HPLC-MS/MS测定人血浆中羧甲司坦的浓度及其生物等效性研究

目的 建立HPLC-MS/MS方法测定人血浆中的羧甲司坦体内浓度,用于人体生物等效性分析.方法 以直接沉淀法处理血浆,色谱柱为XTerra MS C18柱(150 mm×2.1mm,5μm);流动相为甲醇-20 mmol,L-1甲酸铵(含0.5％甲酸)(75∶25,v/v);流速为0.3 mL· min-1;柱温为40℃.采用电喷雾离子源(ESI)负离子模式,用多反应监测模式(MRM)进行定量分析.结果 羧甲司坦线性范围为0.210 9～54 μg,mL-1,定量下限为0.210 9 μg·mL-1,绝对回收率＞80％,日内和日间RSD均＜15％.结论 此方法能够简便、高效、快速和灵敏的检测健康志愿者血浆中的羧甲司坦,可用于羧甲司坦药物代谢动力学及生物等效性研究.     

Maxadilan对诱导多能干细胞增殖的作用

目的: 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)的PAC1受体特异激动剂maxadilan对人诱导多能干细胞(IPSCs)增殖的作用。方法: 培养人IPSCs,利用RT-PCR和Western blotting检测IPSCs的PAC1受体;IPSCs培养基中加入不同浓度的maxadilan作为实验组,未加入maxadilan作为对照组。CCK-8法检测maxadilan对IPSCs增殖的影响;流式细胞仪分析maxadilan对细胞周期的影响;染色体核型分析检测maxadilan对IPSCs核型的影响;real-time-qPCR和免疫荧光法从基因及蛋白水平检测maxadilan对IPSCs的多能性基因 Nanog和OCT4 的影响;real-time qPCR检测maxadilan对IPSCs及其形成胚体细胞的 Nestin和PAX6 基因的影响;RT-PCR检测maxadilan对IPSCs分化为三胚层能力的影响。结果: RT-PCR和Western blotting均显示IPSCs含有PAC1受体;CCK-8法显示100 nmol/L maxadilan组比对照组细胞增多16% (P＜0.05);流式细胞仪分析显示孵育100 nmol/L maxadilan 3 h、6 h和9 h后IPSCs增殖指数为47.23%、59.70%、55.67%,与对照组37.00%相比,差异显著(P＜0.05);染色体核型分析显示maxadilan处理过的IPSCs核型正常;RT-PCR、real-time qPCR和免疫荧光法显示maxadilan未影响IPSCs多能性。结论: 人IPSCs存在PAC1受体,maxadilan对人IPSCs具有促进细胞增殖作用且没有影响IPSCs的多能性和染色体核型。     

动脉留置导管并发症的护理进展

综述了动脉留置导管主要并发症（导管堵塞、导管脱落、血管痉挛、感染、局部出血、血肿或假性动脉瘤形成）的发生原因、预防和护理措施,以指导临床护理人员重视对动脉导管并发症的预防和护理,采取有效措施,降低其发生率,达到提高患者救治效果和生活质量的目的。     

中医院校开设病理学综合性实验的几点思考

从中医院校病理学综合性实验改革的思路和内容两方面作了几点思考,认为病理学综合性实验决非几个学科的拼凑,要真正体现出知识的内在联系,可采用在传统方法（即观察大体标本及病理组织切片）的基础上增设素质教育内容的方式来开展,改革内容包括突出重点,不能简单重复：重视读片思维方式的培养;开设以问题为中心,以病例为基础的讨论小组学习;建立多媒体数码互动实验室。     

基于非均匀有理B样条的女性盆腔三维数字化模型的构建

目的 建立基于中国数字化可视人体的非均匀有理B样条(Non-Uniform Rational B.Spline,NURBS)三维盆腔模型.方法 选取中国可视化人体数据集的盆腔部分,应用Photoshop分割出各盆腔结构后并获取各结构的轮廓线,基于盆腔结构的表面轮廓线应用Isosurf软件生成三角化表面网格,然后将其输入犀牛(Rhinoceros)软件,进行控制参数设定与NURBS曲面重建.结果 对盆腔中膀胱、直肠、子宫、卵巢、血管、阴道、输尿管、股骨、尿道等主要结构进行了分割,并构建了NURBS女性盆腔三维数字化模型,所建立的模型几何外型逼真,整体清晰,实体感强.结论 本研究实现了对女性盆腔主要结构的NURBS曲面建模,所获取的数字化模型可为解剖教学、手术仿真以及运动医学等提供科研教学平台.     

高效液相色谱串联质谱联用法测定培养基中丝裂霉素C残留量

目的 建立液相色谱-电喷雾串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定培养基中丝裂霉素C残留量的方法.方法 培养基样品经乙腈直接沉淀蛋白后,采用Thenno Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm)分离,流速为0.2 ml/min,以乙腈:0.1%甲酸=40:60为流动相等度洗脱.通过电喷雾离子源进入质谱,以二级质谱多反应监测(MRM)方式进行检测.结果 丝裂霉素的线性范围分别为0.098～50 ng/ml,最低检测浓度为0.098 ng/ml,平均相对回收率在91.30%～105.46%范围内,日内和日间精密度<15%.结论 本法简单、快速、灵敏、重现性好,可用于丝裂霉素C的培基中残余量的测定和监控.     

预防直肠癌低位吻合口瘘的临床探讨

摘要 目的 在Dixon手术中采用肠腔封闭式加压灌注检测,肠腔放置支架引流管对吻合口瘘的预防作用。方法 ① 本组低位直肠癌患者经腹腔完成直肠癌直肠前切除吻合后,用肠钳在吻合口上端5 cm处钳夹肠管,再经肛门插入1条（22~24号）Foley尿管,向尿管球囊注水使球囊膨胀封闭肛门,使吻合肠段处于相对封闭情况下,经尿管注入亚甲蓝稀释液,观察吻合口是否有亚甲蓝液漏出。如发现漏出即行缝合修补,直至无漏出为止。② 由肛门经吻合口放置32F硅胶胸腔引流管1条,至吻合口上方20 cm处肠腔起支架及引流作用。结果 该组术中经此法检测仅有2例吻合口瘘,即行修补,术后未发生吻合口瘘。结论 术中肠腔封闭式加压灌注检测及术后肠腔内置大口径支架引流管对直肠癌低位Dixon术后吻合口瘘具有较好的预防作用。     

应用甲基丙烯酸甲酯包埋不脱钙骨组织方法的探讨

[目的]本研究通过改进既往标本制作方法,探讨应用不同浓度聚甲基丙烯酸甲酯对骨组织包埋效果的影响,寻找不脱钙骨组织标本包埋制作的理想方法.[方法]骨组织标本取材后,用10%中性福尔马林固定24 h,梯度酒精脱水、二甲苯透明,转入含有15 g/L过氧化苯甲酰的甲基丙烯酸甲酯(UMMA)中,每24h换液1次.从转入UMMA渗透液开始,每天抽滤30 min,以排除组织中的气体. MMA聚合过程分为3个实验组,分别以30 g/L、35 g/L、40 g/L三种筛选浓度加入过氧化苯甲酰,密切观察样本聚合情况.[结果]3种浓度及凝结时间观察比较,加速剂浓度为35 g/L的标本,在室温25℃左右,约7 d时间开始凝结,并逐渐变硬,组织与包埋剂的硬度均匀,效果理想,制作的切片直接在荧光显微镜下观察,可见两种清晰的矿化标记;加速剂浓度为40 g/L的标本,约3～4 d开始凝结,但出现大量气泡影响观察及制片,效果欠佳;加速剂浓度为30 g/L的标本,观察30 d仍未见凝结.[结论]过氧化苯甲酰浓度为35 g/L的包埋剂对不脱钙骨组织包埋效果最为理想,应用本研究方法能为骨科基础研究领域相关研究提供有效的硬组织制作技术平台.     

2007年秋冬季北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒229E感染状况分析

目的 了解北京地区成人发热就诊患者中人冠状病毒HCoV-229E感染病原学、临床表现和流行病学特点.方法 2007年10月至12月从北京地区发热且有呼吸道症状的就诊成人中采集158份鼻咽拭子标本,利用荧光定量RT-PCR法进行HCoV-229E筛查;利用常规PCR方法扩增HCoV-229E基因片段测序;对感染阳性患者进行HCoV-NL63、HCoV-HKU1及HMPV的共感染筛查、临床表现描述和流行病学特点分析.结果 158份鼻咽拭子标本中荧光定量RT-PCR检测出103(65.2%)例HCoV-229E阳性;其中26例存在与HCoV-NL63(3例)、HCoV-HKU1(3例)及HMPV(20例)的混合感染;HCoV-229E阳性标本的临床表现以头痛(70.9%)、咽红(70.9%)、咽痛(69%)、寒颤(68%)、咳嗽(33%)、有痰(21.3%)、流涕(21.4%)和鼻塞(16.5%)为主,少量可见呕吐(6.8%)、呼吸困难(3.9%)和腹泻(1.9%);统计学分析表明其感染与性别、年龄无关.结论 人冠状病毒HCoV-229E感染在秋冬季成人发热就诊患者中为常见病原,可合并感染其他病毒.其临床表现呈上呼吸道感染特征.2007年秋冬季在北京地区成人中可能存在HCoV-229E局部流行.     

基于三维模型的断层图像结构定位的初步研究

目的:研究利用初步建立的三维模型确定二维断层图像感兴趣结构像素坐标的方法.方法:通过Photoshop图像处理软件绘制断面图像,使用可视化工具包VTK的移动立方体表面重建算法,在VC++6.0的编译环境下对其进行三维重建以及立体显示.用自行开发的坐标转换处理程序对三维模型上提取的坐标值进行处理,计算断层图像相应结构的像素坐标.结果:建立了一个表面带有S型凹槽的三维模型,通过计算三维模型上凹槽结构的一系列坐标,得到二维断层图像上相应结构的像素坐标点.结论:本研究以VTK重建的三维模型为基础,提出了一种利用已建成的三维模型来指导二维断层图像结构定位的方法,为人体复杂结构的分割与修正以及某些在二维断层图像上无法识别的结构的定位提供了一种新的手段.