点青霉MH1发酵热稳定性外切菊粉酶的培养基优化及酶学性质研究

为了分离出热稳定性胞外菊粉酶产生菌,并使菊粉酶的生产、产酶最大化以及分析其酶学性质,进行了本实验。实验结果表明:1株产外切β-D-果糖转化酶的点青霉从菊芋生长的环境中被分离,并经过诱变命名为点青霉(Penicilliumnotatum)MH1。采用半部分因子设计和中心组合设计对影响菊粉酶生产的培养基组成中主要因子进行了优化,得到一最优培养基组成(g/L):菊芋粉24,牛肉膏5,酵母膏1,豆饼粉1,KH2PO43,MgSO4·7H2O0.2,初始pH3.5。优化试验结果显示:在34℃、200r/min摇床转速下培养48h,采用优化的培养基发酵生产得到的最大菊粉酶活力为32.46U/mL。对酶的部分性质进行了研究,其最适pH为4.2,酶在pH3～7具有反应活性,最适作用温度为55℃。粗酶液经过硫酸铵分级盐析,其适宜的盐析饱和度为20%～58%,盐析后酶液通过DEAE-纤维素DE52和SephadexG-100柱层析,纯化后得到的酶采用SDS-PAGE检测分析,结果显示该酶的分子质量为(108±1)KDa。     

外切内注辅助改良 PPH 术治疗环状混合痔的临床研究

目的：探讨外切内注辅助改良 PPH 术治疗环状混合痔的近期疗效。方法将符合环状混合痔纳入标准的142例患者按不同术式分为2组,治疗组（70例）采用外切内注辅助改良 PPH 术,对照组（72例）采用内扎内注外切术。观察2组病例术后24 h 疼痛程度、出血情况,术后第3天肛缘水肿、肛门坠胀、肛门狭窄和尿潴留等并发症发生情况。记录术后住院时间、恢复正常生活或工作时间。结果2组患者术后24 h 疼痛评分、出血情况、术后3 d肛门水肿、肛门坠胀及术后住院时间和恢复正常工作或生活时间差异有统计学意义（P ＜0．01）,术后尿潴留发生率差异无统计学意义（P ＞0．05）。2组患者治愈率均为100％,术后近期均未发生肛门失禁、肛门狭窄及直肠阴道漏等严重并发症,远期疗效有待观察。结论外切内注辅助改良 PPH 在治疗环状混合痔疼痛程度轻,术后并发症少,恢复快,近期疗效优势明显。     

板柱节点拟静力试验及板栓钉群外受冲切承载力计算方法

针对板柱结构中采用栓钉抗剪问题,进行了两个钢筋混凝土板柱节点发生栓钉群外破坏的拟静力试验。提出了板栓钉群外圆角冲切破坏轮廓线;并根据现有的试验结果,采用《混凝土结构设计规范》(GB50010—2010)的非预应力混凝土板受冲切承载力计算公式的形式,引入冲跨系数,提出了非预应力混凝土板栓钉群外受冲切承载力计算公式。利用该公式计算得到受冲切承载力与发生冲切破坏板柱节点的试验结果吻合较好。     

金属离子对纤维素酶内切酶和外切酶活性的影响

金属离子可以影响纤维素内、外切酶的活性,且不同金属离子对其活性影响程度也不同。据此,本实验选取三种纤维素酶进行单因素实验,对其内、外切酶活性进行研究。实验结果表明,当金属离子的质量浓度为:K+0.9 mg/mL,Ca2+0.3 mg/mL,Zn2+1.2 mg/mL,Cu2+1.2 mg/mL,能较好地提高纤维素内切酶活;而Mg2+﹑Ca2+﹑Ba2+﹑Cu2+﹑Zn2对纤维素外切酶活都有抑制作用;Al3+对纤维素内、外切酶活都有抑制作用;不同价态阴离子对纤维素内、外切酶活影响不大。     

外切-β-葡聚糖酶基因重组里氏木霉的筛选及其产酶性能

外切-b-葡聚糖酶是纤维素酶的重要组分之一,提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成本的关键。分别采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法,对已有的基因重组转化子进行筛选试验,获得了6个优良转化子,其滤纸崩解速率和微晶纤维素琼脂平板上的生长速率都较大。进一步在摇瓶条件下进行复筛试验,获得了外切-β-葡聚糖酶（C₁）高产转化子Trichoderma reesei ZU-101,液体培养48 h,其C₁酶活力可达18.24 U·ml^-1,是出发菌株的2.16倍;分析结果表明：重组转化子的纤维素酶体系中内切-b-葡聚糖酶和纤维二糖酶的活力与出发菌株相比变化不大,但由于外切-b-葡聚糖酶活力得到了大幅度提高,纤维素酶的总活力（滤纸酶活力FPA）也提高了61.9%。采用纤维素酶对碱预处理玉米秸秆进行酶解试验,当酶用量为20 FPIU·（g底物）^-1,水解48 h,重组转化子T.reesei ZU-101纤维素酶的酶解得率高达94.4%。本文的研究结果在可再生纤维素资源的生物转化与利用方面具有广阔的应用前景。     

影像测量技术在过度包装商品检测中的运用

传统的过度包装商品检测工作主要是依靠人工操作,整个过程费时费力,工作效率低且极易出错。本文设计了一种基于影像测量技术的过度包装商品检测系统。通过CCD相机采集物体投影图像,利用计算机自动计算出物体外切长方体体积。最后根据容积率和空隙率,判断检测商品包装是否过度。     

不同蛋白酶对脱脂豆粉酶解条件的研究

以水解蛋白得率和蛋白质水解度为评价指标,研究了内切蛋白酶和外切蛋白酶酶解脱脂豆粉的适宜条件.结果表明:内切蛋白酶最适酶解条件为pH7.5,温度60℃,酶解时间6h,酶用量1.5%,水与脱脂可粉的比为7:1;外切蛋白酶最适酶解条件为pH5.5,温度55℃,酶解时间9h,酶用量1.5%,水与脱脂豆粉的比为7:1.在最适酶解条件下,内切蛋白酶酶解脱脂豆粉的水解蛋白得率达到50.6%,外切蛋白酶酶解脱脂豆粉的蛋白水解度为26.7%.     

制麦和糖化过程中不同β-葡聚糖水解酶的相关性

原料大麦中大量存在β-葡萄糖苷酶和少许的内切-β1-4-葡聚糖酶。这两种酶及内切一β1-3,1-4-葡聚糖酶、内切-β1-3-葡聚糖酶和外切-β1-3-葡聚糖酶在浸麦和发芽过程q-活力均会增加。外切-β1-3-葡聚糖酶由于在发芽阶段才产生,可以与其他酶区分开,它不会造成基质溶解,可能为麦芽中的一种限制性酶。麦芽中有三种外切-葡聚糖酶且都可以降解β1-3糖苷键。内切β-1-3,1-4-葡聚糖酶的降解产物为非还原性末端（从这个末端外切酶接触到底物基质）有B1-4糖苷键的寡糖,这可能也是为什么麦汁中有大量寡糖存在的另一个原因（首先是降解酶产生得较晚）。第三个影响因素可能是外切葡聚糖酶对诸如钾、钠、镁等金属离子较敏感。     

酶法制备壳低聚糖对细菌的抑制作用

研究了由壳聚糖内切酶、外切酶和混合酶降解制备的5种不同相对分子质量壳低聚糖在不同浓度下对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性.结果表明,相对分子质量2 100的壳低聚糖对大肠杆菌抑制作用最明显.相对分子质量9 000的壳低聚糖对枯草芽孢杆菌抑菌效果最好.壳低聚糖对枯草芽孢杆菌抗菌作用随相对分子质量减小而逐渐减弱.壳低聚糖对两种菌的抑菌效果均随浓度的增加而增强.