重组人肿瘤坏死因子α抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学活性检测

目的：评价原核表达、纯化的6×His-硫氧还蛋白（TRX）一人肿瘤坏死因子α（TNFα）抑制肽-C端抗炎酸性尾巴融合蛋白的生物学功能。方法：在大肠杆菌中分别表达带His标签的TRX对照蛋白及TRX蛋白融合的人TNFα抑制肽-抗炎酸性尾巴融合蛋白,并对2种蛋白进行N^2＋金属螯合层析纯化,采用MTT法检测纯化后的蛋白及化学合成多肽抑制TNFα标准品对L929细胞的细胞毒活性。结果：与对照蛋白相比,融合蛋白人TNFα抑制肽-C端抗炎酸性尾巴及合成多肽均能拮抗TNFα标准品对L929细胞的细胞毒作用。结论：融合蛋白人TNFα抑制肽-C端抗炎酸性尾巴及合成肽均能有效拮抗TNFα的生物学作用,为今后发展抑制TNFα为主的抗炎生物药物奠定了基础。     

不同坡位对火力楠生长的影响

对广东高明云勇林场的火力楠Michelia macclurei纯林及其混交林2004～2007年的生长状况进行调查。运用多重比较方法分析上、中、下坡位的火力楠地径、树高、冠幅。结果表明,4年间(林分当年至3年生)所有样地的火力楠幼树平均地径、树高和冠幅均有显著增长。坡位对火力楠的地径生长具有显著影响,各坡位的火力楠平均地径为上坡>中坡>下坡,而坡位对树高和冠幅的影响不明显。     

新辅助静脉化疗治疗中晚期宫颈癌患者的临床效果及机制分析

目的:探讨新辅助静脉化疗对中晚期宫颈癌患者的临床疗效及其可能作用机制。方法:收集于我院就诊或住院治疗的60例宫颈癌患者,根据治疗方案不同分为实验组和对照组,每组各30例。对照组患者采用放疗方案,实验组患者在对照组基础上应用新辅助静脉化疗方案,21 d为一疗程,共2个疗程。治疗期间密切注意患者的生命体征,并对出现的并发症进行及时治疗。治疗结束后,对患者的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、患者副作用发生率以及临床疗效进行检测并比较。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的血清TNF-α、VEGF水平均显著下降(P0.05);与对照组相比,实验组患者治疗后的血清TNF-α、VEGF水平及副作用发生率较低(P0.05),临床治疗总有效率较高(P0.05)。结论:新辅助静脉化疗能够显著提高中晚期宫颈癌患者的临床疗效并减少化疗相关的不良反应,这可能与其降低中晚期宫颈癌患者血清TNF-α、VEGF水平有关。     

用改良的非同位素凝胶电泳迁移实验鉴定核酸适配体与靶蛋白的结合

目的:在核酸适配体与靶蛋白特异结合的凝胶电泳迁移实验(EMSA)测定方法中,探索使用非同位素标记取代同位素标记。方法:取一定量的生物素标记的核酸适配体与靶蛋白(或无关蛋白)于室温孵育,聚丙烯酰胺非变性凝胶电泳后将核酸适配体湿转至带正电荷的尼龙膜上,紫外交联,经蛋白酶K消化后,用化学发光法检测。结果:与未使用蛋白酶K消化组相比,经蛋白酶K消化后,可明显呈现核酸适配体与靶蛋白特异结合后产生的阻滞条带,其灵敏度不次于同位素标记的检测方法。结论:经蛋白酶K消化步骤优化的生物素标记的EMSA方法,可以替代放射性同位素标记的EMSA方法,用于核酸适配体与靶蛋白结合情况的鉴定。     

溶液培养及缺素培养实验中番茄幼苗的培养

叙述了溶液培养及缺素培养实验中番茄幼苗的培养过程及注意事项。     

MHF组蛋白折叠复合体组分编码基因MHF1过表达对重组酿酒酵母纤维素酶生产的影响

【背景】重组酿酒酵母可用于生产多种药用蛋白和工业酶等外源蛋白,但蛋白分泌水平低是限制其异源蛋白高效生产的重要因素。异源蛋白表达和分泌过程可能会对宿主细胞产生多种胁迫,因此,研究胁迫响应相关基因对重组酵母异源蛋白生产的影响具有重要意义。Mhf1p是MHF组蛋白折叠复合体的组分之一,与DNA损伤修复及维持基因组稳定性有关,但其对异源蛋白生产的作用尚不清楚。【目的】研究MHF1过表达对重组酿酒酵母蛋白生产的影响。【方法】在分泌表达纤维素酶的重组酿酒酵母菌株中利用基于CRISPR-Cas9的基因组编辑技术整合过表达MHF1,分析其对产酶的影响,并探讨影响产酶的分子机理。【结果】与出发菌株相比,过表达MHF1菌株的外切纤维素酶CBH酶活性提高了38%。对过表达MHF1的CBH生产菌株中蛋白合成和分泌途径相关基因转录水平进行检测,发现与对照菌株相比,CBH1基因和与分泌相关的SEC22、ERV29等基因在不同时间点呈现不同程度显著上调。【结论】MHF1过表达可促进酿酒酵母异源外切纤维素酶的生产,并影响外源酶基因和分泌途径基因的表达,可能通过对多基因的协同表达影响促进产酶。     

纤维素酶液体深层发酵生产工艺的研究

对纤维素酶液体深层发酵进行了生产工艺的研究。在实验室摇瓶试验的基础上,进行了纤维素酶的二级和三级液体深层发酵的工业生产性试验。使酶活力达到140～155u／ml．为进一步的工业化生产提供了生产工艺路线及工艺参数。     

不同供氮水平下冬小麦叶片中RuBP羧化酶和硝酸还原酶的活性变化

氮素营养与小麦的生长发育、光合作用以及产量之间有密切的关系。Seeni和Gnanam认为增施氮肥能提高CO_2固定速率。Evans也指出:随着小麦叶片含氮量的增加,净光合速率上升,但并不呈线性关系,而是呈二次形曲线关系;即达到一定含氮量后,光合速率不再继续上升,且有下降趋势。很多学者指出,在一般田间饱和光强度     

基于城市生态系统研究范式构建生态功能红线理论方法及其应用

生态红线是保障区域生态系统健康和生态服务可持续性供给所必须严格保护的最小空间范围,科学划定生态红线是提高区域生态功能的重要举措。本文总结了生态红线的内涵和研究进展,重新搭建了以生态功能、环境和资源为对象,落在时间、空间、管理三维度上三条红线的组合理论框架体系,包括"生态功能红线"、"环境红线"和"资源红线"。以生态功能红线为例,从生态系统自身出发,基于城市生态系统的格局、过程、功能与宜人性的研究范式提出其划定方法,并以天津蓟县为案例,结合区域特征,区划出蓟县县域生态功能红线面积共11425 hm~2,主要分布在蓟县北部山区和河流流域。并针对相应红线区提出了对应的管控措施。本文是对生态功能红线理论、方法、模型和应用的初探,以期为后续生态红线的研究提供理论和方法支撑。     

bFGF、NGF、EGF及其受体在人胚神经管早期发育中的表达

研究bFGF、NGF、EGF及其受体在人胚神经管早期发育中的表达。方法 应用免疫组织化学方法和图像分析。结果显示bFGF和NGF的表达时序不同,bFGF阳性细胞出现较早,在所检测在各个发育阶段均呈阳性表达,而NGF出现较晚,随着胚龄增加,免疫阳性着色逐渐增强,bFGF分布较NGF广泛,而EGF在所检测的各个发育阶段均呈阴性。flg、TrkA、EGFR表达时序和分布相似,三者在所检测的各个发育阶段均阳性。结果表明NGF和bFGF均通过其特异性受体介导,在胚胎神经管形成和分化的不同阶段发挥着重作用,EGF及其受体的作用有待进一步研究。