胆囊癌及炎性组织细胞膜中蛋白质和脂质变化的FTIR研究

目的:研究胆囊癌及炎性组织细胞膜上生物大分子蛋白质及脂质的红外光谱改变.方法:应用傅里叶变换红外光谱技术(Fourier transformed infare spectroscopy,FTIR)对胆囊癌和炎性组织的细胞膜进行检测,并分析其蛋白质和脂质的红外变化.结果:胆囊癌和炎性组织细胞膜上生物大分子蛋白质和脂质的红外光谱存在明显差异:癌组织中酰胺Ⅱ带较弱、峰型低平,酰胺Ⅰ带较强、峰型宽大,相对吸收强度I1650/I1550明显升高;癌组织中与脂质相关的吸收谱带出现概率高、且峰型高尖,相对吸收强度I2957/I1650和I1740/I1400的比值增加;相对吸收强度I1460/I1400的比值在正常组织细胞膜中较高.结论:胆囊炎性与癌组织细胞膜上大分子红外光谱存在不同,通过FTIR能对细胞癌变早期生物大分子改变做出客观反映.     

钙拮抗剂尼卡地平的HPLC法分析及其在兔体内药代动力学研究

目的 :建立兔血浆中钙拮抗剂尼卡地平的反相高效液相色谱分析方法 ,并对其在兔体内的药代动力学进行研究。方法 :血浆样品在弱碱性条件下经环己烷 -异丙醇 (96∶4)提取 ,用LiChrosorbC18反相柱 ,甲醇 -水(75∶2 5 )为流动相 ,流速 1 0mL·min-1,检测波长 2 36nm等条件下 ,分析测定。结果 :方法平均回收率为98 2 7%～ 10 0 4% ,RSD <5 0 % ,线性范围 :11～ 110ng (r =0 9981) ,最低检测限为 10ng。 结论 :本法操作简便、准确灵敏、重现性好 ,可用于尼卡地平的药动学研究。     

基于重量、残留量及含量监测技术的PIVAS输液质量监测模式构建

目的 建立一种可靠、简便、快速的静脉用药调配中心(pharmacy intravenous admixture service, PIVAS)输液配制质量监测模式，保障患者输液用药安全与有效。方法 将重量、残留量与定量分析等技术手段导入PIVAS输液配制过程，以溶液型注射剂药物盐酸倍他司汀、多索茶碱与粉针剂药物头孢他啶的输液为研究对象，考察输液重量、残留量同药物相对百分含量之间的关系。结果 粉针剂药物头孢他啶在调配过程中，重量监测前后其输液相对百分含量合格率分别为76.0%与84.8%,输液重量增加量与药物含量之间无明显相关性(r²=0.002),重量监测前后药液残留体积与药物残留质量线性相关系数r²分别为0.378与0.693;溶液型药物在调配过程中输液相对百分含量合格率为97.3%,输液重量增加量与盐酸倍他司汀、多索茶碱药物含量之间相关系数r²分别为0.724与0.588。结论 重量监测与残留量监测技术可以作为PIVAS输液配制质量监测的日常指标，但含量监测技术才是输液配制正确性与准确性的金标准，将重量监测、残留量与...     

联合应用二维液相色谱及串联质谱技术筛选牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白抗原的初步研究

目的 联合应用二维液相色谱(two-dimensional liquid phase fractionation,PF2D)及基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS)技术,筛选多种牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)共同外膜蛋白(outer membrane protein,OMP),为针对多种Pg设计具有交叉保护作用的疫苗提供候选靶抗原.方法 超高速离心法提取Pg301、PgATCC33277和PgW83菌株OMP,应用PF2D目标蛋白快速分离系统分离OMP,对比分析得到共同OMP,用MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱结合数据库搜索,确定蛋白质一级结构.结果 第一维色谱聚焦分离,3株Pg共获得99个蛋白质样本;选定OMP组分B7,进行第二维反相色谱分离,3株Pg共确定了8个共同的蛋白色谱峰,运用MALDI-TOF/TOF-MS对蛋白样品进行鉴定,结果 确定了其中一个为已知的蛋白精氨酸-牙龈素A.结论 PF2D分离系统分辨率高、重现性好,结合MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱技术,可用于鉴定Pg的共同OMP.     

同一组织不同层面的红外对比分析

目的：探讨同一生物组织在组织、细胞和细胞膜不同层面的傅立叶变换红外光谱（FTIR）谱图变化规律．方法：将提取肿瘤组织和瘤旁正常组织的细胞膜及提取细胞膜后剩余成份（沉淀物）,于100kg／cm^2下8min制成溴化钾压片行FFIR检测,指认其特征光谱并将细胞膜、沉淀物、细胞株及组织的FFIR谱图进行对比分析．结果：细胞膜与沉淀物的FFIR谱图相比,蛋白和脂类的吸收峰发生显著变化,核酸的吸收峰在细胞膜消失而在沉淀物中增强;细胞膜的FTIR谱图与组织、细胞株相比,细胞膜的蛋白质二级结构发生了明显改变,脂类吸收峰增强;沉淀物的FrIR谱图与组织、细胞株相比,蛋白二级结构发生了明显改变,脂类吸收峰增强,但与组织谱图一致;癌组织中细胞膜、沉淀物及组织水平的相对强度I1460／I1400均小于正常组织．结论：同一组织不同层面的FTIR谱图变化不全一致;肿瘤组织中脂类含量减少,但细胞膜上的脂类含量增加,肿瘤组织及肿瘤组织细胞膜的蛋白质二级结构发生了明显改变;1460cm^-1和1400cm^-1可作为FrIR用于肿瘤诊断的一个可靠指标．     

细胞膜色谱法应用于中药质量控制的思考

通常的中药质量控制方法存在检测指标单一,质控指标与药效作用相关性不强等问题,一般很难全面有效地控制中药质量。本文简述了细胞膜色谱法的特点与应用,并结合本实验室的研究基础,就细胞膜色谱法应用于中药质量控制的问题,谈一点体会。     

Gefitinib在肺癌细胞细胞膜色谱保留性的初步研究

目的:探讨细胞膜色谱法应用于吉非替尼在肺癌细胞细胞膜上保留性.方法:应用人肺腺癌细胞A549制备肺癌细胞膜固定相,低压湿法装入色谱柱(10mm×2mm,ID)中,在37℃条件下,以5mmol/L磷酸钾缓冲液(pH7.4)为流动相,流速为0.2ml/min,在253nm检测波长下应用高效液相色谱检测吉非替尼在肺癌细胞膜的保留特性.结果:吉非替尼在肺癌细胞膜上有保留.结论:吉非替尼在肺癌细胞膜色谱柱中有保留,可进一步进行研究.     

HPLC法测定和血明目片中黄芩苷的含量

目的建立和血明目片中黄芩苷的HPLC含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法。C18色谱柱;流动相为甲醇-磷酸-水溶液(47∶0.2∶53);检测波长为280nm;流速为1.0mL·min-1;柱温30℃;峰面积外标法定量。结果黄芩苷在0.026 2⁰.393 6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率96.3%,RSD为1.6%(n=6)。结论该方法简便,结果准确可靠,可作为该制剂的质量控制方法。     

小儿止咳口服液质量标准研究

目的 :建立小儿止咳口服液的质量标准。方法 :采用薄层色谱 (TLC)法对处方中的麻黄、陈皮、甘草等进行定性鉴别 ;用高效液相色谱法测定绿原酸的含量 ,流动相为甲醇 -水 (10∶90) ,流速为1 0ml/min ,检测波长为254nm。结果 :在TLC色谱中均能鉴别出麻黄、陈皮、甘草 ;绿原酸进样量在0 2μg～1 2μg范围线性关系良好 (r=0 9996) ,平均回收率为96 67 %,RSD=1 04 %。结论 :本方法可准确、快速地对小儿止咳口服液进行定性、定量检测 ,可用于该制剂的质量控制。     

用HPLC—荧光检测法研究维拉帕米在大鼠体内的药代动力学和组织分布特性

目的:建立维拉帕米的反相高效液相色谱分析方法,并对其大鼠体内过程特性进行分析研究。方法:生物样品在碱性条件下经过正己烷-乙醚(30:70)提取,用Kromasil C_(18)反相柱(150mm×4.6mm,5μm),甲醇-水-三乙胺(70:30:0.1)为流动相,流速1.0mL·min~(-1),荧光检测波长为λ_(ex)275nm和λ_(em)315nm。结果:方法回收率为92.3%～104.8%,测定血药浓度线性范围为8.5～85ng·mL~(-1)(r=0.9992),最低检测限0.6ng·mL~(-1)。SD大鼠一次性灌胃盐酸维拉帕米片后血浆C-t曲线呈二室开放模型,达峰时间为(0.28±0.1)h。给药1.25h时,在主要的效应器官的浓度分布特点是:C_心>C_(大脑)>C_(小脑),在主要消除器官的浓度分布特点是:C_肝>C_肾>C_脾。结论:本法准确,灵敏度较高,可用于维拉帕米的体内过程研究。维拉帕米的肝首过效应应引起重视,主要由肾脏排泄。