禽流感病毒NP蛋白与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达

利用PCR技术扩增禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)NP基因。将NP基因克隆至T4噬菌体表达质粒pSOC的SOC基因(T4噬菌体表面非结构蛋白基因)下游,构建成T4噬菌体SOC位点表达NP的表达载体pSOC-NP。将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后表达的目的蛋白SOC-NP进行SDS-PAGE与Western-blot方法检测。结果表明,表达的SOC-NP蛋白相对分子质量约58kD,表达量占菌体总蛋白量的20.34%,并具有与AIV特异性抗体反应的活性。     

烟酸铬对奥尼罗非鱼生长及组织营养成分的影响

鱼类对糖的利用能力低于畜禽,饲料中最适的糖水平如黄尾(鱼狮)小于10%,太平洋鲑鱼小于20%,沟鲶为25%-30%,罗非鱼为40%1.在糖耐量实验中,鱼类表现持续的高血糖反应2,类似糖尿病型患者的反应。在哺乳类和人类的研究结果证实,微量元素铬(Cr)能恢复大鼠和儿童受损的葡萄糖耐量2,增强胰岛素的作用,铬参与组成葡萄糖耐量因子,提高大鼠和小鼠的生长和存活3.饲料中添加三氯化铬等化合物,显着提高罗非鱼对葡萄糖饲料的摄食量、增重率、蛋白质积累、能量积累和肝糖原含量4,提高鲤对葡萄糖的利用5.有机铬对鱼类的生长和饲料利用有何影响, 其作用机制如何, 是否和哺乳类相同, 这方面研究未见报道。本试验观察了烟酸铬对罗非鱼生长、饲料利用和组织营养成分的影响,旨在为进一步探讨铬对鱼类糖利用的影响及其作用机制奠定基础.       

建立液相芯片方法检测鉴别结核分枝杆菌复合群、鸟分枝杆菌与副结核分枝杆菌

运用液相芯片技术原理,以分枝杆菌菌种(群)特异基因序列IS6110、IS1081、IS1245和F57为目标基因,设计筛选4套扩增引物和杂交探针,建立同时检测鉴别结核分枝杆菌复合群、鸟分枝杆菌和副结核分枝杆菌的四重液相基因芯片检测方法。对13种共54株分枝杆菌菌株以及23种常见微生物样品的检测结果显示,四重液相芯片方法可特异检测鉴别目标菌种(群),与其它分枝杆菌菌种或微生物无非特异交叉反应;检测敏感性达2.1×101-2.5×102基因拷贝或0.06-0.74 fg DNA;组内检测变异系数和组间检测变异系数均<10%。采用四重液相芯片方法从临床结核疑似人痰样和牛组织样品中检出结核致病菌,检出率分别达75.6%(99/131)和94.9%(37/39),显著高于培养法(38.9%和53.8%)。对副结核疑似临床样品的检测试验结果显示,四重液相芯片方法与荧光PCR方法的阳性符合率为83%(24/29)。对四重混合模板的检测试验结果显示该液相芯片方法可鉴别不同菌种混合感染。四重液相芯片方法的检测周期<1 d,其中对纯化DNA模板的检测时间可在2-3 h内完成。     

口蹄疫病毒免疫活性串联片段FB的表达及免疫原性测定(英)

将口蹄疫病毒(FMDV)免疫串联片段FB克隆至原核表达载体pBAD/TOPO中,经鉴定后得到重组质粒pBAD-FB,将此重组质粒转化到受体菌TOP10中,用诱导剂阿拉伯醛糖分别以不同的浓度进行诱导,并在不同诱导时间进行采样,经处理后做SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹分析.结果发现以终浓度为0.002%的阿拉伯醛糖进行诱导,4 h后表达可达到高峰,其大小约为26 ku,软件扫描结果显示,FB融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的28.9%,能与抗FMDV抗体发生特异性反应,融合蛋白以包涵体和可溶形式存在.将融合蛋白的可溶性组分用50% Ni-NTA树脂过柱纯化并抽提融合蛋白的包涵体,经过洗涤后分别制成油乳剂疫苗,经皮下注射免疫豚鼠,用乳鼠中和试验测定豚鼠血清中和指数,并用口蹄疫病毒对豚鼠进行攻毒.结果表明,用此融合蛋白的纯化产物和包涵体免疫豚鼠能诱导产生高滴度的中和抗体,对病毒的攻击提供100%的免疫保护.     

有机铬对奥尼罗非鱼生长和糖利用的影响

研究了葡萄糖饲料和淀粉饲料中添加 2mg/kg有机铬对初始体重约 1 4g的奥尼罗非鱼鱼种生长和糖利用的影响。经过 8周饲养 ,添加烟酸铬和吡啶羧酸铬的葡萄糖组罗非鱼特定生长率显著高于对照组 (P <0 0 5 )。饲料效率在添加烟酸铬和吡啶羧酸铬的葡萄糖组和淀粉组均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。全鱼营养成分分析表明 ,添加吡啶羧酸铬、乙酸铬的葡萄糖组罗非鱼水分含量显著低于相应的淀粉组 ,而粗脂肪含量显著高于相应的淀粉组 (P <0 0 5 )。添加吡啶羧酸铬的葡萄糖组肝脏果糖二磷酸酶活力显著低于相应的淀粉组 ,而背肌磷酸果糖激酶活力显著高于相应的淀粉组 (P <0 0 5 )。结果说明 ,有机铬能显著促进罗非鱼对葡萄糖的利用 ;罗非鱼对葡萄糖和淀粉的利用能力无显著差异 ,但饲料糖源对体成分有显著影响