亚硫酸氢钠对大蒜幼苗生长及细胞分裂的作用

研究SO2体内衍生物-亚硫酸钠与亚硫酸氢钠（分子比为3：1）混合液对大蒜幼苗生长和细胞分裂的效应。结果表明：低浓度（0.2mmol/L）的混合液促进幼苗生长,短时间（24h）作用时根尖细胞有丝分裂指数（MI）提高;高浓度（1.5与2.0mmol/L）处理抑制大蒜幼苗生长,细胞周期涎滞,大蒜根尖MI下降,并诱发细胞分裂异常,且呈明显的时间效应与剂量效应关系。     

二氧化硫衍生物对玉米种子萌发、幼苗生长和细胞分裂的影响

研究3种二氧化硫衍生物硫酸钠、亚硫酸钠和亚硫酸氢钠对玉米种子萌发、幼苗生长和细胞分裂的影响。结果表明,一定浓度(0.1 mmol·L^-1)的硫酸盐和亚硫酸盐处理液能促进玉米种子萌发和幼苗生长,但浓度超过2.5 mmol·L^-1时能抑制种子萌发和幼苗生长。较高浓度的3种盐溶液对根尖分生区细胞的分裂具有抑制作用,并导致其中的部分细胞异常,出现细胞核固缩,甚至产生质壁分离。3种二氧化硫衍生物的毒性排序为：亚硫酸氢钠＞亚硫酸钠＞硫酸钠。     

GFP工程酵母菌的构建及其对Cu2+的荧光响应

从酿酒酵母基因组DNA中克隆到金属硫蛋白启动子(PCUP1)片段,将绿色荧光蛋白(GFP)基因置于PCUP1的调控下,构建重组质粒pCUP9K-GFP,并通过氯化锂法转化毕赤酵母,获得工程菌株。工程菌细胞及其发酵液中可检出GFP荧光,表明PCUP1能启动外源基因GFP转录,使工程菌表达并分泌GFP。研究发现,工程菌培养液中分别加入10μmol/L的铜、铬、镉和砷离子后,铜处理组GFP荧光强度明显增加,其余三种离子对工程菌荧光强度影响不大;用铜离子诱导后,工程菌发酵上清液的荧光强度明显增强,并与铜离子浓度(0～1mmol/L)呈正相关。研究表明,该工程菌中启动子PCUP1受铜离子诱导,GFP的表达对铜离子具有剂量依赖性,在一定浓度范围内,GFP荧光强度与铜离子浓度呈正相关。     

SO2体内衍生物诱发蚕豆根尖细胞微核

以蚕豆为材料 ,研究 SO2 体内衍生物 -亚硫酸钠与亚硫酸氢钠混合液 (3:1)对根尖细胞的遗传毒效应。结果表明 :0 .0 5～2 .0 0 mmol/ L的 SO2 衍生物处理可诱发两品种蚕豆根尖中的微核细胞明显增加 ;不同浓度 (0 .0 5～ 15 .0 0 mmol/ L ) SO2 衍生物处理 12、2 4、36 h后 ,根尖微核细胞率是对照组的 2 .5～ 5 .0倍 ,显著高于对照组。在一定浓度范围内 ,蚕豆根尖细胞微核率与SO2 衍生物浓度之间具有正的线性相关。研究结果表明 ,SO2 衍生物能够破坏蚕豆根尖细胞的遗传稳定性。     

杜鹃对SO2胁迫的抗氧化防护效应

以SO2耐受性植物杜鹃(Rhododendron sp.)为材料,在2个高浓度SO2熏气后,检测了叶组织中丙二醛(MDA)、可溶性蛋白和叶绿素含量以及抗氧化酶活性.结果表明:40和80mg?m-3SO2熏气4h(1d)后,杜鹃叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性和MDA含量均分别比对照显著增加了11.26%、11.86%和73.32%、76.43%;随熏气时间的延长,SOD、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性持续增高,且SOD和CAT活性显著高于对照,MDA含量逐渐降至对照水平;SO2熏气导致叶片可溶性蛋白含量显著降低,但叶绿素含量却无显著改变.熏气后恢复期间,抗氧化酶活性相对降低,可溶性蛋白含量恢复至对照水平.研究发现,杜鹃对SO2的耐受性与细胞中抗氧化酶活性的诱导性增强有关,抗氧化能力增强是植物适应SO2胁迫的重要原因.     

SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞遗传损伤作用的研究

采用微核实验技术,研究大气污染物SO₂对蚕豆根尖和叶尖细胞的遗传损伤效应。结果表明2.80和28 mg·m^-3的SO₂熏气可以诱发蚕豆根尖和叶尖细胞损伤,导致根尖细胞有丝分裂指数下降,根尖和叶尖间期细胞微核率增高,并具有时间效应和浓度效应。经水恢复培养后,根尖分裂细胞数增多,微核率降低,说明恢复培养能够缓解高浓度SO₂对根尖细胞的遗传损伤。用石蜡层隔断SO₂在根部水中的溶解后,根尖细胞微核率低于叶尖细胞微核率,而在非隔断组中则相反,说明SO₂在水中的溶解是产生毒性效应的重要原因。高浓度SO₂熏气对蚕豆根尖和叶尖细胞具有遗传学毒性,由于根尖分生区具有较高的分裂指数和微核率,对环境SO₂毒性的反应更灵敏,蚕豆根尖微核实验更适于对环境SO₂的监测。     

SO2水合物诱发蚕豆（Vicia faba）根尖细胞染色体畸变效应

以蚕豆为材料,研究SO2水合物-亚硫酸钠与亚硫酸氢钠混合液（3∶1,mmol·L^-1/mmol·L^-1）对根尖细胞的遗传毒效应。结果表明：SO2水合物处理可诱发蚕豆根尖细胞遗传不稳定,出现染色体数目和结构变异,使非整倍体和染色体结构异常明显增加。中期染色体出现了缺失、断片、环（染色体和染色单体环）、易位、双着丝粒等异常;在细胞分裂后期出现了滞后染色体、桥和断片等异常。研究结果表明,SO2是DNA分子断裂剂、非整倍体诱变剂,能够破坏生物细胞的基因组稳定性,是一种具有遗传毒性的环境诱变剂。     

二氧化硫增强拟南芥植株对干旱的适应性

以模式植物拟南芥为材料,研究SO_2对植物干旱适应性的影响。采用分光光度法检测植物干旱生理指标的变化,并用半定量RT-PCR技术分析了拟南芥热激基因和干旱响应基因的转录水平。研究发现:4周龄拟南芥植株暴露于30mg/m3的SO_2后,6—72h间叶面气孔开度显著低于对照并逐渐减小,在暴露48h和72h时,热激转录因子HsfA2和热激基因Hsp17.7、Hsp17.6B、Hsp17.6C转录上调,干旱响应基因DREB2A、DREB2B和RD29A表达增强;在SO_2熏气72h后进行干旱胁迫,干旱期间SO_2预暴露植株的叶片相对含水量高于非熏气干旱处理组,植株萎蔫程度比后者明显减轻,且SO_2预暴露植株的地上组织中可溶性糖和脯氨酸含量升高,超氧化物歧化酶活性提高,丙二醛含量降低。结果表明:SO_2能降低气孔开度、提高抗氧化能力、上调热激基因和干旱响应基因转录,并能促进干旱期间植物细胞内渗透调节物质的合成和积累,促使抗氧化酶活性提高,从而降低干旱胁迫对植株造成的氧化损伤,增强拟南芥对干旱的适应性。植物通过基因转录应答、酶活性改变、渗透调节物质积累等,在适应环境高浓度SO_2的同时,提高了对干旱的适应性。     

大蒜幼苗基因组DNA的快速提取

1准备工作（1）试剂配制0．5mol／LEDTA3×ssc（0．45mol／LNaCl＋0．045mol／L柠檬酸三钢）0．1×10×ssc5mol／L高氯酸钠研磨缓冲液3×0．1mol／LEDTA1％SDSpH7．0（2）材料市售优质大蒜,去皮洗净,于培养皿中摆放整齐,加自来水浸没基部,使蒜瓣能充分吸收水分。室内萌发,每天换水2次,蒜苗长出4片叶时即可使用。2操作过程门）取幼苗109,剪碎后放入研钵中,加入等量（W／V）研磨缓冲液,研磨成浆状物。（2）将浆状物转移到磨口三角瓶内,加等体积的氯佑一异戊醇（2《：1＊／V）混合液;加瓶塞,剧烈摇动30see,以脱除组织蛋…     

NaCl对大麦幼苗生长及姊妹染色单体交换的影响

研究了NaCl胁迫下大麦幼苗生长及根端分生细胞的姊妹染色单体交换(SCE),当NaCl浓度提高时,SCE频率明显增大而细胞分裂指数却下降,实验组主胚根及幼苗的生长速度减慢。对细胞分裂和幼苗生长的抑制强度与处理浓度间呈正相关。实验结果表明,高浓度NaCl对幼苗生长和细胞分裂是有害的,它能引起细胞内的DNA损伤,因而具有潜在的诱变或致畸作用。