胰腺内皮细胞共培养对C3A细胞功能变化的影响

Objective To investigate the functional changes of C3A cells co-cultured with pancreatic endothelial cells. Methods C3A cells and pancreatic endothelial cells lwere cultivated directly and indirectly for 7 days by the density ratio of 10: 1. Meanwhile, the blank control was established.The growth and morphological characteristics of experimental groups were observed. The out leakage level of AST, ALT and the synthesis level of albumin and the diazepam metabolism level were determined by automatic biochemistry analyzer, radioimmunoassay and enzyme linked immunosorbent assay. Results Direct co-cultivation of C3A cells and pancreatic endothelial cells could reduce the out leakage of ALT and AST in the 5th and 7th d. The capacity of albumin synthesis could reach 12. 977μg/ml on the 7th d and the that of diazepam metabolism could also be improved. Indirect co-cultivation of C3A cells and pancreatic endothelial cells could significantly raise the albumin synthesis to 7. 380 μg/ml and 10. 773 μg/ml on the 5th and 7th d, respectively. Conclusion Co-cultivation of C3A cells and pancreatic endothelial cells can significantly improve the basic biological function of C3A cells.     

海藻糖对生物人工肝用人永生化肝细胞系C3A细胞低温的保存

背景：随着生物人工肝在临床上的应用,需要有一种方便、有效、实用的保护生物反应器装载细胞活力及功能的方法,设计有自主知识产权的生物人工肝用肝细胞的低温保护液迫在眉梢。 目的：验证海藻糖作为低温保护剂在4 ℃低温保存肝细胞的作用。 方法：采用C3A人永生化肝细胞系在不同低温保存液(DMEM培养液,乳酸钠林格氏液,加有不同浓度海藻糖的乳酸钠林格氏液,UW液)4 ℃保存24,48,72 h。复苏后行细胞活力、细胞损伤指标、氧自由基代谢相关指标等检测,并通过荧光双染法观察细胞凋亡情况。 结果与结论：不同低温保存液保存不同时间C3A细胞的活力、细胞损伤及细胞凋亡表现均有所不同,其中同时间点不同浓度海藻糖组均优于单用乳酸钠林格氏液组,但不如UW液组(P < 0.01)。而保存24 h的不同浓度海藻糖组及UW液组与乳酸钠林格氏液组相比差异无显著性意义(P > 0.05),提示海藻糖能有效减轻低温对肝细胞凋亡及缺血再灌注损伤的程度,可成为低温保存液中有效及重要的保护剂组分。     

联勤疗养院2008年药物应用分析

目的分析杭州疗养院陆海空3个疗区药物应用情况,共同建立合理用药监测流程。方法对3个疗区2008年药品销售金额,销售金额排名,抗菌药物使用频度等数据进行统计分析。结果陆海空疗区药物销售、注射剂销售总金额、抗菌药物使用频度排名前10位,均符合各疗区疗养治疗体检特点。结论该年度陆海空疗区药物应用合理,抗菌药物使用均低于WHO标准。     

3D腹腔镜单孔胆囊切除手术：附2例报告

目的探讨借助“3D”腹腔镜系统完成单孔腹腔镜胆囊切除手术的可行性及临床经验。方法经临床筛选2 例胆囊良性疾
病患者,均有反复发作右上腹痛的病史,上腹部B超检查提示胆囊结石。手术均在“3D”腹腔镜系统辅助下经脐部单一操作孔进
行操作。结果2 例患者均成功完成手术,手术时间分别为35 min及50 min,平均40 min。患者术后8 h可下床活动,术后第1天
恢复正常饮食,第2天均出院,临床症状均消失。结论“3D”腹腔镜系统能够在单孔腹腔镜手术操作时很好地显露术区组织层次
结构,特别是一些关键组织结构如“胆囊三角”,提高了手术的安全性,有利于单孔腹腔镜胆囊切除术的进一步推广。
     

儿童肥胖与代谢综合征及胰岛素抵抗的关系

目的 研究儿童肥胖与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)组分及胰岛素抵抗的关系。方法 选择本院儿科门诊筛选的46例肥胖儿童患者[年龄(12.6±2.1)岁]为研究对象,51例正常体重儿童[年龄(12.5±1.9)岁]作为对照组,比较两组的临床特征及MS组分的差异,并分析胰岛素抵抗的影响因素。结果 1)肥胖组儿童的体质指数(body mass index,BMI)、腰围(waist circumference,WC)、血糖、血压、血脂水平(包括总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、非高密度脂蛋白)及胰岛素抵抗程度均明显高于对照组,而高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-c)明显低于对照组(均P<0.05);2)肥胖组中高血压儿童7例(15.2%),高甘油三酯(TG)血症14例(30.4%),低HDL-c或高非HDL-c血症2例(4.3%),血糖异常3例(6.5%),可诊断为MS的儿童有8例(17.4%),而正常对照组仅2例TG增高(3.9%);3)多元逐步回归显示WC(标准化β=0.432,P<0.01)及TG(标准化β=0.207,P<0.05)为胰岛素抵抗的独立影响因素。 结论 肥胖儿童易存在不同程度的代谢异常,更易患代谢综合征。腰围及甘油三酯为胰岛素抵抗的独立影响因素。     

CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制备**

背景：小鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞生长用饲养层,优于无饲养层,它能够分泌一些既促进干细胞生长又能抑制干细胞分化的因子。 目的：建立CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层最佳的分离培养方法,分析丝裂霉素C抑制成纤维细胞增殖的最佳浓度与时间,用于培养诱导多能性干细胞。 方法：取孕10~15 d CF-1小鼠,分离胎鼠原代成纤维细胞,经不同质量浓度(5,10,15,20 mg/L)丝裂霉素C处理不同时间(1,1.5,2,2.5,3 h)制备饲养层,并观察其增殖情况。将人诱导多潜能干细胞或胚胎干细胞在丝裂霉素C处理过的饲养层上培养,观察细胞集落生长情况。 结果与结论：制备CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的最佳胎龄为13.0~14.0 d。丝裂霉素C抑制CF-1小鼠胚胎成纤维细胞增殖的最佳浓度及作用时间为10 mg/L,2.5 h,成纤维细胞饲养层可以维持5~7 d。诱导多能性干细胞与胚胎干细胞在经10 mg/L丝裂霉素C处理2.5 h后饲养层上能发育成典型的“鸟巢”状干细胞集落。 关键词：胚胎成纤维细胞;诱导多潜能分化干细胞;饲养层;丝裂霉素C;细胞集落 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.017     

去细胞化肝脏生物支架材料的制备

目的探讨制备去细胞化肝脏生物支架(decellularize d liver biological scaffold,DLBS)的新方法,寻找适合肝脏组织工程的新型支架材料。方法 (1)采用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备去细胞化全肝脏生物支架,并观察去细胞化效果;(2)DLBS与C3A及骨髓间充质干细胞体外共培养,观察DLBS细胞相容性。(3)通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察DLBS对C3A的增殖作用。(4)将DLBS植入SD大鼠背部皮下,4周后处死大鼠,观察鉴定DLBS的组织相容性。结果通过HE染色、扫描电镜观察证实经过化学去垢剂—酶联合去细胞方法制备的去细胞化全肝生物支架不含细胞成分,只剩下胶原、弹性蛋白等支架成分;体外培养实验发现,L02及骨髓间充质细胞能够与DLBS粘连、生长。MTTAssay检测证实DLBS有促进C3A生长、增殖的作用。结论利用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备的DLBS脱细胞彻底、细胞外基质保留较完整,并且有促进细胞粘附、增殖和分化的作用,是一种较为理想的生物支架材料。     

数字乳腺断层融合X线摄影与常规影像学检查诊断效能的对比研究

背景与目的:乳腺癌已成为女性最常见的恶性肿瘤,乳腺X线摄影新技术的出现对乳腺癌诊断起重要作用;该研究旨在对比数字乳腺断层融合X线摄影(digital breast tomosynthesis,DBT)与常规影像学检查诊断乳腺良、恶性病变的效能.方法:收集2015年3月—2015年12月在复旦大学附属肿瘤医院就诊且经临床或超声检查怀疑乳腺病变的227例患者.所有患者均行B超、全屏数字乳腺X线摄影(full-field digital mammog-raphy,FFDM)、DBT和MRI检查.高年资影像医师双盲阅片,参照2013版BI-RADS分类标准,以病理结果为金标准,采用受试者工作特征(operating characteristic,ROC)曲线分析各种检查方法的诊断效能,并利用Z检验比较DBT与其他检查方法的统计学差异.结果:30例患者因图像不符合诊断要求而排除,剩余197例患者共发现205个病灶,其中良性病灶73例,恶性病灶132例.B超、FFDM、DBT、DBT+FFDM和MRI基于BI-RADS分类诊断乳腺良、恶性病变的ROC曲线的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.8308、0.8592、0.9167、0.9198和0.9354;两两比较结果显示,DBT的AUC高于B超和FFDM,且差异均有统计学意义(比B超相比,Z=7.36,P=0.0067;与FFDM相比,Z=4.89,P=0.0271);DBT与MRI、DBT+FFDM的AUC差异无统计学意义(与MRI相比,Z=0.02,P=0.9002;与DBT+FFDM相比,Z=0.69,P=0.4048).结论:DBT较B超、FFDM能显著提高乳腺良、恶性病灶的诊断效能;并与MRI诊断效能相当.DBT作为乳腺X摄影新技术,具有良好的应用前景.     

中医角度浅析骨质疏松症

骨质疏松症(OP)是一种常见的骨骼疾病,是一种以骨量低下,骨组织微结构损坏,导致骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨病[1],以疼痛、脊柱变形、骨折为临床特征。骨质疏松症是一种衰老相关性疾病,国际医学界已将骨质疏松症列为严重危害中老年人健康的重大疾病之一[2]。中医认为,其病机为肾虚精亏,与肝脾关系密切;其病性为本虚标实,以藏虚为本、气血不行、闭阻经络为标。本文从中医病机及治疗角度浅析骨质疏松症。     

不同药物麻醉下行肝肿瘤切除患者术后血浆miR-92a水平与肝损伤指标的关系

目的 分析不同药物麻醉下行肝脏肿瘤切除患者术后血浆miR-92a水平与肝损伤指标的相关性,探讨血浆miR-92a表达水平对肝脏肿瘤切除术后肝损伤的诊断价值.方法 将择期行肝脏肿瘤切除手术的93例患者按照麻醉药物不同分为七氟醚组48例和丙泊酚组45例.检测两组患者术后12 h血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平,采用RT-PCR方法检测两组患者血浆中miR-92a的相对表达量,并进行对比分析.采用Pearson相关分析分析两组患者血浆中ALT、AST与miR-92a水平的相关性,采用ROC曲线评价血浆中miR-92a对两组不同药物麻醉下肝肿瘤切除术患者肝损伤的诊断价值.结果 七氟醚组患者血浆中ALT、AST、TBIL表达水平和miR-92a相对表达量均高于丙泊酚组(t=2.492～5.102,P<0.05).Pearson相关分析显示,七氟醚组和丙泊酚组患者血浆中ALT、AST水平与miR-92a相对表达量均呈正相关(r=0.411～0.522,P<0.05).ROC曲线分析结果显示,七氟醚组和丙泊酚组患者血浆中miR-92a诊断肝损伤的临界值分别为0.932、0.915时,对应的曲线下面积分别为0.972(95％CI=0.943～1.000,P<0.05)和0.868(95％CI=0.786～0.950,P<0.05),血浆中miR-92a对七氟醚组患者肝损伤诊断的灵敏度为87.2％,特异度为96.0％,对丙泊酚组患者肝损伤诊断的灵敏度为75.7％,特异度为96.0％.结论 不同药物麻醉下行肝脏肿瘤切除患者术后血浆中miR-92a水平均与ALT、AST水平具有相关性,血浆中miR-92a水平对七氟醚和丙泊酚麻醉下行肝脏肿瘤切除术后患者肝损伤具有较高的预测价值,有望成为肝肿瘤切除术后肝损伤的诊断标志物.