用于蛋白质体外分子进化研究的DNA随机突变技术

蛋白质体外分子进化是模拟自然的进化过程,利用基因随机突变和定向筛选（选择）技术,以获得具有预期新功能的突变体分子。虽然体外进化近几年才产生,但已成为医药和工业领域中筛选具有特殊催化性质的酶的最重要的方法之一。ＤＮＡ随机突变技术是蛋白质体外分子进化研究的基础,本文将对几种最重要的突变方法：倾向错误的ＰＣＲ、ＤＮＡ重排、模板交错延伸反应和随机延伸突变的原理和应用等加以介绍。     

核酸质粒免疫后的基因定位

核酸疫苗免疫的一个安全性问题是核酸分子免疫接种后的去向。为探讨不同免疫途径及形式的核酸免疫后的基因表达部位,我们用克隆于ｐＣＭＶ载体的大肠杆菌β－半乳糖苷酸作为模型系统,不同途径免疫注射后,通过染色后的颜色来观察报道基因的表达水平以及分布,从结果来看,肌肉、腹腔、鼻腔注射裸ＤＮＡ或脂质体－ＤＮＡ２４ｈ后,蛋白可以在不同的组织中表达,表达水平与注射途径以及免疫方式有关。连续观察,在核酸注射等５ｄ后,     

外源蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的新策略

大肠杆菌是最常用的遗传工程宿主 ,但是 ,外源蛋白在大肠杆菌中表达 ,往往形成包含体。包含体的形成 ,在一定程度上限制了原核载体 宿主系统的应用 ,为了克服包含体的形成 ,目前常用的策略是分子伴侣 (如ＧｒｏＥＬ ＥＳ、ＤｎａＫ)、折叠酶系 (如ＤｓｂＡＢＣ、ＰＰＩ)、“分子内伴侣”(如Ｔｈｒｘ、ＧＳＴ、ＳＰＡ等 )甚至一些短肽的共表达或融合表达 ,上述策略虽然可以减少甚至完全避免包含体的形成 ,但都存在一定的缺点 ,如分子伴侣的作用存在明显的蛋白特异性 ,对不同蛋白辅助折叠效率不一样 ,对有的蛋白 ,甚至根本就不起作用 ,表现出…     

'99桂林全国医药生物技术学术研讨会

９９年９月１２—１６日,由中国生物工程学会医药生物技术专业委员会主办、军事医学科学院生物工程研究所承办,在广西桂林举办了全国医药生物技术专业学会９９年会。此次年会共收到来自全国７０多个单位的１６０多篇论文,与会代表１６０多人。在会上,多位国内著名专家对医药生物技术领域的发展现状与未来作了精彩的专题报告,４０多篇高水平的论文也进行了大会发言。与会代表就共同感兴趣的问题进行了广泛、深入的探讨,整个会议紧张、隆重而又热烈,与会者一致认为这次年会从多方面讲都取得了圆满成功。首先,就参加的人员来说;既有来…     

rhGH在大肠杆菌周质中的分泌表达

在大肠杆菌周质中分泌表达rhCH既有利于消除其在临床应用上的抗原性又有利于提取纯化，在rhCH的发酵生产中越来越受到青睐。就rhGH在大肠杆菌中的分泌表达机制以及启动子、引导序列、宿主茵、培养基和培养条件对分泌表达效率的影响等方面进行了综述。     

一种琼脂糖凝胶电泳分离质粒DNA的方法

分子无性繁殖已成为扩增特定 DNA 片段的广为使用的技术,而细菌质粒是很多无性繁殖工作中所选用的载体。近年来分离载体的方法,大多是根据载体 DNA 的共价闭合环状(CCC—DNA)性质及其对变性的抗性.在氯化铯—溴化乙锭梯度中,CCC—DNA 密度大,比线状 DNA 沉降快,所以用密度梯度超离心方法可获得高纯度的 CCC—DNA。但超离心方法在时间上、材料上都不够经济,在