细胞周期素D1shRNA表达载体的构建及其对A549细胞增殖的影响

目的 构建针对细胞周期素D1(cyclinD1,由CCND1基因编码)的shRNA表达载体,筛选出有效序列,观察其对肺腺癌A549细胞增殖的影响.方法 设计针对cyclin D1基因编码区的3条寡核苷酸链,体外退火后克隆入干扰栽体Pgenesil-1中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定.以脂质体法将空载体Pgenesil-1-K和3个重组质粒Pgenesil-1-CCND11、Pgenesil-1-CCND12、Pgenesil-1-CCND13分别导人549肺腺癌细胞,48 h后用Real time PCK和Western blotting技术检测各实验组肺腺癌细胞内cycli D1 mRNA及蛋白的表达情况,用流式细胞仪检测细胞周期观察构建的载体对A549细胞增殖的影响.结果 经酶切鉴定及DNA测序,重组质粒中已插入了目的 基因片断.转染cyclin D1-shRNA的A549细胞48 h后测定cyclin D1 mRNA和蛋白含量.以Pgenesil-1-CCND13抑制cyclin D1 mRNA及蛋白表达效果最为有效.其抑制率分别为62%和60%,而且它能抑制A549细胞的增殖.结论 成功构建了针对cyclin D1的RNA干扰表达载体Pgenesil-1-CCND11、Pgenesil-1-CCND12、Pgenesil-1-CCND13,Pgenesil-1-CCND13能有效抑制cyclin D1在A549细胞中的表达,并抑制A549的增殖,为进一步应用于肺腺癌的治疗实验研究奠定了基础.     

改良HE染液配制提高细胞核着色质量的观察

HE染色中细胞核的着色非常重要,细胞核发灰、发黑、结构不清是影响病理诊断的首要因素.本室通过长期实践,摸索出一套有效提高HE染色中细胞核染色质量的方法.     

一种新型长效重组绒毛膜促性腺激素的表达、活性和药代动力学研究

目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3＇端,构建hCG-Fc表达载体并将其稳定表达在哺乳动物细胞,通过无血清悬浮细胞培养和基于亲和层析的蛋白纯化,制备了新型重组hCG-Fc融合蛋白.检测其分子量、ELISA免疫活性和体内生物活性,并测定其在大鼠体内血循环半衰期.结果 重组融合蛋白分子量与理论推断值相当,ELISA活性为2 965 IU/mg,体内生物活性为2 288 IU/mg,消除半衰期为174 h.结论 hCG-Fc融合蛋白构建表达成功,且具有显著的体内外活性,药代动力学分析显示hCG-Fc重组融合蛋白半衰期是重组hCG的近6倍.这种新型长效融合蛋白在临床上可大大减少注射次数,提高患者用药依从性,具有显著的社会和经济效益.     

新型隐球菌性脑膜炎16例误诊分析

神经系统真菌感染是全身深部真菌病的特殊表现,近20年来深部真菌病的发病率比上世纪70~80年代增加了3~5倍以上。新型隐球菌性脑膜炎是深部真菌病中比较常见的一种类型,由新型隐球菌感染中枢神经系统所致的脑膜和脑实质的亚急性或慢性炎症。目前发病率有逐年上升趋势[1]。我院自2002年至2006年共收治新型隐球菌性脑膜炎26例,其中初诊误诊16例,误诊率达61%。现将误诊病例分析报告如下。1临床资料1.1一般资料本组16例患者中,男9例,女7例;年龄16~64岁,平均30.12±9.8岁。2例伴有恶性肿瘤,3例伴有糖尿病,2例伴有血液病,4例长期应用抗生素或免疫抑…     

血清尿酸、膀抑素水平与新生儿神经行为评估分值的相关性研究

目的观察血清尿酸、膀抑素水平与新生儿神经行为评估分值的相关性研究。方法临床选择2016年5月-2017年3月选择缺氧缺血性脑病患儿100例,在其病情不同时期(恢复期、急性期)应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清膀抑素水平(CysC)、尿酸(UA)水平,同时选择体检健康新生儿100例为研究对照,应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清膀抑素水平(CysC)、尿酸(UA)水平,评估全部研究对象的新生儿行为神经测定(NBNA)评分,观察缺氧缺血性脑病病情不同时期、健康新生儿的血清尿酸、膀抑素水平与新生儿神经行为评估分值的相关性。结果 HIE患儿急性期的膀抑素(CysC)、尿酸水平(UA)显著高于恢复期、体检健康者,差异有统计学意义(P0.05),NBNA评分则显著低于恢复期、体检健康者,差异有统计学意义(P0.05),而HIE患儿恢复期的膀抑素(CysC)、尿酸水平(UA)显著高于体检健康者,差异有统计学意义(P0.05),HIE患儿恢复期的NBNA评分水平显著低于体检健康者,差异有统计学意义(P0.05)。HIE恢复期测定NBNA正常例数34例,随着膀抑素、尿酸水平的增高,HIE患儿的NBNA水平呈下降趋势,差异有统计学意义(P0.05)。结论缺氧缺血性脑病患儿的血清膀抑素、尿酸水平随着病情的加重而出现增高趋势,而其神经行为评分则出现下降趋势,检测新生儿的膀抑素、尿酸水平有助于评估新生儿的神经系统行为。     

心脏异物并发感染性心内膜炎1例

患者 男，56岁，因“憋闷、咯痰困难、不能平卧”入院。咳嗽，白痰，每年冬季较重已16年，近二三年常在上呼吸道感染后病情有急性发作，均经抗生素静脉滴注后缓解，且平时较重劳动时气短明显，诊断为慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病。近1年来轻微活动即有气急，不能耐受快走、上楼等活动，2个月前摄胸部X线片示：慢性阻塞性肺疾病、间质性肺炎。     

先天性无脑儿及其合并症超声诊断

为探讨B超对先天性无脑儿及并发症的诊断，回顾分析了26例先天性无脑儿及其合并症的超声表现。结果，23例无脑儿合并羊水过多，其中4例合并脊柱并脊膜膨出；10例合并脊柱裂无脊膜膨出，3例合并羊水过少。B超是诊断先天性无脑儿及合并症的有效方法。     

无症状心衰应用阿托伐他汀治疗的疗效分析

目的：观察分析无症状心衰应用阿托伐他汀治疗的临床疗效。方法：针对我院从2012年2月到2014年2月收治60例无症状心衰患者，对患者病历资料进行回顾性分析，并将其分为试验组和对照组，且每组都有30例患者，对照组患者采取常规药物治疗方法；试验组中患者采取阿托伐他汀治疗，观察分析两组患者的临床效果，分析阿托伐他汀对治疗无症状心衰的功效。结果：在两组患者中，试验组无症状心衰患者治疗后疗效高于对照组，两对比分析有统计学意义，并以（P＜0．5）来进行表示。结论：在临床治疗无症状心衰中，应用阿托伐他汀治疗有很好的疗效，可以提高临床中患者的治疗效果，值得在实际中推广。     

腹腔镜胆囊切除术50例报告

目的探讨腹腔镜胆囊切除术常见并发症的发生及预防。方法对本院2年来开展的50例LC中产生的并发症及其处理过程进行总结分析。结果LC并发症的发生与术者操作技术及术中的判断和处理密切相关。结论预防LC并发症关键在于严格掌握手术适应证,术中操作精细,缜密思维,果断中转开腹可减少并发症的发生。     

临终患者深部念珠菌感染与白细胞和C-反应蛋白的关系研究北大核心CSCD

目的研究白细胞和C-反应蛋白与临终患者深部念珠菌感染的关系。方法选取2013年6月-2016年6月医院收治的确诊为深部念珠菌感染的临终患者233例及同期住院患者200例作为研究对象,根据微生物检测结果分成四组,单纯细菌感染组100例、单纯念珠菌感染组101例、念珠菌联合细菌感染组132例和微生物阴性组100例,采用免疫透射比浊法测定C-反应蛋白水平,血细胞分析仪法测定白细胞,比较各组间C-反应蛋白与白细胞水平的差异。结果 233例深部念珠菌感染患者感染以白假丝酵母为主;单纯细菌感染组、单纯念珠菌感染组和念珠菌联合细菌感染组WBC、CRP水平均明显高于微生物阴性组,与单纯细菌感染组比,单纯念珠菌感染组和念珠菌联合细菌感染组WBC、CRP水平均明显升高(P<0.05);与单纯念珠菌感染组相比,念珠菌联合细菌感染组WBC、CRP水平均明显降低(P<0.05);治疗7d后,单纯念珠菌感染组和念珠菌联合细菌感染组WBC及CRP水平明显升高(P<0.05),与单纯念珠菌感染组相比,念珠菌联合细菌感染组WBC差异无统计学意义,CRP水平低于单纯念珠菌感染组(P<0.05);相关性分析结果显示,CRP水平与深部念珠菌感染程度呈正相关,WBC水平与临终患者深部念珠菌感染病情相关性不强。结论 C-反应蛋白水平与深部念珠菌感染病情程度呈正相关,可以用于念珠菌感染病情预测。