高功率微波对兔眼晶状体上皮细胞P21WAF1及Cyclin E表达的影响

目的　观察高功率微波 (highpowermicrowave ,HPM)对实验动物兔眼晶状体上皮细胞P2 1WAF1 、CyclinE表达水平的影响 ,以探讨防护HPM眼损伤的机理及方法。方法　采用功率密度为 80 0mW cm2 的微波持续照射青紫兰兔眼组织 2 0min ,并于微波照射后 3 0d ,90d ,180d及 3 60d时应用免疫组化、原位杂交及图像分析技术对兔眼晶状体上皮细胞P2 1WAF1 、CyclinE蛋白及其mRNA表达水平进行检测。结果　HPM照射可影响晶状体上皮细胞的正常增殖过程 ;当HPM照射后 3 0d时 ,P2 1WAF1 表达明显升高 ,对细胞增殖周期抑制作用增强 ;CyclinE表达则明显降低 ,其正性调节细胞生长作用减弱 ;当HPM照射后 90 ,180及 3 60d时 ,微波照射组上述各指标与对照组比较 ,差异均无显著性意义 ,而且各项指标的mRNA表达均与其蛋白表达同步且一致。结论　HPM照射可干扰细胞正常的生长增殖周期进程 ,而晶状体上皮细胞增殖异常可能是导致白内障的重要原因之一。     

高场强电磁脉冲对兔眼的辐射损伤

目的　采用高场强电磁脉冲 (EMP)辐射青紫兰兔 ,长期动态观察角膜、晶状体及视网膜的病理变化 ,探讨EMP对视觉系统的影响。方法　 6× 10 4V/m场强的EMP重复照射 14只兔 5次和 30次 ,于照射后不同时间应用裂隙灯、检眼镜、光镜和电镜观察角膜、晶状体及视网膜的病理变化。结果　晶状体对EMP辐射损伤最为敏感 ,角膜次之 ,视网膜轻微。照射后 90～ 36 0天 ,晶状体囊膜增厚 ,上皮细胞发生不同程度的变性 ,晶状体后皮质水肿 ,空泡、液泡形成 ,白内障发生。随着照射次数的增加 ,其病理改变呈持续性发展。结论　高场强EMP可导致兔晶状体后皮质混浊、白内障发生 ,随着照射剂量的增加 ,其病理改变加重     

电磁脉冲对恒河猴眼损伤的研究

目的　通过观察受电磁脉冲 (EMP)照射恒河猴 ,探讨猴角膜、晶状体和视网膜的病理变化 ,研究EMP对视觉系统的影响。方法　场强为 6× 1 0 4V/m的EMP照射恒河猴 ,采用Feulgen、AgNOR、PI染色方法 ,以激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对眼辐射损伤进行检测。结果　EMP照射后 30天死亡猴晶状体上皮细胞的AgNOR和DNA含量下降 ,照射后 1 36、2 6 5和 36 5天 ,AgNOR和DNA含量升高。眼组织对EMP损伤敏感程度依次为 :晶状体 >角膜 >视网膜。晶状体后囊水肿 ,空泡和液泡形成 ,白内障发生。结论　高场强EMP可引起视觉系统的损伤 ,晶状体对EMP损伤最为敏感 ,可导致白内障的发生     

辐射诱导难愈性皮肤溃疡多种凋亡相关基因的表达

目的探讨放射性皮肤溃疡发生发展过程中细胞凋亡及多种凋亡相关蛋白表达的动态变化。方法采用Wistar大鼠进行局部照射建立急性放射性皮肤溃疡动物模型,观察病变40d,然后采用免疫组化方法检测皮肤溃疡组织中各基因蛋白的表达,并采用原位末端标记法检测细胞凋亡。结果照后14d开始出现皮肤溃疡,之后渐扩大、融合、加深。照后11～40dP53蛋白表达明显增强,主要定位于血管内皮细胞和小血管平滑肌中;照后14～21d为Bax蛋白表达高峰,定位于血管内皮细胞、部分成纤维细胞及新生表皮细胞中;照后11～35d上述细胞特别是血管内皮细胞凋亡率较正常伤口愈合早期增高。结论辐射诱导的多种凋亡相关蛋白表达的变化及由此引起的细胞凋亡率特别是血管内皮细胞凋亡率的增高与放射性皮肤溃疡发生、发展及难愈合的分子机制相关。     

MMP1，TIMP1在单纯及放射复合伤口愈合过程中的表达及对伤口愈合和组织改建的影响

目的：观察基质金属蛋白酶1（MMP1）、金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）在放射复合伤口愈合过程中表达的变化及对伤口愈合和组织改建的影响。方法：利用放射复合伤口动物模型,采用光镜、电镜、免疫组化及原位杂交等方法,动态观察伤口愈合有明显的损害作用,照射组织口较对照组伤口延迟6d愈合,在伤口愈合的炎症期和肉芽组织生长期,照射组新生表皮细胞中MMP1表达与对照组相近,在后期随着照射组伤口愈合的延迟其表达相对较高,在伤后3－14d,TIMP1在对照组新生表皮细胞中呈弱阳性,表皮覆盖皮呈阴性,而在照射组表皮覆盖前呈阴性或弱阳性。MMP1,TIMP1在照射组肉芽组织成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞中表达明显降低,在愈合后期因辐射所致伤口愈合的延迟同样表现为表达时相拖后,结论：MMP1,TIMP1在放射复合伤口肉芽组织中表达明显降低直接影响细胞纤维、血形成和基质改建等病理过程,是辐射影响伤口合的重要机制之一。     

蒙药创溃宁在软组织Ⅱ期创面再生生物技术修复中的作用研究

目的：观察蒙药创溃宁用于再生生物学技术进行皮肤感染创面缺损修复中的作用。方法：对10只兔全层头皮撕脱伤口动物模型采用暴露疗法,应用自体颅骨膜或帽状腱膜贴于颅骨面上,同时采用创溃宁液喷洒,观察其修复疗效。结果：10只兔均治愈,再生头皮均长出毛发。结论：创溃宁具有活血、化瘀、调整机体免疫功能、抗感染、诱导组织再生等多种作用,在应用再生生物学技术进行自体组织重建治疗中可修复头皮缺损区。     

加速器照射大鼠伤口愈合过程中血小板源性生长因子及其受体表达与胶原形成的关系

目的：探讨加速器照射后大鼠皮肤伤口愈合过程中血小板源性生长因子及其受体表达与胶原形成的规律。方法：实验于2002—05／2003—06在解放军军事医学科学院附属医院放疗科及解放军军事医学科学院放射医学研究所病理室完成。清洁级雄性Wistar大鼠36只，体质量（200&;#177;20）g，随机数字法分为4组，每组9只，1组作为空白对照组，3组作为照射组。在每只大鼠背部脊柱两侧切2个圆形创面，创面直径1．5cm，深达皮下组织全层，2个创面间隔1．5cm。处理完毕后以无菌纱布包扎伤口，动物置于单笼饲养。术后48h，照射组大鼠背部创口以直线加速器6MeV电子线照射，分组300cGy组（300cGy／（次&;#183;d），连续照射5次）、400cGy组（400cGy／（次&;#183;d），连续照射5次）和500cGy组（500cGy／（次&;#183;d），隔日1次，连续照射3次），照射剂量率为240cGy／min。观察创面愈合及渗出情况。对照组分别于致伤后2，5，7，10，14，21d麻醉后取材，照射组均在伤后7，10，14，17，21，28d取材。常规苏木精-伊红染色病理组织学观察、天狼猩红染色后偏光镜观察胶原纤维含量变化、免疫组化方法和图象分析定性和定量检测各组伤口愈合过程中胶原纤维和血小板源性生长因子及其受体表达的动态变化。结果：实验大鼠36只均进入结果分析。①照射组创面愈合延迟，对照组创面平均11d全部愈合，照射组平均14d愈合。②照射组肉芽组织产生和胶原纤维的合成受抑制，300cGy照射组较其他各组胶原纤维细小，排列稀疏。28d图像分析胶原积分吸光度300cGy组、400cGy组、500cGy组分别为（0．323&;#177;0．015，0．349&;#177;0．012，0．457&;#177;0．019），组间比较差异有显著性（P〈0．05）。③照射组血小板源性生长因子-A及受体表达伤后10-14d达到高峰，对照组7-10d达到高峰。各时间点300cGy组与400cGy组差异不明显（P〉0．05），500cGy组高峰出现最晚，后期较其他组显著升高（P〈0.05）。结论：直线加速器照射抑制血小板源性生长因子及其受体表达，并与胶原形成的效果与照射剂量有关，应用低剂量分次照射防治瘢痕增生是很好的选择。     

MAPK信号转导途径参与bFGF抑制辐射诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的作用

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用及其信号转导途径。方法　以6 0 Coγ射线照射建立原代分离培养的人脐带静脉内皮细胞凋亡模型 ,以流式细胞术 (Annexin V FITC +PI标记 )评价细胞凋亡率。观察不同浓度的bFGF和MEK的抑制剂U0 12 6对细胞凋亡的影响。结果　bFGF对辐射诱导的脐静脉内皮细胞凋亡有明显的抑制作用 ,细胞凋亡率可从 (35 2 2± 5 5 ) %降至 (11 6 7± 3 8) % ,而U0 12 6可部分阻断bFGF的抗凋亡作用 ,细胞凋亡率由 (10 5 9± 1 6 ) %升至 (17 96± 1 4 ) %。结论　bFGF可能通过MAPK信号转导途径抑制辐射诱导的脐静脉内皮细胞凋亡。     

高功率微波辐照对心肌细胞和心脏间质细胞生存能力和细胞活力影响的研究

目的：研究HPM对心肌细胞和心脏间质细胞生存能力和细胞活力的影响。方法：HPM辐照体外培养乳鼠心肌细胞和心脏间质细胞，用流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死；用MTT实验测定细胞活力。结果：HPM可以对心肌细胞和间质细胞的功能和形态产生明显影响，引起二者的凋亡和坏死。结论：心脏可能是HPM损伤的易感器官之一，并提示在探讨HPM对心脏的损伤时，应同时关注对心脏间质细胞的研究。     

急性放射性皮肤溃疡愈合过程中TGFβ及其受体表达的研究

局部大剂量射线照射可引起急性放射性皮肤溃疡 ,目前此类溃疡发生发展的分子机理尚不清楚。本实验以6 0 Ｃｏγ射线单次局部照射大鼠后肢为实验模型 ,观察急性放射性皮肤溃疡发生发展过程中ＴＧＦβ1 、ＴＧＦβ3、ＴＧＦβＲ1 的表达情况 ,探讨急性放射性皮肤溃疡的难愈机理。一、材料和方法1 材料 :二级Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠 4 3只 (军事医学科学院动物中心提供 ) ,正常对照 3只 ,余为照射动物 ,照射前麻醉、固定 ,6 0 Ｃｏγ射线单次照射大鼠双大腿、臀部、全尾 ,吸收剂量5 0Ｇｙ ,照射时间 15ｍｉｎ 30 5ｓ,吸收剂量率 0 32 8Ｇｙ·ｍ…