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31.
目的:初步探究靶向FoxM1多肽P201对人肝癌细胞的杀伤作用、死亡途径以及寻找多肽序列中关键的氨基酸残基。方法:本研究选取人肝癌HepG2细胞为主要研究对象,采用MTT法、AO-EB双染和流式细胞术检测P201多肽对HepG2细胞的杀伤作用和死亡途径,结合模体序列捜索、反义肽氨基酸、虚拟丙氨酸突变和分子对接等方法:确定P201多肽的关键氨基酸。结果:MTT法检测60.0μg/mL P201多肽对HepG2细胞作用48 h抑制率高达96%,形态观察和定量测定显示细胞早期凋亡的发生与P201多肽作用时间和剂量呈一定依赖关系;共确定5个氨基酸(第1、2、4、7、9位残基)为P201多肽的关键氨基酸残基。结论:初步揭示P201多肽对HepG2细胞的强杀伤作用与细胞凋亡相关并确定关键氨基酸为多肽分子的优化和多肽抗癌靶向药物的进一步研发提供了重要的依据与参考。  相似文献   
32.
采用PCR点突变技术,构建含有细菌荧光酶融合luxAB报告基因的重组哺乳动物载体pcDNA3-luxAB,脂质体lipofectin转染和G418抗性筛选稳定转染的Hela细胞。PCR和酶切电泳证明构建的正确性;经稳定转染pcDNAluxAB的Hela细胞,用发光仪可测得较强的发光强度(最大值为4.12mV/40μg细胞总蛋白粗提物)。而亲本及pcDNA稳定转染的Hela细胞则在本底值范围,pcDNA3<  相似文献   
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