人表皮细胞在牛胶原膜粘附、生长及分化的研究

目的在牛胶原膜中植入胎儿表皮细胞和成纤维细胞，构建人工复合皮替代物，以研究细胞的粘附、生长、分化及真表皮间的相互作用。方法(1)酶消化法培养胎儿表皮细胞和成纤维细胞；(2)制备人工复合皮，接种表皮细胞后于不同时间通过HE染色和扫描电镜观察细胞的形态和数量变化；(3)透射电镜观察该复合皮中细胞的结构；(4)裸鼠移植试验验证该复合皮的作用。结果(1)该人工复合皮具有一定的弹性，可出现较明显的细胞增殖，未见人工复合皮收缩现象。(2)HE染色和扫描电镜下可见随培养时间的延长，成纤维细胞和表皮细胞逐渐增多，表皮细胞可发生分化。并逐渐分层。(3)透射电镜下见成纤维细胞和表皮细胞功能活跃。(4)裸鼠移植试验证实该人工皮可起到覆盖创面防止感染的作用。结论该人工复合皮基本具备了正常皮肤的结构和功能，可作为移植物覆盖全层皮肤损伤。     

胰腺癌与多药耐药基因LRP的相关性研究

近年来胰腺癌发病率持续增加，早期诊断困难，术后易复发，预后差、‘。成功的肿瘤切除和有效的化疗是当今治疗胰腺癌的主要手段。化疗耐药是引起化疗失败的一个重要因素。化疗耐药不仅与MDR1(muhidrug resistance 1，MDR1)，MRP(multidrug resistance associated protein gene，MRP)和GST-(glutathione S-transferase Pi，GST-)等耐药基因有关，还与LRP     

IL-6、IL-6R和Fas、FasL、Bcl-2与胃癌关系的研究

采用免疫组织化学染色对胃黏膜不同病变中Fas／FasL和Bcl-2表达进行检测，同时应用原位杂交技术探讨IL-6及IL-6R(IL-6受体)在胃癌发生发展中的变化规律及临床意义。     

高功率微波对兔眼晶状体上皮细胞P21WAFl及Cyclin E表达的影响

目的 观察高功率微波(high power microwave,HPM)对实验动物兔眼晶状体上皮细胞P^21WAF1、Cyclin E表达水平的影响,以探讨防护HPM眼损伤的机理及方法。方法 采用功率密度为800mW／cm^2的微波持续照射青紫兰兔眼组织20min,并于微波照射后30d,90d,180d及360d时应用免疫组化、原位杂交及图像分析技术对兔眼晶状体上皮细胞P^21WAF1、Cyclin E蛋白及其mRNA表达水平进行检测。结果 HPM照射可影响晶状体上皮细胞的正常增殖过程;当HPM照射后30d时,P^21WAF1表达明显升高,对细胞增殖周期抑制作用增强;Cyclin E表达则明显降低,其正性调节细胞生长作用减弱;当HPM照射后90,180及360d时,微波照射组上述各指标与对照组比较,差异均无显著性意义,而且各项指标的mRNA表达均与其蛋白表达同步且一致。结论 HPM照射可干扰细胞正常的牛长增殖周期进程,而晶状体上皮细胞增殖异常可能是导致白内障的重要原因之一。     

加速器照射大鼠伤口愈合过程中血小板源性生长因子及其受体表达与胶原形成的关系

目的：探讨加速器照射后大鼠皮肤伤口愈合过程中血小板源性生长因子及其受体表达与胶原形成的规律。方法：实验于2002—05／2003—06在解放军军事医学科学院附属医院放疗科及解放军军事医学科学院放射医学研究所病理室完成。清洁级雄性Wistar大鼠36只，体质量（200&;#177;20）g，随机数字法分为4组，每组9只，1组作为空白对照组，3组作为照射组。在每只大鼠背部脊柱两侧切2个圆形创面，创面直径1．5cm，深达皮下组织全层，2个创面间隔1．5cm。处理完毕后以无菌纱布包扎伤口，动物置于单笼饲养。术后48h，照射组大鼠背部创口以直线加速器6MeV电子线照射，分组300cGy组（300cGy／（次&;#183;d），连续照射5次）、400cGy组（400cGy／（次&;#183;d），连续照射5次）和500cGy组（500cGy／（次&;#183;d），隔日1次，连续照射3次），照射剂量率为240cGy／min。观察创面愈合及渗出情况。对照组分别于致伤后2，5，7，10，14，21d麻醉后取材，照射组均在伤后7，10，14，17，21，28d取材。常规苏木精-伊红染色病理组织学观察、天狼猩红染色后偏光镜观察胶原纤维含量变化、免疫组化方法和图象分析定性和定量检测各组伤口愈合过程中胶原纤维和血小板源性生长因子及其受体表达的动态变化。结果：实验大鼠36只均进入结果分析。①照射组创面愈合延迟，对照组创面平均11d全部愈合，照射组平均14d愈合。②照射组肉芽组织产生和胶原纤维的合成受抑制，300cGy照射组较其他各组胶原纤维细小，排列稀疏。28d图像分析胶原积分吸光度300cGy组、400cGy组、500cGy组分别为（0．323&;#177;0．015，0．349&;#177;0．012，0．457&;#177;0．019），组间比较差异有显著性（P〈0．05）。③照射组血小板源性生长因子-A及受体表达伤后10-14d达到高峰，对照组7-10d达到高峰。各时间点300cGy组与400cGy组差异不明显（P〉0．05），500cGy组高峰出现最晚，后期较其他组显著升高（P〈0.05）。结论：直线加速器照射抑制血小板源性生长因子及其受体表达，并与胶原形成的效果与照射剂量有关，应用低剂量分次照射防治瘢痕增生是很好的选择。     

以牛胶原凝胶为支架构建人工真皮的研究

目的：制备成纤维细胞胶原凝胶(即真皮替代物)，以研究细胞的生长、分化、增生及与真表皮问的相互作用，为研制大面积创面覆盖物——复合皮奠定基础。方法：①酶消化法培养胎儿成纤维细胞；②制备细胞胶原凝胶，分为Ca—gel和Cf-gel组，接种后于不同时间观察两组细胞的形态变化和胶原凝胶的收缩情况；③细胞计数；④SEM观测胶原凝胶的表面是否有成纤维细胞附着；⑤HE染色。结果：①成纤维细胞形态及增殖情况：成纤维细胞胶原凝胶形成后呈半透明状，可出现较明显的细胞增殖，并可见凝胶收缩现象，但Ca-gel组较小；人工真皮质地与颜色近似真皮组织，有一定的弹性和抗拉性，不易脆。②细胞计数法所得两组生长曲线基本相似。Ca-gel和Cf-gel组细胞均具有典型的细胞增殖现象，Cf-gel组细胞在后期的增殖略快于Ca-gel组。③扫描显微镜下可见到凝胶表面有梭形的成纤维细胞出现，且成纤维细胞紧密贴附于凝胶上。④HE染色可见胶原呈较均一的淡红色网状分布，成纤维细胞分布于胶原凝胶内部和表面。结论：①培养好的细胞凝胶称之为真皮替代物，是进行皮肤器官型培养和制作复合皮的关键与基础，并可与培养的人工表皮膜片混合移植，起到促进表皮细胞的生长黏附和加速创面愈合的作用。②成纤维细胞在胶原凝胶中有着活跃的生物学特性，因此在研究成纤维细胞在创面愈合中的生物学行为以及在皮肤组织工程学的研究中，以胶原凝胶为支架的三维培养系统较脱细胞基质系统更为科学。     

壳聚糖无纺布敷料对切割伤口止血和促进愈合作用的研究

制备家兔切割伤模型，分别以壳聚糖敷料和纱布包扎创面，血止后以氰化高铁血红蛋白试剂及光度比色法检测敷料中血红蛋白的含量。借此估计出血量、重新包扎创面、并于分阶段取材后常规病理学手段结合图像分析法观察病变。结果表明：壳聚糖包扎组出血量明显少于纱布对照组。伤后９天，壳聚糖治疗组创面肉芽组织层较厚于油纱布对照组，其中胶原纤维含量较多，伤口愈合较快，提示：壳聚糖无纺布对切割伤有止血作用并有微弱的促进愈合使用     

大鼠放射性皮肤溃疡组织中p53和mdm2蛋白高表达病理研究

放射性皮肤溃疡多见于临床放疗引起的并发症,其特点为顽固性反复发作、长期不愈,最后可能发展为癌变[1]。放射性皮肤溃疡的基因病理学改变目前尚不清楚,国内外尚少见其相关癌基因改变的病理学研究报道。ｍｄｍ2(ｍｕｒｉｎｅｄｏｕｂｌｅｍｉｎｕｔｅ2)基因定位于人染色体12ｑ1314,其产物ｍｄｍ2蛋白有结合并抑制野生型ｐ53蛋白功能的作用[2]。为了解ｐ53和ｍｄｍ2在放射性皮肤损伤中的改变及其意义,我们制备了放射性皮肤溃疡动物模型,并检测其基因表达状况。[收稿日期]　1999-01-15[基金项目]　国家自然科学基金面上项目(39470229)和总后勤…     

碱性成纤维细胞生长因子和内皮素在自发性高血压大鼠肾损害中的作用

为了解自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）肾损害的程度，通过检测ＳＨＲ血浆、肾组织中内皮素（ＥＴ）和水平，碱性成纤维细胞６生长因子的表达，初步探讨ＳＨＲ肾损害的机制。将１６个月龄ＳＨＲ作为实验组，同龄ＷＫＹ大鼠作为对照组；检测ＣＣｒ、ＵＡＥ；采用放免疫射分析法大鼠血浆、肾组织中ＥＴ的水平；肾组织切片采用ＨＥ染色，ＰＡＳ染色用免疫组化检测Ⅰ、Ⅳ型胶原和ｂＦＧＦ蛋白的表达用原位杂交方法检测肾组织中ｂＦＧＦｍＲＮ     

不同剂量照射对大鼠伤口愈合影响规律的分子病理学研究

不同剂量照射对大鼠伤口愈合影响规律的分子病理学研究谷庆阳王德文崔彩彬高亚兵崔雪梅熊呈琦夏国伟宋良文在辐射对伤口愈合影响的研究中，尚没有明确的剂量－效应关系可供我们参考［１］。本实验在大鼠放射复合伤口愈合模型的基础上，采用５～５５Ｇｙ共６个剂量对动物进...