2种拟青霉代谢产物对烟蚜乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的影响

 以粉拟青霉菌的sw03032菌株和玫烟色拟青霉菌的sw03085为研究对象,比较其代谢产物的杀蚜虫活性和对烟蚜乙酰胆碱脂酶和羧酸酯酶活性的影响.结果表明2种真菌发酵液含有能毒杀蚜虫的毒素物质.且毒素粗提物浓度越大,杀蚜活性越强.经玫烟色拟青霉菌不同浓度毒素粗提液处理的蚜虫乙酰胆碱酯酶比活力分别比对照(CK2)降低了70.4%～29.8%.不同浓度玫烟色拟青霉菌毒素粗提液处理12h后,蚜虫羧酸酯酶比活力分别比对照(CK2)降低79.5%～44.4%.用不同浓度粉拟青霉菌毒素粗提液处理烟蚜12h后,乙酰胆碱酯酶和酸酸酯酶活性分别降低了38%～18.6%和51.6%～59.5%.玫烟色拟青霉菌的sw03085菌株代谢产物对烟蚜的伤害活性明显较粉拟青霉菌sw03032菌株代谢产物高.     

牡蛎共生细菌的分离、鉴定及次级代谢产物生物活性研究

对日照海域野生牡蛎共生细菌进行分离鉴定,研究其次级代谢产物的生物活性.采用常规平板分离方法对牡蛎共生细菌进行分离、培养并进行分子生物学鉴定;采用改良Ellman法和DPPH自由基清除法对共生菌的次级代谢产物进行抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)和抗氧化活性筛选.结果表明,从日照海域野生牡蛎中共分离得到62株共生细菌,其中,4株属于孤菌属,6株属于芽孢杆菌属,4株为鲁杰式菌属,3株为黄杆菌属,3株为交替单胞菌属,1株为嗜热脂肪芽孢杆菌属,其余均为交替假单胞菌属。共生细菌中对AChE具有较强抑制活性的有13株,尤其是菌株HYML-1-11和HYML-1-62,抑制AChE的IC_(50)值分别为5.01和4.53μg·mL~(-1);具有一定抗氧化活性的有22株,其中HYML-1-6、HYML-1-11、HYML-1-18、HYML-1-24、HYML-1-39、HYML-1-47和HYML-1-62号菌株的次级代谢产物(5μg·mL~(-1))对DPPH自由基的清除率均达40%以上.     

乙酰胆碱酯酶阳性神经在大鼠小肠壁丛内分布的研究——酶组织化学法

大鼠小肠壁切片和撕片标本,用酶组织化学法观察小肠壁层和肠肌丛内乙酰胆碱酯酶(AchE)阳性神经的分布。结果发现:(1)小肠壁各层和肠肌丛内神经纤维十分丰富,神经纤维的分布密度从十二指肠向空肠到回肠有逐渐增高趋势。(2)肠肌丛中有大量酶阳性神经元胞体,密布于节(丛)和节间束内,有些细胞突起在丛内和节间交织成网,有的突起末端膨大呈终扣样与邻近的细胞体呈突触样接触,小肠各段肠肌丛的节细胞酶活性和分布密度有明显差别:回肠>空肠>十二指肠,分别为37.1％,33.5％,28.7％。     

硝酸铈对大白鼠体内乙酰胆碱酯酶活性的影响

ＳＤ成年大鼠一次性腹腔注射１５０ｍｇ／ｋｇ的硝酸铈,分别于３,６,１２,２４,４８ｈ后处死,测定其脑、肌肉组织的乙酰胆碱酯酶的活性．结果表明：脑、肌肉受硝酸铈影响有相似的规律．在注射初期,酶活性显著降低,经过一段时间后,又逐渐恢复．     

人胎肺细胞培养液中类血小板生成素的初步研究

人正常胎肺细胞用含１０％小牛血清的ＭＥＭ培养液原代培养,后用无血清的１９９培养液继续培养．硝酸纤维膜的斑点酶联免疫印迹法测定显示所收集的无血清培养液中含有能与人重组血小板生成素单抗结合的蛋白质．免疫细胞化学检测发现培养的肺细胞与血小板生成素单抗有明显阳性反应．用小鼠骨髓乙酰胆碱酯酶阳性细胞法测定肺细胞在不同培养时间所收集的培养液促血小板生成活性的大小,结果显示收集的培养液有明显刺激活性并且其活性与肺细胞的密度有相关性．     

"补肾活血"对老年鼠脑乙酰胆碱代谢的影响

为研究“补肾活血”对老年鼠脑乙酰胆碱(Ach)代谢的影响,将老年大鼠分别用补肾益精、行气活血、补肾活血方剂灌胃30d,采用高效液相色谱技术检测大鼠脑内Ach摩尔质量浓度、分光光度法检测胆碱乙酰转移酶(ChAT)和胆碱酯酶(AChE)的活性．研究发现老年大鼠脑内Ach摩尔质量浓度、ChAT活性显著低于青年鼠,AChE活性显著高于青年鼠;补肾益精、行气活血、补肾活血均可改善老年鼠脑内Ach代谢,补肾活血法明显优于补肾益精法、行气活血法．     

OA诱导大鼠基底核Ach降低及τ蛋白过度磷酸化

研究了磷酸酯酶(proteinphosphatase,PP)对胆碱能神经元功能的影响,将PP抑制剂岗田酸(okadaic acid,OA)注入大鼠双侧Meynert基底核,并经免疫印迹检测r(tau)蛋白磷酸化程度、经微渗透结合HL,PC检测Ach、经Morris水迷宫检测大鼠的空间记忆能力,结果发现,Meynert基底核注射OA后,Ach水平降低,τ蛋白在Sei-198／Sei-199／Set-202,Ser-396／Ser-404位点发生过度磷酸化,并伴有大鼠空间记忆障碍,本研究结果提示PP活性降低可能参与了神经元纤维缠结形成、胆碱能神经元功能及认知功能障碍,在AD发病机制中起重要作用。     

高铁酸钾降解农药敌敌畏及其残留检测方法

利用农药残留快速检测法——乙酰胆碱酯酶抑制法进行测定,研究了高铁酸钾对敌敌畏农药的消毒效果。研究发现CO₂是乙酰胆碱酯酶法测定高铁酸钾对敌敌畏农药消毒效果的理想中和剂。在3min吸光度变化值(ΔA)与敌敌畏质量浓度(ρ)之间存在关系式：ΔA＝-0.1096lgρ+ 0.2227。在20～80mg/L敌敌畏水溶液中加入800mg/L K₂FeO₄处理15min可使敌敌畏质量浓度降低到0.05mg/L以下。     

乙酰胆碱酯酶电极反应机理

在研究酶电极基础上探讨了电极上的反应机理。以乙酰胆碱酯酶催化活性为基础的抑制型酶电极的电极反应是:1)催化底物水解;2)底物中的I-被氧化为I2;3)底物氯化硫代乙酰胆碱分解产生的硫代胆碱含有的-SH基在银基汞膜电极上与汞生成硫醇汞盐。硫代胆碱在玻碳电极表面的氧化,为具有吸附性的不可逆过程,电极反应的电子转移数n=2,反应速率常数k=0.29s-1。     

血清对大鼠角膜感觉神经损伤修复的影响

目的:探讨血清对大鼠角膜感觉神经损伤修复的影响.方法:SD大鼠40只随机分为两组:实验组和对照组,每组各20只.选取大鼠右眼制作大鼠角膜神经损伤模型,实验组和对照组于损伤后分别用大鼠血清和生理盐水点眼,每日3次.分别于造模后2d、4d、7d、9d、11d、14d、28d采用自制角膜知觉测定计测量麻醉后大鼠双眼的角膜知觉,分别于造模后7d、14d、28d采用ELISA法检测大鼠角膜乙酰胆碱含量.结果:对照组2天、4天、7天的作用力均明显高于实验组,说明血清有促进角膜神经损伤修复的作用,但组间差异只有第7天的具有统计学意义(t=-2.459,P=0.028).实验组大鼠角膜知觉差不多在受伤后7天就基本恢复,对照组差不多在9～14天才恢复.对照组7天、14天的角膜乙酰胆碱含量低于实验组,但组间差异只有第7天的具有统计学意义(t=2.684,P=0.028).结论:血清可促进大鼠角膜感觉神经损伤修复.