最小分辨率，提高信噪比（signal-to-noise ratio, SNR），并成功基于甘蔗oligo探针对高粱1-10号染色体分型。多荧光标记引物增强oligo探针信号的新方法及FISH体系的优化为今后在其他物种中提高oligo-FISH鉴定染色体及捕捉微弱的荧光信号提供了参考。