人巨细胞病毒UL144基因克隆表达及其对树突状细胞功能的影响

目的:构建携带人巨细胞病毒(hCMV) UL144基因的重组腺病毒,研究UL144基因修饰的树突状细胞(dendritic cell,DC)的功能变化。方法:从hCMV-DNA阳性患者外周血提取cDNA,采用PCR技术扩增出UL144基因。采用AdEasy系统构建携带hCMV UL144基因的重组腺病毒载体pAd-UL144,转染HEK293细胞后包装产生重组腺病毒Ad-UL144。通过RT-PCR检测目的基因的表达。将此重组腺病毒转染小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术检测DC表面分子,采用ELISA技术分析DC培养上清中的细胞因子,采用3H-TdR掺入法检测UL144基因修饰的DC激活T细胞增殖的能力。结果:成功将UL144基因片段克隆至载体上,并经HEK293细胞包装出病毒颗粒,经测定病毒滴度为3×1010 pfu/ml。流式细胞术检测显示,UL144基因修饰的DC表面分子CD80、CD86和I-Ad表达水平低于对照组(P<0.01)。ELISA分析表明,UL144基因修饰的DC分泌TNF-α、IL-6和IL-1β的能力减弱(P<0.05)。UL144基因修饰的DC介导的T细胞增殖功能明显低于DC对照组(P<0.01)。结论:UL144基因修饰的DC具有维持相对未成熟状态的能力,并减弱了对抗原特异性T效应细胞的刺激功能。     

鼻内窥镜下传统性和功能性下鼻甲部分切除术

目的探讨鼻内窥镜下传统性下鼻甲部分切除术和功能性下鼻甲部分切除术临床疗效对比。方法对1999--2006年间我科施行并有完整临床资料的鼻内窥镜下85例传统性下鼻甲部分切除术及72例功能性下鼻甲部分切除术患者进行回顾性总结。结果两组患者手术总体疗效均满意,但在手术时间、术中术后出血、结痂、术后康复等方面有一定的差异。结论鼻内窥镜下传统性下鼻甲部分切除术和功能性下鼻甲部分切除术是治疗慢性肥厚性鼻炎行之有效的手术方法。     

急性髓系白血病患者外周血粒细胞、单核细胞膜GPI锚链和红细胞表面CD59表达水平的研究

目的通过流式细胞术研究急性髓系白血病(AML)患者粒细 胞、单核细胞糖基磷脂酰肌醇(glycosyl-phosphatidyl inositol,GPI)锚链和红细胞CD59 表达水平及其临床意义。方法该研究纳入了36例并发血管内溶血的 AML患者及21例阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)患 者,依据国际临床流式细胞协会推荐的PNH流式诊断指南,分别对受试对象的红细胞和有核 细胞进行PNH克隆检测,统计分析AML患者粒细胞、单核细胞及红细胞PNH克隆的水平。结果AML组患者与PNH组患者相比较无明显红细胞CD59表达缺陷(I型红细 胞98.49±4.61 vs 61.41±25.86,Ⅱ型红细胞1.33±4.55 vs 16.82±19.92,Ⅲ 型红细胞0.17±0.85 vs 21.71±21.12,差异均有统计学意义( t =6.43,3 .41,4.71,均 P <0.001);粒细胞、单核细胞缺陷克隆检测存在但与PNH组比较则明 显减少(粒细胞26.46±23.36 vs 73.12±28.41,单核细胞35.80±27.80 vs 78.37 ±25.03,差异有统计学意义( t=4.59,3.76,均P <0.001)。结论AML患者有核细胞中可出现FLAER阴性的PNH克隆,但未见CD59表达缺陷的红细胞,可 与PNH区分。     

高邮 吴县两市达到消灭血吸虫病标准

高邮、吴县两市原是我省血吸虫病流行的重疫区,经过40多年的积极防治,疫区面貌发生根本变化,人民体质增强,生产发展,生活质量提高.最近经省考核组对两市进行严格的考核验收,没有发现病人、病畜和钉螺,图帐资料完整,有一套巩固监测方案,有一支健全的防治队伍和机构.现经省人民政府血吸虫病地方病防     

胸腺嘧啶磷酸化酶在结直肠癌组织中的表达

目的研究胸腺嘧啶磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)在结直肠癌组织中的表达,为临床用药提供指导.方法运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白质水平对TP在结直肠癌组织及相邻正常组织中的表达进行检测.结果无论是在mRNA还是蛋白质水平,肿瘤组织中的TP表达高于其相邻正常组织,肿瘤组织中的TP蛋白水平为7.82±4.31 ng/μgTPO,mRNA水平为1.66±0.766;正常组织中TP蛋白水平为5.03±2.48 ng/μgTPO,mRNA水平为1.05±0.60;并且ELISA结果与实时RT-PCR结果具有一定的相关性(γ=0.81).结论胸腺嘧啶磷酸化酶在结直肠肿瘤中的表达对于临床使用5-FU类药物具有指导意义.     

2000～2004年三亚市中秋月饼卫生监测分析

目的了解三亚市市场销售中秋月饼的卫生质量状况.方法2000～2004年对三亚市商场、超市、酒店、糕点店等生产销售月饼的卫生质量进行抽样监测.结果2000～2004年全市共监测月饼样品541份,合格样品498份,总合格率92.1%.不同品种月饼以水果类和豆沙类月饼合格率最高,为100%,伍仁类月饼合格率最低,为87.2%.不同品种月饼合格率差别有显著意义.不同档次月饼合格率差别无显著意义.三星级以上酒店月饼合格率仅为89.9%. 结论近5年以来三亚市月饼卫生质量良好.必须强化对酒店的卫生监督监测工作.     

丹参的微波提取研究

[目的]研究用微波提取丹参优化工艺。[方法]以丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA和水溶性成分丹参素、原儿茶醛为指标，用均匀试验设计法对丹参的微波提取工艺进行优化。并与传统工艺比较。[结果]丹参以6倍量95％乙醇、微波功率320W提取30min，药渣再以12倍量水，320W微波提取两次对丹参酮ⅡA，丹参素和原儿茶醛三种指标成分的提取量，相当于或优于现行法的提取量。[结论]用微波提取丹参酮ⅡA较易，而对水溶性成分丹参素和原儿茶醛相对所需时间较长。     

实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究

目的探讨优化实验反应条件,使实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)绝对定量能获得准确可靠的结果.方法建立质粒标准品作为外参照;以管家基因GAPDH作为内参照,并对Mg2+、引物与探针比例、Buffer等进行优化.结果优化条件后,RT-PCR反应的扩增效率接近了理论最佳值,并可使靶基因与管家基因扩增效率保持一致,保证了方法的稳定性和可靠性.结论为了获得可靠、重复性好的实时RT-PCR绝对定量结果,应对实验方法进行优化.     

实时定量PCR应用中的问题及优化方案

实时定量PCR是利用PCR反应过程中所产生的荧光强度进行实时检测的定量PCR反应。目前 ,该方法已在生命科学领域得到了广泛的应用 ,本文对其应用过程中存在的主要问题加以分析 ,探讨优化实验方法。     

视神经脊髓炎认知功能障碍研究:中国学者海外报道

视神经脊髓炎是针对水通道蛋白4的自身免疫性星形胶质细胞病,除视神经和脊髓受累外,还可累及大脑半球,导致认知功能障碍。近年来,视神经脊髓炎认知功能障碍越来越受到关注。诸多国内外学者对视神经脊髓炎认知功能障碍特点及其神经病理学机制进行研究。本文选择中国学者近2年发表在国外杂志的关于视神经脊髓炎认知功能障碍的两项高质量临床研究,重点介绍其研究方法和结果。