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SNAT2是SLC38基因家族编码的Na+偶联中性氨基酸转运蛋白中属于systemA的成员之一.它在谷氨酸一谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用.增强型绿色荧光蛋白EGFP的连接对于SNAT2在细胞表达中的定位以及检测都有很大的帮助.采用PCR扩增和酶切技术将EGFP连接到质粒pBK-CMV△-SNAT2中SNAT2的N端.通过酶切后琼脂糖凝胶电泳和测序验证得到pBK-CMV△-EGFP—SNAT2质粒载体,将构建好的质粒瞬时转染进人胚肾细胞(HEK293cells)用Westernblot和激光共聚焦电子显微镜检测EGFP-SNAT2的表达与亚细胞定位.结果表明:EGFP.SNAT2在细胞中正确表达并定位于细胞膜上.pBK.CMV么.EGFP.SNAT2质粒载体的构建对于进一步研究SNAT2的结构和功能具有重要意义. 相似文献
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钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达,具有转运中性氨基酸的功能,在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用.为了方便测定SNAT2在细胞膜上的表达和定位,本研究采用PCR扩增和酶切连接将HA标签蛋白与SNAT2的C末端连接,构建了真核生物表达载体pBK-CMVA(1098—1300)-SNAT2-HA表达载体.用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染到HEK293T细胞中,通过Westernblot法检测到SNAT2-HA融合蛋白在细胞膜上的正确表达和定位.pBK-CMV△(1098-1300)-SNAT2-HA表达载体的成功构建,为今后对SNAT2的结构和功能的研究提供了有效方法. 相似文献
43.
根据体育教学环境的特点和功能,结合体育教学实践的运用情况,笔者提出了创建体育教学环境必须遵循的五大原则,即:整体协调性原则、个性化原则、简便优化的原则、因地制宜原则、主体性原则。他们是科学构建体育教学环境、提高体育教学效果的根本保证。 相似文献
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45.
针对在实际工程应用中埋地排水管道不同程度的堵塞难以检测的问题,提出了一种基于声学特征的管道堵塞故障类型的聚类识别方法.首先对管道中采集的声学信号进行声压级变换,以增加不同故障类型之间的区分度,其次对声压级信号进行总体平均经验模态分解(Ensemble Empirical Mode Decomposition,EEMD),利用皮尔逊相关系数选取前4个IMF分量并提取中心频率和能量占比作为聚类特征,之后采用主成分分析法(Principal Component Analysis,PCA)对特征向量进行降维,最后通过FCM((Fuzzy C-means))和GK(GustafsonKessel),GG(Gath-Geva)3种聚类学习方法对特征向量进行堵塞故障的聚类和识别.实验结果表明,该方法能有效识别排水管道内不同程度的堵塞故障,具有一定的工程实用价值. 相似文献
46.
47.
实时检验泡沫并对市场参与者和监管者进行预警,有利于防范和化解金融风险。基于检验泡沫的严格局部鞅判别原理,在RKSH方法的基础上拓展了一种倒向滚动检验方法(BSLM),并通过蒙特卡洛仿真和实证分析验证了新方法的有效性。研究发现:相对于传统严格局部鞅判别方法,BSLM方法对距离当前时刻较近的泡沫具有更高的检验势,并且能更早地事前预警泡沫;在对中国股票市场主要指数2000~2015年的泡沫检验中,新方法能判断泡沫的生成时间和破灭时间,发现上证指数和深圳成指的泡沫具有较强的联动性。 相似文献
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针对箔条自卫干扰对新体制雷达的干扰能力和效果不断下降的问题,提出了一种复合干扰方法。该方法运用机载电子干扰设备接收并转发敌机载火控雷达或空空导弹制导导引头(以下简称敌方雷达)发射的信号,经由载机的干扰发射天线照射到箔条云上,箔条云对干扰信号二次辐射,被敌方雷达接收,形成假目标(不同于箔条云反射雷达信号形成的假目标),起到诱骗干扰作用。仿真计算结果表明:采用此复合干扰后,敌方雷达接收到的箔条云有效反射面积比原来提高几十倍甚至几百倍以上,从而缩短了箔条云的展开时间,增大了压制比,并验证了此方法的可行性,提高了飞机的综合干扰能力,具有较强的实用价值。 相似文献
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