大鼠野生型IRF-1基因和IRF-1 shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

目的:构建大鼠野生型干扰素调节因子1(interferon regulatory factor-1,IRF-1)基因及其特异性短发夹状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察IRF-1在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默IRF-1基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠IRF-1基因的CDS区序列和针对其不同位点所设计的3种shRNA序列分别克隆到pcDNA3.1及pGCsi.U6.neo.GFP真核表达质粒中。在酶切鉴定及序列测定正确后,用GenEscortTMⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染入培养的大鼠GMC中,然后用Western blot检查IRF-1融合蛋白的表达,同时筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明,两种重组质粒均构建成功。Western blot证实构建的pcDNA3.1/IRF-1质粒在大鼠GMC中能正确表达,且IRF-1shRNA-2具有最佳沉默效率。结论:本实验成功构建了大鼠野生型IRF-1及其特异性的shRNA真核表达质粒,为进一步研究IRF-1基因的生物学功能提供了必要的实验材料。     

参苓白术散对脾虚证小鼠小肠上皮细胞差异蛋白质组分影响的初步研究

目的研究参苓白术散对脾虚证小鼠小肠上皮细胞差异蛋白质组分的影响,并探讨参苓白术散治疗脾虚证的机制。方法将小鼠随机分为4组：空白对照组、模型组、参苓白术散低剂量组、参苓白术散高剂量组。观察各组小鼠的体征改变,通过SDS-PAGE技术检测各组小鼠小肠上皮细胞蛋白质的表达,利用Quest one分析软件对各组图谱进行对比分析,观察其改变。结果参苓白术散能够显著改善模型小鼠的体征,使小肠上皮细胞蛋白质组分的表达接近于正常。结论参苓白术散可以通过影响小肠上皮细胞蛋白质组分的表达起到治疗脾虚证的作用。     

秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究

目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率。方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织;筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养;应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量。结果:秦艽愈伤组织生长的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L),最佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),最佳继代时间为30 d。龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28～30 d)达最高,为0.78 mg/g DW。结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法。秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈"S"型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加。     

基于B/S架构多通道中央监护系统的设计

设计了一个基于B/S架构的多通道中央监护系统.整个系统由监护中心的中央监护服务器端软件、运行在客户端浏览器的ActiceX控件和多参数采集器构成.服务器端软件能够接受多个客户端的数据传输请求,实现基于Internet的多患者生理参数远程实时监护.客户端采用B/S架构,客户端只需安装一个ActiveX控件,使用浏览器就可以实时查看和发送生理参数和波形.将监护仪从床边延伸到了家庭,有利于患者的长期跟踪观察,节省住院费用,也为医疗仪器普及化和网络化提供了新的解决方案.     

动态与静态面部表情加工的比较:来自眼动的证据

目的采用眼动技术,比较动态和静态呈现面部表情即时加工特点。方法选取17名被试进行实验,采用2(呈现方式:动态、静态)×3(面部表情:高兴、中性、生气)的两因素被试内设计。使用ASL504型眼动仪记录被试观看不同面部表情图片(每种条件各10张)的眼动情况,眼动分析指标包括总注视时间、注视百分比、注视点个数和凝视点个数。结果反应时出现了面部表情主效应(F(2,32)=5.27,P=0.011)。事后比较(LSD)显示,中性表情比高兴表情和生气表情反应时更长(P0.05)。注视点个数出现了呈现方式主效应(F(1,16)=14.34,P=0.002),动态呈现方式的注视点比静态呈现方式更少。凝视点个数出现面部表情主效(F(2,32)=5.14,P=0.012)。事后比较显示,中性面部表情比高兴和生气面部表情的凝视点更多(P0.05)。结论在同等时间内动态呈现面部表情的加工更有效率,进而证明了面部表情加工中的动态优势。     

血必净对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子的影响

目的 观察血必净注射液对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子表达的影响,探讨血必净治疗尿源性SIRS的作用机制. 方法 健康实验猪45头按随机数字表法分为假手术对照组、模型组和血必净治疗组3组,每组15只,每组所有动物按时间点又分为术后0、4、6、12和24 h5个时间点亚组.建立尿源性SIRS猪模型.应用RT-PCR法检测肾组织中TNF-α、IL-6、IL-10、NF-κB p65mRNA的表达;采用Western blot法检测肾组织中NF-κB的活性. 结果 模型组猪的SIRS表现最为明显,血必净治疗组SIRS表现明显较轻.模型组猪肾组织TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著高于假手术组(P＜0.05);血必净治疗组较模型组的TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著降低(P＜0.01);IL-10 mRNA的表达情况则与之相反. 结论 血必净通过抑制NF-κB活性、上调IL-10、下调TNF-α,IL-6及NF-κB的表达而达到治疗尿源性SIRS的作用.     

水胶体敷料在偏瘫并发压疮感染患者中应用的效果

目的：探讨水胶体敷料在偏瘫并发压疮感染患者中的效果。方法选取收治的偏瘫并发压疮感染患者60例,随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组患者采用传统聚维酮碘＋TDP光照治疗,观察组患者采用水胶体敷料治疗。比较两组患者偏瘫并发压疮感染患者的直接护理时间、间接护理时间及临床疗效。结果观察组患者非感染创面愈合时间、创面愈合时间、直接护理时间、间接护理时间、敷料更换次数均明显少于对照组（均P＜0.05）,患者临床治疗总有效率明显高于对照组（P＜0.05）,患者并发症发生率明显低于对照组（ P＜0.05）。结论水胶体敷料在偏瘫并发压疮感染患者中的护理效果显著,可明显缩短患者的治疗时间,并发症少且安全性高。     

含EGFP报告基因单顺反子HCV亚基因组复制子载体的构建和表达

目的构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的HCV复制子表达载体,并实现其在细胞中的复制表达。方法用分子生物学基因克隆技术对HCV 2a型复制子的基因进行改造,用EGFP基因替代HCV基因组中的包膜基因(E1和E2)体外构建重组单顺反子HCV亚基因组复制子真核表达质粒pcDNA-JFH1-EGFP,经限制性内切酶酶切分析和测序鉴定;脂质体介导转染人肝癌细胞系Huh-7细胞,用荧光显微镜观察EGFP表达,采用半定量RT-PCR方法检测重组复制子的HCV RNA负链,采用Western blot检测HCV NS3蛋白的复制表达,并观察IFN-α对重组质粒表达的HCV RNA复制的抑制作用。结果构建的4个重组质粒酶切分析与预期相符,HCV亚基因复制子表达载体中未发生EGFP和HCV编码区读码框架改变,转染重组载体Huh-7细胞检测到HCV负链及EGFP和HCV NS3蛋白表达。转染后48h,1 000IU/ml和2 000IU/ml IFN-α处理的细胞HCV RNA表达水平分别为未处理组的20.0%和7.6%。结论含EGFP报告基因的单顺反子HCV亚基因组复制子表达载体pcDNA-JFH1-EGFP构建成功,在Huh-7细胞中能有效复制表达,为进一步研究HCV提供了实验平台。     

六西格玛质量运动在放射科的应用

漳州市医院放射科发现普通拍片时病人取报告的时间为“5小时”。显然这与卫生厅规定的病人检查时间“2h”的要求相距甚远，患者反映检查时间太长。为提高病人的满意度，充分利用先进拍片机资源，我们就这一问题做调查分析。     

健康教育路径在支原体肺炎患儿护理中的应用

通过对154例支原体肺炎患儿采用健康教育路径模式进行健康教育.提高了患儿及家属对护理服务的满意度,对疾病的认识和自我管理能力,提升了患儿的生活质量.与此同时使护士明确每日工作内容,减少工作的随意性,使护理工作更有预见性、计划性、针对性.