抑制性消减杂交构建乙型肝炎病毒X蛋白羧基端缺失40个氨基酸cDNA文库

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白羧基端缺失40个氨基酸(HBx3'-40)反式激活基因,克隆其反式激活的相关靶基因.方法:以HBx3'-40蛋白表达质粒pcDNA3(-)-HBx3'-40 转染Huh-7细胞,以转染pcDNA3(-)-HBx为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取总RNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与pUCm-T载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌JM109进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建了HBx3'-40反式激活基因差异表达的cDNA文库,文库扩增后得到154个白色克隆,经菌落PCR分析,克隆包含有200～800 bp的插入片段,部分片段编码蛋白涉及原癌基因、信号转导相关基因、细胞生长因子相关基因、细胞凋亡、代谢和蛋白合成等相关基因.结论:应用抑制性消减杂交技术成功构建了HBx和HBx3'-40差异表达的cDNA消减文库,为进一步阐明HBx3'-40在HBV感染相关的肝细胞癌发生中的分子生物学机制提供理论依据.     

尖锐湿疣患者免疫功能的研究及免疫治疗进展

尖锐湿疣 (CA)由人乳头瘤病毒 (HPV)感染引起 ,以乳头瘤样增生为主要临床表现的性传播疾病 ,是目前国内外发病最多的性传播疾病之一。在我国 ,自 2 0世纪 80年代初以来 ,临床上 HPV感染呈逐年大幅度上升 ,而现有治疗方法的远期疗效均不满意且复发率相当高 [1] 。研究表明 ,临床上尖锐湿疣的迁延不愈和顽固难治与 HPV逃避机体的免疫监视有关 [2 ] 。患者不能有效产生特异的局部抗 HPV细胞免疫反应 ,可能是 CA发生及持续感染的重要机制之一。因此 ,对 CA患者免疫功能的研究及更为有效的免疫治疗逐渐受到国内外学者的关注 ,本文就此方…     

护士礼仪文化与医院形象

护士礼仪文化是从事护理工作人员在整个护理活动中，为了塑造个人和组织的良好形象，所应当遵循的尊重病人、亲属及其它工作人员的礼节和注重仪表、仪态、仪容等方面的现象规范。护士礼仪是护士这一特定群体的组织风貌，同时也是护理管理工作水平及成员个体道德水准和内心修养的集中体现，它不仅反映出一个集体的整体底蕴，而且在协调医、护、患关系，减少纠纷，提高医院整体素质水平，塑造医院良好形象，推动医院自身发展起着不可忽视的作用和有着深远的影响。     

巴戟天对成骨细胞生物学特性影响的实验研究

目的:观察巴戟天对体外培养成骨细胞(OB)增殖及其活性的影响,探讨巴戟天补肾壮骨作用的实质.方法:取新生SD大鼠头盖骨提取成骨细胞,进行生长曲线分析,测定巴戟天对细胞增殖及分泌ALP、BGP、TGF-β1的影响.结果:巴戟天能显著刺激OB增殖;巴戟天与密钙息均可促进分化中的OB分泌ALP和骨钙素,促进OB表达TGF-β1.结论:巴戟天具有与密钙息相同的作用,即促进OB分泌ALP和骨钙素,促进OB表达TGF-β1mRNA,从而大量分泌Ⅰ型胶原,以利钙盐沉积.     

巴戟天对骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程Cbfα1表达的影响

目的:探讨巴戟天对骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程Cbfα1表达的影响.方法:采用经典成骨诱导方法培养BMSCs,分别在3、6、9、12、15、18天通过RT-PCR方法进行半定量分析Cbfα1的表达,然后分A组(巴戟天水提物组)、B组(巴戟天醇提物组)、C组(对照组)、D组(经典成骨诱导)、E组(巴戟天水提物 经典成骨诱导组)、F组(巴戟天醇提物 经典成骨诱导组)培养,在Cbfα1 mRNA的表达最强的时间检测上述各组Cbfα1 mRNA的表达.结果:经典成骨诱导方法诱导至第3天的时间点开始观察到Cbfα1 mRNA的表达,并逐渐加强,至第12天达到高峰,15天、18天有所减弱,在Cbfα1 mRNA的表达最强的时间点(第12天),A组、B组、D组、E组、F组均较C组的表达强,均有显著性差异,其表达强弱顺序是:F组＞E组＞D组＞B组＞A组＞C组.结论:巴戟天水提物、巴戟天醇提物能使Cbfα1的表达加强,且巴戟天醇提物表达强于巴戟天水提物.     

外源性硫化氢通过抑制阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡改善海绵体神经损伤大鼠勃起功能障碍

目的 观察外源性硫化氢对双侧海绵体神经损伤（BCNI）大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）凋亡及勃起功能障碍的影响。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为3组（n=8只/组）：假手术组、双侧海绵体神经损伤组（BCNI组）、硫化氢干预组（BCNI+NaHS组）。通过钳夹损伤双侧海绵体神经构建BCNI模型。BCNI+NaHS组每天腹腔注射100 μmol/kg的NaHS溶液;BCNI组每日腹腔注射等量生理盐水。治疗4周后检测海绵体内压（ICP）和平均动脉压（MAP）,并通过Western blot检测胱硫醚-β-合成酶（CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）,α-SMA,Collagen-Ⅰ,Caspase-3、Bax、Bcl-2表达水平,通过免疫组化检测CBS、CSE表达情况,Masson’s Trichrome染色检测海绵体平滑肌/胶原比值,以及 TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染检测CCSMC凋亡水平。结果 治疗4周后,BCNI+NaHS组ICP/MAP比值高于BCNI组（P<0.05）;Masson’s Trichrome染色结果显示,BCNI+NaHS组海绵体平滑肌/胶原比值较 BCNI 组显著升高（P<0.05）;Western blot 结果显示 BCNI+NaHS 组α-SMA 蛋白表达高于 BCNI 组（P<0.05）,同时 Collagen-Ⅰ蛋白表达低于 BCNI组（P<0.05）;TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染结果显示,BCNI+NaHS组CCSMC凋亡数较BCNI组降低（P<0.05）。与BCNI组相比,BCNI+NaHS组Caspase-3、Bax蛋白表达降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）。BCNI组CBS、CSE表达较其余两组显著降低（P<0.05）。结论 外源性硫化氢可提高经典的抗凋亡蛋白Bcl-2及抑制CCSMC凋亡,进而改善BCNI大鼠勃起功能。     

CT与磁共振检测乙肝肝硬化背景小肝癌临床价值分析

目的分析多排螺旋CT与磁共振成像检测乙肝肝硬化背景小肝癌的临床价值。方法采取回顾分析法对2017年3月—2018年3月在我院治疗的42例乙肝肝硬化背景小肝癌患者作为研究对象,病灶数量共48个,并分为微小肝癌组(18个病灶)和小肝癌组(30个病灶),均对两组进行CT及磁共振检查。对两种检查方法的小肝癌检出率进行对比。结果磁共振的总检出率(95.83%)高于CT的总检出率(81.25%),两组差异具有统计学意义,χ~2=6.789 4,P0.05。结论对乙肝肝硬化背景小肝癌采用磁共振成像检测的检出率更高,能够准确检测出肝癌病灶数量。     

参麦注射液对急性脑梗死血液流变学、脑血流动力学及炎症因子的影响

目的观察参麦注射液治疗急性脑梗死的临床疗效及对血液流变学、脑血流动力学及相关炎症因子的影响。方法选取120例急性脑梗死患者按照治疗方法不同分为治疗组65例与对照组55例,对照组给予常规脱水、降压等治疗,治疗组加用参麦注射液治疗,连续治疗7d为1个疗程,4个疗程后比较2组患者各项指标变化。结果治疗后治疗组低切、血浆黏稠度、红细胞聚集指数及纤维蛋白原均较治疗前、同期对照组有明显改善（P〈0.05）,治疗组治疗后脑血流动力学指标及CRP、TNF-α、IL-6较治疗前、同期对照组改善明显（P〈0.05）,差异具有统计学意义。结论参麦注射液治疗急性脑梗死有利于改善血液流变学、脑血流动力学及相关炎症因子水平,对改善患者预后有一定价值。