莪术醇对肝窦内皮细胞MAPK信号通路作用的实验研究

目的研究莪术醇对肝窦内皮细胞MAPK信号通路的作用,以此来分析莪术醇抗肝纤维化的作用机制。方法用MTT法检测各种药物干预对细胞增殖率的影响,用免疫印迹和RT-PCR检测MAPK信号通路上关键分子pMAPK、ERK和JNK的表达和含量。结果RT-PCR检测发现莪术醇干预组pMAPK、ERK和JNK表达较阳性对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);WB检测发现莪术醇干预组MAPK信号通路磷酸化p38MAPK、ERK和JNK的表达较阳性对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论莪术醇抑制MAPK信号通路的活动,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

以生理学精品课程建设为契机的教学探索与实践

精品课程建设是专业建设和学科建设的基础及中心环节,是提高教学质量的重要途径,是学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分。精品课程建设是加强和促进高等学校教学质量的重要举措,其内涵是建设一流的师资队伍、一流的教学内容、一流的教学方法、一流的教材与一流的教学管理等。     

肝纤维化肝窦内皮细胞免疫功能改变的研究进展

正常肝脏是免疫耐受大于免疫原性的器官,肝窦内皮细胞(HSEC)在参与正常肝脏免疫耐受方面的研究是热点。在肝脏疾病中,很少有关HSEC免疫方面的研究。肝纤维化过程中,HSEC结构和功能的改变,可能造成其免疫功能的转变(免疫耐受转化为免疫应答),但HSEC免疫功能的转变,也可能影响肝纤维化的进程,研究纤维化肝脏肝窦内皮细胞(FH-SEC)免疫功能,对应用免疫手段治疗肝纤维化有重要意义。     

桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、凋亡影响的研究

目的:观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(ANNEXIN V-PE/7-AAD双染色法)检测细胞凋亡各阶段的情况。结果:低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48h的IC50为45μmol/L;均可诱导细胞发生早期及晚期凋亡,48h的总凋亡细胞百分比分别为20.7%、29.8%、34.4%。结论:桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。     

白花丹醌对瘦素刺激的人肝星状细胞周期及其相关蛋白表达的影响

目的 研究白花丹醌对瘦素刺激的体外培养人肝星状细胞（HSC-LX2）细胞周期及周期相关蛋白表达的影响,探讨白花丹醌抗肝纤维化的作用机制。方法 ELISA法检测HSC-LX2细胞培养上清液中自分泌瘦素水平。将HSC-LX2细胞分成对照组,瘦素组,白花丹醌2、8 μmol/L组,秋水仙碱6.25 μg/mL阳性对照组。除对照组外,其余各组细胞用瘦素100 μg/mL刺激24 h、再与药物共同培养24 h后,流式细胞仪检测HSC-LX2细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1、p21的表达。结果 HSC-LX2细胞自分泌瘦素的浓度先随着培养时间的延长而递减,24 h达到低谷值,48 h后又升至6 h水平,每个时间点分泌的瘦素量无显著差异（P＞0.05）。与对照组相比,瘦素组HSC-LX2细胞增殖能力显著增强,S期和G₂/M期细胞比例显著增加;而白花丹醌2、8 μmol/L干预后,HSC-LX2细胞G₀/G₁期细胞的比例明显提高,而S期和G₂/M期细胞比例明显降低,且呈明显的浓度相关性。与对照组比较,瘦素组HSC-LX2细胞经瘦素刺激后细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin E1的量显著增加,p21蛋白的表达受到抑制;白花丹醌2、8 μmol/L和秋水仙碱明显降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增强p21蛋白表达。结论 白花丹醌可明显抑制瘦素诱导的HSC-LX2细胞增殖,该作用主要是通过抑制细胞由G₀/G₁期向S期转变而产生的,作用机制可能与其降低cyclin Dl、cyclin E1蛋白水平,增加p21蛋白表达相关。     

白花丹醌对人肝星状细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激体外培养人肝星状细胞株HSC-LX2凋亡及相关蛋白表达的影响,以探讨其抗肝纤维化作用的机制.方法:体外培养HSC-LX2,将其分为以下几组:空白对照组、Leptin对照组、秋水仙碱组、2、8、16μmol/L白花丹醌组.瘦素刺激24h,药物与细胞共孵育24h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测细胞凋亡,透射电镜观察HSC-LX2凋亡形态学变化,免疫组织化学法检测HSC-LX2凋亡基因p53、Bax、Bcl-2的蛋白表达.结果:细胞流式术结果显示,白花丹醌作用HSC-LX224h,HSC凋亡率明显增加,白花丹醌8、16μmol/L组和秋水仙碱组HSC凋亡率均显著高于空白对照组和Leptin对照组(5.21±0.41,8.10±0.63,10.1±1.08vs1.40±0.13,2.85±0.21,均P<0.01).透射电镜结果,空白对照组细胞形态清晰,细胞膜、核膜完整,胞质内细胞器清晰,染色质均匀,细胞表面微绒毛;药物组可见少量坏死细胞和许多不同程度的凋亡细胞,体积变小,核膜消失,胞质浓缩,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,可见核碎裂,细胞表面微绒毛...     

白花丹提取物对肝纤维化大鼠的实验性研究

目的:观察白花丹提取物对大鼠肝纤维化的血清学以及病理形态学的影响。方法:四氯化碳油剂皮下注射诱发大鼠肝纤维化病变,第3周起以白花丹提取物进行干预。第8周处死,取血清测定肝功能及肝纤四项指标的含量变化;取肝脏标本进行病理形态学观察,并免疫组化检测Ⅰ型胶原蛋白及α-SMA蛋白的表达。结果:光镜下组织学检查纤维化程度显示,血清检测结果显示,白花丹治疗组大鼠的肝功能状况好转,肝纤四项指标明显降低;病理学观察结果显示纤维化程度降低;免疫组化检测结果Ⅰ型胶原蛋白及α-SMA蛋白表达降低。以上结果均有统计学差异(P<0.05)。且白花丹治疗组的以上结果与秋水仙碱组相比,均有统计学差异(P<0.05)。结论:白花丹提取物有逆转实验性大鼠肝纤维化病变并保护其肝功能的作用,且白花丹提取物的以上作用优于秋水仙碱。     

图表格式在多媒体教学中的应用及意义

该主要讨论在多媒体生理教学中概貌图、循环图、示意图、网络图、树状图、模式图、坐标图及归类表、比较表、统计表、分类表的应用及对教学达标的意义，用生理教学的实际事例举例说明图表在多媒体课件制作中的应用并两要介绍应用计算机绘制生理教学图表的几种方法，说明图表格式在多媒体生理教学中对学生记忆和能力的影响，探讨如何利用图表的直观、简明、新颖，提高教学质量的方法。     

多点量化评价机制在学科学分评定中的应用价值

目的:运用多点量化评价机制考查生理学总评成绩。方法:设立的对照组为有段考和期考的传统考试模式以及取消段考的考试模式,运用多点量化机制评价新考核模式。结果:经统计分析显示新考核模式的平时成绩、期考成绩与总评成绩的相关性最好。结论:多点量化评价机制的考核模式比较能够真实地反映学生学习的状况。