黄瓜花叶病毒运动蛋白基因及其缺失突变体在大肠杆菌中的表达和表达产物的纯化

利用ＣＭＶＦｎｙ 株系ＲＮＡ３ 全长ｃＤＮＡ 克隆, 构建了运动蛋白（ＭＰ） 基因５′端缺失突变体和３′端缺失突变体的原核表达载体。ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ 分析表明, 经ＩＰＴＧ 诱导, ＭＰ 基因及其２ 种缺失突变体均能在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３） ｐＬｙｓＳ中高效表达。利用分离包含体的方法, 提纯了全长的及Ｃ 端缺失的ＭＰ。光密度扫描分析表明, 提纯产物的纯度达９６ ．６ ％ 。     

甘薯病毒2中国分离物全基因组序列克隆及遗传进化分析

正甘薯病毒2(Sweet potato virus 2,SPV2)是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)成员。SPV2也称为甘薯脉花叶病毒(ipomoea vein mosaic virus,IVMV)和甘薯Y病毒(sweet potato virus Y,SPVY)~[1],是甘薯上常见的病毒之一。SPV2病毒粒体为线条状,长度为850 nm,在细胞质中形成风轮状或卷轴状内含体~[2]。SPV2可由桃     

1992年豫中烟区烟草花叶病优势毒原的初步分析

应用间接酶联免疫吸附法,对采自河南省中部烟区的花叶病标样检测结果表明,黄瓜花叶病毒(CMV)是1992年该烟区花叶病流行的优势毒原,其侵染率及含量均高于烟草花叶病毒(TMV)。CMV的平均侵染率为65.8％,TMV为29.7％,CMV和TMV的复合侵染率为27.9％。还对转基因抗花叶病NC89与普通NC89受侵染后的病毒含量进行了分析比较。     

广东晒烟大叶密合受青枯病菌侵染后差异表达蛋白分析

[目的]大叶密合是广东封开县地方名优晒烟品种,是当前发现烟草青枯病的优良抗源,深入研究其烟草青枯病抗性机理,寻找其青枯病抗性相关的差异表达蛋白,可为抗青枯病分子机理的深入研究和抗病育种提供参考.[方法]将烟草品种大叶密合、抗病对照品种D101、感病对照品种长脖黄进行青枯病菌室内接种鉴定,并利用蛋白质组学(iTRAQ)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析大叶密合接种前后基因的差异表达情况.[结果]接种青枯病菌后,大叶密合较长脖黄发病减缓.大叶密合检测到35个接种前后的差异蛋白,其中21个蛋白下调、14个蛋白上调,共有25个蛋白与植物胁迫相关.上调表达差异倍数最大的蛋白是烟草凝集素家族(Nictaba)的Hav1.采用实时荧光定量PCR技术研究烟草凝集素基因在接种后12 h内的表达量变化,发现其在接种后6 h和9 h表达量最高,随后开始下降.[结论]植物响应病菌入侵是一个复杂过程,鉴定到的差异蛋白中上调幅度最大的是凝集素家族成员之一的Hav1,接种强致病力和无致病力菌株后烟草凝集素呈现类似的表达模式,表明凝集素蛋白可能对病菌入侵后的上游反应发挥作用.     

甘薯羽状斑驳病毒外壳蛋白基因的分子变异

应用单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)技术结合核苷酸序列测定的方法,对我国甘薯主产区11个省份的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的分子变异情况进行了研究.结果表明,SPFMV CP基因的RT-PCR产物表现了较丰富的图谱类型,50个分离物共产生9种主要的SSCP带型;对显示不同带型的20个样品的CP基因进行了序列测定和进化树分析,CP基因核苷酸序列一致性为77.2％～99.9％.说明这些样品的SPFMV的CP基因存在较大的分子变异,可划分为EA、RC、O和C4个株系.     

地黄脱毒种栽无土繁育技术研究初报

为了降低脱毒地黄种苗的推广成本,在无土栽培条件下,研究了不同基质组合、施肥、种植密度对地黄出苗率、长势和种栽产量的影响,并将收获的地黄种栽进行大田栽培试验。结果表明:春季(4月10日)使用蛭石∶珍珠岩∶草炭=3∶1∶1体积比的基质组合处理的地黄出苗率和成苗率最高,分别为93.33%和89.17%;夏季(7月15日)使用煤渣∶珍珠岩∶菇渣=2∶1∶1体积比处理地黄出苗率和成苗率最高,分别为92.50%和88.89%,且块根褐变率最低。每100m2基质施用复合底肥5kg,并结合1/8MS营养液浇灌,地黄产量可达2.24kg/m2。栽培密度应控制在60～80株/m2。直径不小于1cm的种栽适合大田种植。无土栽培技术可以避免连作障碍,所繁育的脱毒地黄种栽符合大田种植要求。     

河南省地黄病毒病初步鉴定

 利用血清学、RT-PCR并结合核苷酸序列测定等方法,对河南省地黄病毒病进行了初步鉴定。结果表明,烟草花叶病毒(TMV)为侵染地黄的主要病毒;对TMV地黄分离物(TMV-RH) CP基因的序列分析结果表明,TMV-RH与TMV-U1株系CP基因的核苷酸同源性为86.5%,氨基酸同源性为94.3%;与已发表的TMV其它株系CP基因的核苷酸同源性在76.3%~88.5%之间,氨基酸同源性在79.3%~95.0%之间,同源性较低。根据不同株系CP的氨基酸序列进化树分析,推测该分离物可能为TMV的一个新株系。     

转基因抗病毒工程烟草的田间抗性试验

方荣祥等将烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的外壳蛋白(CP)基因转入我国烟草主栽品种NC89后,经过连续两年3代的田间选择鉴定,于1990年秋在河南获得了几个纯合的转基因抗花叶病烟草株系（待发表）。     

DDT对花生种子生活力和发芽的影响

利用TTC和水培方法研究了DDT对花生种子生活力和发芽的影响,结果显示,用浓度为4mg/kg-128mg/kg的DDT溶液培养5d的种子其生活力和活力指数皆显著增加,而对发芽率和发芽指数没有显著影响。关于DDT对花生种子的刺激作用及其机理,尚需深入研究。     

烟叶钾含量种质间差异分析及其田间鉴定指标筛选

【目的】探讨烟叶钾含量田间鉴定指标筛选,分析烟草种质间烟叶钾含量差异,筛选其田间鉴定 指标,建立可靠的数学评价模型。【方法】以 31 份烟草种质为试材,采用田间试验,调查株高（x1）、茎围（x2）、 节距（x3）、叶数（x4）、最大叶长（x5）、最大叶宽（x6）、主侧脉夹角（x7）、茎叶夹角（x8）、花冠长度（x9）、 花冠直径（x10）、花萼长度（x11）11 个形态特征指标,运用聚类分析、主成分分析、因子分析和多元逐步回 归分析方法对烟叶钾含量进行综合评价。【结果】通过聚类分析将 31 份烟草种质聚类分成高钾种质、中钾种 质、低钾种质 3 种类型。通过主成分分析将 11 个形态特征指标转换成 5 个彼此独立的综合指标,代表了全部 数据 84.624% 的信息量。通过多元逐步回归分析建立烟叶钾含量的数学评价模型 y=-1.699+0.041x5+0.831x10 （R2=0.9602）,估计精度在 89.66% 以上。【结论】叶长及花冠直径对烟叶钾含量信息有极显著的反映能力, 可作为烟叶钾含量的田间鉴定指标。