5-氮-2''-脱氧胞苷和三氧化二砷对HL60白血病细胞的影响

目的：研究5－氮－2'－脱氧胞苷和三氧化二砷联合作用于HL60白血病细胞。方法：培养粒系白血病细胞，与5－氮－2'－脱氧胞苷、三氧化二砷一起培养后用生长曲线、表面分人抗原、细胞周期二倍体峰及过氧化物酶等指标来测定其抗肿瘤作用。结果：5－氮－2'－脱氧胞苷和三氧化二砷均有抑制生长曲线，诱导分化作用，两者合用后作用比单用强。结论：三氧化二砷可增强5－氮－2'－脱氧胞苷的抗肿瘤作用。     

Synergistic Effects of Highly Unsaturated Fatty Acid-containing Phosphatidyl-ethanolamine on Differentiation of Human Leukemia HL-60 Cells by Dibutyryl Cyclic Adenosine Monophosphate

Highly unsaturated fatty acid-containing phospholipid (HUFA-PL) has many nutritional and medical applications. We investigated the effect of HUFA-PL on differentiation of human leukemia HL-60 cells induced by dibutyryl cyclic adenosine monophosphate (dbcAMP). HUFA-containing phosphatidylethanolamine (HUFA-PE), such as salmon testis PE, significantly enhanced dbcAMP -induced cell differentiation. A combined treatment of 200 μM dbcAMP with 50 μ M HUFA-PE increased the nitroblue tetrazolium (NBT)-reducing activity, which is an indicator of differentiation, to a level comparable to that in the case of 500 μ M dbcAMP treatment. In contrast, HUFA-lyso PE (a monoacyl form) did not exert an enhancing effect on dbcAMP-induced differentiation. The enhancing effect of HUFA-PE was suppressed by a protein kinase C inhibitor, staurosporine, while a protein kinase A inhibitor, H-8, did not suppress the enhancing effect. These findings suggest that HUFA-PE might enhance dbcAMP-induced differentiation through modulation of the protein kinase C signaling pathway in HL-60 cells.     

Food safety evaluation of broccoli and radish sprouts.

Three cultivars of broccoli seeds (Brassica oleracea var. italica), cv. Tiburon, cv. Belstar and cv. Lucky, and two cultivars of radish seeds (Raphanus sativus), cv. Rebel and cv. Bolide, were germinated for three and five days and safety aspects such as microbiological counts and biogenic amines were investigated. Cytotoxicity evaluation was also carried out. Broccoli and radish sprouts contained numbers of mesophilic, psychrotrophic, total and faecal coliform bacteria which are the usual counts for minimally processed germinated seeds. Putrescine, cadaverine, histamine, tyramine, spermidine and spermine increased during sprout production although these levels were below those permitted by legislation (5 mg/100 g of edible food). Broccoli and radish sprouts demonstrated no toxic effects on proliferation and viability of HL-60 cells and should be included in our diets as healthy and safe fresh foods.     

基于SOA与HL7的医院信息系统的研究与实践

首先介绍了当前医院信息系统所面临的问题和挑战，并给出了解决方案——SOA。采用SOA的方法学，结合行业标准HL7，对医疗领域进行分析。最后根据实践经验，提出了两种实现SOA技术手段。     

检测白血病细胞增殖力的MTS/pms比色分析法的建立

为了探讨建立一种更为快速、安全、灵敏的白血病细胞增殖力的检测方法，本研究应用HL—60和K562细胞可转化MTS／pms形成水溶性待测产物，其光密度值在492nm波长下半自动测定的特点，研究了MTS／pms比色分析法取代MTT和INT用于白血病细胞增殖力的检测。结果表明，只有活的白血病细胞才能转化MTS／pms形成待测产物，且白血病细胞数与所测光密度值(OD)之间具有良好的相关性(γ＝0．963)；与MTT和INT法相比较，MTS／pms比色分析法中所形成的最终待测产物为水溶性，省略了上清波去除和加入有机溶剂的步骤。结论：MTS／pms比色分析法对白血病细胞增殖力的检测更具有快速、安全、准确、灵敏的优点。     

冻存复苏条件对髓性白血病细胞株生物学特性的影响

目的:采用不同方法对白血病HL60细胞株进行冻存和复苏,观察生物学特性改变,筛选最佳冻存复苏方案。方法:实验于2006-04/06在吉林医药学院临床检验实验室(国家三级标准)进行。①HL60细胞株由中国科学院上海生物细胞研究所提供。将欲冷冻保存的HL60细胞调整到良好的生长状态(对数生长期),随机数字表法分成4组,离心收集后在含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640培养基中分别加入二甲基亚砜,使其终浓度依次为50,100,150,200g/L。冻存15d后,每组取1支冻存管复苏并接种于细胞培养板,培养12h后用锥虫蓝拒染法计算细胞复苏率。②选择冻存条件和冻存细胞密度相同的两支冻存管,按不同方法进行HL60细胞复苏。37℃水浴传统复苏法:立即将冻存管置于37℃水浴中,待融化后800r/min离心5min,吸去上清液,加入含体积分数为0.1小牛血清的RPMI-1640培养基,混匀后接种于细胞培养板,1mL/孔,9孔/组,置于体积分数为0.05的CO2培养箱37℃继续培养。40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法:将冻存细胞于40℃水浴中迅速溶解,转入37℃水浴箱,融化后离心、加培养基等操作同传统复苏法。复苏细胞培养12h后采用锥虫蓝染色计算细胞存活率。③用无血清RPMI-1640培养基制备HL60细胞悬液,按3×107L-1密度接种于细胞培养板中,1mL/孔,然后分别加入体积分数为0.05,0.1,0.12,0.15,0.2的灭活小牛血清,每种血清浓度设置8个试验孔,并分别于培养12,24,36,48,60,72,84,96h后计数每孔细胞数量,并绘制细胞生长曲线。结果:①不同浓度二甲基亚砜冻存后HL60细胞复苏率的比较:二甲基亚砜200g/L组的细胞复苏率明显低于二甲基亚砜50,100,150g/L组[(64.6±2.8)%,(87.0±1.4)%,(86.4±2.1)%,(85.7±2.8)%;t=25.44,P<0.01],二甲基亚砜50,100,150g/L组间差异无显著性意义(t=0.82～1.44,P>0.05)。②不同复苏方法HL60细胞存活率的比较:与37℃水浴传统复苏法比较,40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法的细胞存活率显著升高[(69.5±1.5)%,(87.4±1.8)%,t=23.24,P<0.01]。③RPMI-1640培养基不同血清含量对HL60细胞生长情况的影响:在体积分数为0.05的血清含量培养基中,HL60细胞基本不生长,且有逐渐死亡的趋势;在体积分数为0.1的血清含量培养基中,HL60细胞生长趋势明显,但生长速度相对较慢;在体积分数为0.12,0.15,0.2的血清含量培养基中,HL60细胞生长迅速,3种血清浓度间细胞生长趋势无明显差异。结论:以50g/L二甲基亚砜作为HL60细胞冻存保护剂、联合40℃溶解后再37℃恒温改良复苏法可使细胞保持最佳生物学特性,体积分数为0.12的血清含量为HL60细胞常规培养的最适浓度。     

粒—巨噬细胞集落刺激因子对Vp16诱导白血病细胞凋亡的调控作用

目的：探讨粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｖｐ１６诱导白血病细胞凋亡的调控作用，指导白血病临床治疗中正确使用ＧＭ－ＣＳＦ。方法：在构建高效表达ＧＭ－ＣＳＦ的逆转录载体Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ＧＭ－ＣＳＦ表达系统的基础上，对转ＧＭ－ＣＳＦ基因和未转ＧＭ－ＣＳＦ基因的白血病ＨＬ－６０细胞进行研究。结果：未转ＧＭ－ＣＳＦ基因及转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞经Ｖｐ１６处理后均出现凋亡的特征性表现：ＤＮＡ电泳呈梯状；流式细胞仪ＤＮＡ直方图上呈现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰；透射电镜观察细胞形态可见凋亡的特征性改变。结论：Ｖｐ１６具有诱导白血病细胞发生凋亡的作用，而ＧＭ－ＣＳＦ能够抑制Ｖｐ１６诱导的细胞凋亡。以上结果表明，白血病临床治疗中为预防和改善化疗所致骨髓抑制而应用ＧＭ－ＣＳＦ时，应谨慎地选择时机，在化疗前和化疗期间不宜使用，以避免白血病细胞对抗癌药物诱导的凋亡产生抵抗而导致耐药。     

新型乏氧显像剂99Tcm-HL91在缺血性 脑血管病中的试验研究

目的：探讨新型乏氧显像剂^99Tc^m-HL91在缺血性脑血管病中的临床应用价值。方法：对18例临床确诊为缺血性脑血管病患者进行脑乏氧断层显像，其中临床诊断脑梗死11例，短暂性脑缺血发作（TIA）5例，椎-基底动脉供血不足2例，取标记好的^99Tc^m-HL91 555-1110MBq静脉推注，20-30min内行脑乏氧断层显像，17例患者同时进行了CT或MRI检查，11例患者次日行^99Tc^m-ECD脑灌注断层显像，三种方法进行了对比研究。结果：18例患者中脑乏氧显像阳性者5例，分别为脑梗死4例，椎-基底动脉供血不足1例。11例同时行^99Tc^m-ECD脑血流灌注显像者中6例表现为局部脑血流灌注减低，CT或MRI检查异常者9例。结论：^99Tc^m-HL91脑乏氧显像诊断缺血性脑血管病的影响因素较多，但对脑血流灌注显像出现低灌注区时可以区分组织乏氧或坏死，对指导治疗有一定临床意义。     

99Tcm-HL91乏氧显像预测非小细胞肺癌放疗敏感性的临床价值

目的 对非小细胞肺癌患者放疗前行99Tcm-HL91显像,与放疗疗效进行比较,探讨99Tcm-HL91显像在预测放疗敏感性方面的应用价值.方法 对35例经CT引导下穿刺或支气管镜检查病理确诊的非小细胞肺癌患者,放疗前一周内静脉注射99Tcm-HL91 740 MBq(20 mCi),4 h后进行99Tcm-HL91平面及断层显像.半定量分析利用感兴趣区(ROI)技术,勾画圆形感兴趣区,计算肿瘤与对侧正常肺组织(T/N)的放射性比值.随访患者放疗疗效,完全缓解(CR)和部分缓解(PR)为治疗有效组,无变化(NC)和增大(PD)为无效组.结果 99Tcm-HL91平面显像35例非小细胞肺癌患者中的30例显像阳性;断层显像33例显像阳性.半定量分析断层像4 h的T/N比值显著高于平面像的T/N比值.放疗后完全缓解(CR)5例,部分缓解(PR)14例,无变化(NC)7例,增大(PD)4例,死亡或失访共5例,放疗有效组(CR+PR)与放疗无效组(NC+PD)断层显像的T/N比值分别为1.747±0.301,2.087±0.478,差异具有显著性(t=2.363,P=0.026).结论 放疗前99Tcm-HL91肺显像可预测非小细胞肺癌的放疗敏感性.     

VEGF及其受体在恶性血液细胞系HL-60及Raji的表达

为了探讨血管内皮生长因子(VEGF)在恶性血液病中的作用，以恶性血液细胞系HL-60和Raji为实验对象，应用RT-PCR及ELISA法检测肿瘤细胞。VEGF基因的表达，并采用免疫组织化学染色法测定细胞表面VEGF受体Fit-1的表达。结果显示：髓性白血病细胞系HL-60和淋巴瘤细胞系Raji中均存在VEGF—mRNA的表迭。在培养48小时后，HL-60细胞和Raji细胞的培养上清液中VEGF含量明显高于正常人外周血单个核细胞。VEGE-R(Flt-1)在两种肿瘤细胞的胞膜上均有表达，而正常人外周血单个核细胞上无表迭。这一结果表明，白血病和淋巴瘤细胞具有产生VEGF的能力，并可将VEGF分泌到细胞外基质微环境中。VEGF可作用于白血病和淋巴瘤细胞本身，在恶性血液肿瘤细胞中存有VEGF的自分泌途径，而VEGF的自分泌成为血液肿瘤细胞高侵袭性生物学特性的基础。结论：抑制VEGF的分泌将有助于阻断其与内皮细胞间的互动环，降低其增殖、抗凋亡和侵袭性能．对提高肿瘤细胞对化疗的敏感性也将十分有意义。