原代大鼠边缘群肝细胞的分离及端粒酶活性分析

目的:通过检测端粒酶活性(TMA)在原代大鼠边缘群及非边缘群肝细胞中表达差异,探讨边缘群细胞是否具有肝脏干细胞的部分特征. 方法:原位两步胶原酶法分离大鼠肝细胞. 应用流式荧光激活细胞分选术(FACS)将肝细胞分成边缘群(SP)及非边缘群(Non-SP),并定量分析两群细胞中TMA水平. 结果:存在SP细胞并占细胞总体2.1%,SP细胞TMA高于Non-SP细胞(28.1±1.3 vs 2.0±0.2 TPG,P＜0.01). 结论:大鼠边缘群肝细胞具有更强的自我更新能力,即具有干细胞的部分特征.     

1970—2021年冠心病中医证候特征演变规律文献研究

目的 通过文献挖掘2010—2021年冠心病中医证候特征,并结合团队前期对1970—2010年冠心病中医证候特征演变的研究,总结1970—2021年冠心病中医证候特征演变规律。方法 检索2010年7月1日至2021年6月30日间中国知网（CNKI）及维普中文期刊数据库（VIP）中公开发表的冠心病中医证候临床研究相关文献,对最终纳入文献中冠心病中医证候类型和证候要素分布特征进行统计分析;并结合团队前期1970—2010年冠心病中医证候特征研究结果,总结分析1970—2021年冠心病中医证候特征演变规律。结果最终纳入129篇文献,包括52 090例患者,其中有107篇明确报告中医复合证型的文献,共36 224例患者。2010—2021年临床中医证候类型排名前10位的依次为痰浊内阻证8519例（23.52%）、心血瘀阻证5094例（14.06%）、气虚血瘀证5022例（13.86%）、气阴两虚证4432例（12.23%）、气滞血瘀证2285例（6.31%）、阳气亏虚证1683例（4.65%）、心气不足证1474例（4.07%）、寒凝心脉证1271例（3.51%）、气虚痰瘀证1243例（3.4...     

重组溶瘤腺病毒对荧光素酶标记和非标记人肺癌A549 细胞抑制作用比较

目的:探讨重组溶瘤腺病毒Ad-Apoptin-hTERTp-E1A(ATV)对荧光素酶标记人肺癌细胞（A549-luc）和人肺癌细胞（A549）的体外抑制作用差异。方法：利用ATV分别感染A549 细胞和A549-luc 细胞,通过WST-1 和结晶紫染色法确定ATV的抑制作用的差异性,通过Hoechst 和Annexin V-FITC/PI 染色验证ATV的抑制方式。结果：ATV对A549 和A549-luc 细胞均具有明显抑制作用（P<0.05）。ATV在24、48、72 h 对两种细胞均有明显抑制作用（P<0.05 或P<0.01）,且72 h 抑制率最强;剂量分别为1、10 和100 MOI的ATV对两种细胞均有抑制作用,且100 MOI抑制率最高。A549 细胞和A549-luc 细胞感染ATV后,均呈现核碎裂典型浓染和边集的凋亡现象,且凋亡率随时间的增加而增大,具有显著的时间效应（P<0.05 或P<0.01）,且凋亡率均在72 h 达到峰值。结论：荧光素酶的插入没有明显改变ATV对A549-luc 细胞的抑制作用和抑制方式,ATV是通过诱导A549-luc 细胞和A549细胞凋亡从而达到对其显著性体外抑制作用.     

光甘草定对肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制

目的：探讨光甘草定对肺腺癌细胞A549 恶性生物学行的影响及其分子机制。方法：常规方法培养A549 细胞和人正常肺上皮细胞BEAS-2B,用不同浓度的光甘草定和或顺铂对其进行处理,通过结晶紫染色、CCK-8 法检测光甘草定、顺铂对A549、BEAS-2B细胞增殖活力的影响,Transwell 小室实验、细胞划痕实验检测光甘草定对A549 细胞侵袭、迁移能力的影响,流式细胞术检测光甘草定对A549 细胞凋亡的影响,3D超低黏附板培养法培养A549 细胞后采用CCK-8法检测光甘草定对A549 细胞增殖的影响,WB法检测光甘草定对A549 细胞中上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达的影响;构建A549 细胞移植瘤模型后检测光甘草定、顺铂对移植瘤的生长以及移植瘤组织中EMT相关蛋白表达的影响。结果：光甘草定、顺铂呈剂量依赖性地显著抑制A549 细胞的增殖（P<0.05 或P<0.01）、细胞迁移（P<0.05 或P<0.01）和侵袭能力（P<0.05 或P<0.01）,光甘草定能诱导A549 细胞凋亡（P<0.01）,抑制A549 细胞中N-cadherin、snail 和vimentin 蛋白的表达,促进E-cadherin 蛋白表达;光甘草定、顺铂均能抑制A549移植瘤的生长,抑制移植瘤组织中Ki67、N-cadherin、snail 和vimentin 蛋白的表达、促进E-cadherin 蛋白的表达。结论：光甘草定可通过抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导A549细胞凋亡,其机制可能与其抑制细胞的EMT进程而产生抑癌作用有关。     

六味地黄丸合桃红四物汤配合壮骨膏治疗骨质疏松性椎体压缩骨折PVP/PKP后遗留痛临床观察

目的观察六味地黄丸合桃红四物汤配合壮骨膏治疗骨质疏松性椎体压缩骨折经皮椎体成形术(PVP)或经皮球囊扩张椎体成形术(PKP)后遗留疼痛的临床疗效。方法采用随机数字表法将68例骨质疏松性椎体压缩骨折PVP/PKP后遗留痛患者随机分为2组,对照组34例口服扶他林片及外用氟比洛芬巴布膏治疗;治疗组34例给予口服六味地黄丸合桃红四物汤配合外用壮骨膏治疗。2组均以7 d为一个疗程,并连续治疗2个疗程。观察比较治疗前后患者疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分及Oswestry功能障碍指数问卷表(ODI)评分的变化。结果治疗组治疗后患者VAS及ODI评分均明显优于对照组(P 0. 05)。结论六味地黄丸合桃红四物汤配合壮骨膏治疗骨质疏松性椎体压缩骨折PVP/PKP后遗留痛,可有效缓解患者术后的疼痛症状、促进患者椎体功能恢复,值得临床推广应用。     

新城疫病毒对肿瘤细胞的杀伤及其作用机制研究

目的探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)对肿瘤细胞的抑制机制及其体内抑瘤作用。方法采用基因组电泳法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞基因组的影响。运用SDS-PAGE、Western blot等方法检测NDV感染对Hep-2肿瘤细胞内p53及Bcl-2蛋白表达量的影响。通过间接免疫荧光法检测NDV感染后其新城疫病毒HN基因在Hep-2肿瘤细胞表面的表达情况。另外,构建C57/BL小鼠荷H22模型,瘤内注射NDV,观察其对实体肿瘤的抑制作用,探讨NDV在动物模型体内所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的基因组断裂,电泳呈梯状条带。NDV感染能够上调p53的表达,且不影响Bcl-2蛋白的含量。间接免疫荧光实验显示,NDV感染Hep-2肿瘤细胞后可在其表面表达大量新城疫病毒HN蛋白。动物实验结果说明,NDV可抑制实体肿瘤生长。结论NDV可诱导Hep-2肿瘤细胞凋亡,且不受Bcl-2的影响;能够有效抑制体内实体肿瘤的生长。     

毒根斑鸠菊花枝总黄酮的提取工艺

目的 对毒根斑鸠菊花枝中总黄酮的提取工艺进行最优选择.方法 采用单因素实验研究超声波功率、提取温度、乙醇浓度、液料比以及提取时间对毒根斑鸠菊花枝中总黄酮提取率的影响并用正交实验进行验证.结果 超声波功率540W、温度70℃、乙醇浓度70％、料液比1:20g/mL、提取时间70min为最佳提取条件.在此条件下,毒根斑鸠菊花枝提取总黄酮含量为81.59 mg·g-1.结论 本研究优化了毒根斑鸠菊花枝总黄酮的提取工艺,该工艺稳定可行,重复性好,提取效率较高.     

Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应

目的：探讨Apoptin基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用和作用方式。方法：应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin和载体质粒pVAX1分别体外转染Hela细胞,作为重组质粒pVAX1-Apoptin组和载体质粒pVAX1组,同时设空白细胞对照组。应用Western blotting检测Apoptin基因在Hela细胞中的表达;运用噻唑兰(MTT)分析法检测重组质粒对Hela肿瘤细胞的抑制作用;罗丹明123 和DCFA 染色测定线粒体跨膜电位(ΔΨm) 和活性氧水平变化;底物染色反应检测caspase-3活性。结果：pVAX1-Apoptin组转染48 h后,Hela细胞的抑制率为69.28%,明显高于对照组（0.74%）和pVAX1组（10.11%）（P<0.01）。与对照组比较,pVAX1-Apoptin组线粒体ΔΨm下降(P<0.01),细胞内活性氧水平升高(P<0.05), caspase-3活性增强(P<0.01)。结论：Apoptin可通过诱导Hela细胞凋亡,进而特异性杀伤Hela肿瘤细胞。     

膀胱肉瘤样癌1例

正患者,男,59岁。因"无痛性肉眼血尿3个月余"于2018年3月13日入院。患者为全程肉眼血尿,伴有血凝块排出,无尿频、尿急、尿痛。彩超检查示:膀胱占位。中下腹部CT平扫+增强示:膀胱占位,右侧盆腔淋巴结肿大,大小约2.5 cm×2.0 cm(图1～3)。膀胱镜检查示:膀胱前壁可见结节样肿物,直径约6 cm,肿物基底宽,周围可见多发卫星灶,肿物表面有钙化。夹取肿物行活检,易出血。膀胱活检病理示:高级别浸润性尿路上皮癌,伴坏死、钙化。完     

术前γ-谷氨酰转肽酶水平对评估结直肠癌肝转移患者微波消融预后的价值

目的 本研究旨在探讨术前γ 谷氨酰转肽酶（gamma glutamyl transferase,GGT）水平对评估结直肠癌肝转移患者行肝转移瘤微波消融（microwave ablation,MWA）治疗后预后的价值。方法 回顾性搜集80例接受肝转移瘤MWA治疗的结直肠癌肝转移患者,按照MWA术前GGT水平分为两组：高GGT组45例（GGT≥60 U/L）,正常GGT组35例(GGT＜60 U/L),比较两组的生存状况及预后因素。结果 高GGT组和正常GGT组患者12、18、24个月的生存率分别为62.22%、46.67%、26.67%和82.86%、71.43%、48.57%,中位生存时间分别为15.3个月和23.5个月（P＜0.05）。Cox多元回归分析显示：术前GGT水平、肝转移灶大小是结直肠癌肝转移患者生存的独立危险因素,Child Pugh分级是结直肠癌肝转移患者生存的独立保护因素。结论 术前GGT水平可以作为评估MWA治疗结直肠癌肝转移患者生存的独立预后因素。