Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基

目的采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基。方法在自主研发的含蛋白无血清培养基的基础上,通过Plackett-Burman试验和响应面试验设计考察23组营养物质对MDCK细胞生长的影响,以细胞比生长速率、维持时间及最大活细胞密度作为响应值进行筛选和定量优化。以最优化的因子浓度配制化学成分明确的无血清无蛋白培养基,分别于细胞培养板和搅拌瓶中培养MDCK细胞,考察细胞比生长速率、维持时间和最大活细胞密度3个响应值的大小。结果通过Plackett-Burman试验筛选出4种对MDCK细胞生长具有显著性促进作用的因子:半胱氨酸、苏氨酸、亮氨酸和葡萄糖,苏氨酸和亮氨酸有助于提高细胞比生长速率,半胱氨酸和葡萄糖有利于提高最大活细胞密度;该化学成分明确的无血清无蛋白培养基能很好地支持MDCK细胞悬浮生长,单细胞悬浮培养MDCK细胞时,细胞比生长速率可达0.058/h,最大活细胞密度可达32.65×105个/ml,分别比基础培养基提高了2.15和3.09倍。结论采用Plackett-Burman与响应面法相结合优化了化学成分明确的MDCK细胞无血清无蛋白培养基,为采用MDCK细胞大规模工业化生产流感疫苗奠定了基础。     

遗传算法与神经网络耦联法优化生淀粉酶发酵培养基

用遗传算法与社会网络耦联的方法，对生淀粉糖化酶发酵培养基进行了优化，实验结果表明，采用上述方法优化后的培养基能使生淀粉糖化酶的活力得到较大的提高。     

苏云金杆菌发酵培养基研究进展

苏云金杆菌前世界上用途最广、产量最大的微生物杀虫剂,本文综述了苏云金杆菌发酵研究所用的培养基的类型,包括传统发酵原料、城市污泥、工业废液、蓝藻、废弃物等及其特点,为企业选择适合的原料和工艺提供了借鉴作用,并对苏云金杆菌发酵培养基的研究进行了展望。     

影响谷氨酸发酵种子质量的主要因素有哪些？

谷氨酸发酵过程中影响种子质量的主要因素有：（1）培养基构成种子培养基要求含有丰富的氮源，足够的生物素，少量的碳源，以利菌体生长，如果糖份过多，菌体代谢活动旺盛，产生有机酸，使pH值降低，菌种容易衰老。     

培养基内溶解氧的高低取决于哪些因素？

培养基内溶解氧的高低取决于通风量、搅拌转速、发酵罐的径高比、液层高度、搅拌型式、搅拌叶直径大小，以及培养液浓度、培养温度、罐压等。     

让微检最大限度的反映生产实际

虽然微生物检验方法在相关标准中都有具体规定，但根据我们多年的微检经验，有很多细节影响到最终结果，涉及到取样、样品处理、培养基选择等多个环节。正确的把握这些影响因素，才能做到最大限度的反映生产实际。     

平菇原生质体释放过程的电镜扫描研究

本文用电子显微镜扫描的方法,对平菇菌丝释放原生质体的过程进行了探讨,摸索出了一套从玻璃纸培养的菌丝获取原生质体,并进行电镜扫描的理想研究方法,进一步证实了原生质体顶端释放,侧面释放和断裂释放的三种释放方式,并对原生质体的形状,表面结构进行了详细的描述.在电镜下,原生质体呈倒卵形,光滑圆球形或表面有齿状或皱褶突起的圆球形.     

主要环境因子对两株松树外生菌根真菌生长的影响

研究了培养基、pH、温度及水势对松林下常见外生菌根真菌牛肝菌(Boletus sp.)和乳菇(Lactariussp.)生长的影响。结果表明,在所选择的培养基上,两种菌株都能生长,在添加维生素类物质的天然培养基上,生长旺盛;对pH适应范围较广;L.sp.在弱碱性条件下生长较好,而B.sp.在弱酸性条件下生长较好;温度对菌株生长影响较大,两种菌株最适生长温度均为25℃;极端水势条件下,L.sp.和B sp.均不能生长,轻度水分胁迫能促进L.sp.和B.sp.的生长。L.sp.是一种适应性较强的菌株。     

非蛋白氮对单细胞蛋白生产菌株生长影响的研究

主要研究了非蛋白氮对选育的山芋淀粉渣单细胞蛋白生产菌株生长的影响。采用选育的扣囊拟内孢霉 K991株、产朊假丝酵母 C986株、绿色木霉 T995株混合发酵山芋渣生产单细胞蛋白 ,结果表明适宜的非蛋白氮可有效促进不同发酵方式中菌株的生长。尿素添加量在质量分数为 2 .5 %时对扣囊拟内孢霉 K991单菌株生长有利 (7.7× 1 0 8个 /g) ,在质量分数 2 %对产朊假丝酵母 C986单菌株生长较好 (1 .2× 1 0 7个 /g)。多菌株混菌发酵好于单菌株发酵 ,尿素或硫酸铵添加量均在质量分数为 2 .0 % ,产朊假丝酵母 C986菌数和产品蛋白含量较高 ,分别为 7.0× 1 0 7个 /g和 2 5 .82 %。     

玉米细胞悬浮系的建立与单细胞培养效果

以330、辽7352和丹340共3个玉米自交系的雄幼穗为外植体获取愈伤组织,建立悬浮细胞系,在改良MS、改良B5、改良1/2B5 培养基中进行细胞悬浮培养。试验中发现 ,基因型和培养基对细胞悬浮系有很大影响,其中供试材料330表现最好,圆形细胞率平均达16.5%,改良1/2B5 培养基有利于细胞悬浮培养,500mg·L-1的水解酪蛋白对悬浮细胞生长有促进作用。2,4 -D的浓度影响悬浮细胞的生长和细胞成活率,浓度为1.0～2.0mg·L-1时比较适宜。细胞悬浮培养5～7d继代1次。在悬浮培养1个月后 ,经400目镍网过滤筛选,获得单细胞。单细胞培养中,激素水平和培养方式影响单细胞的分裂率,其中2,4-D的浓度为0.5～1.0mg·L-1时比较适宜。浅层培养和看护培养有利于单细胞的生长。在单细胞培养过程中试验获得了愈伤组织。