含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5真核表达载体的构建及初步功能研究

目的 构建含小鼠FNDC5基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-FNDC5,并初步探索其对C2C12肌细胞的线粒体能量代谢的影响。方法 应用反转录-聚合酶链反应法从小鼠腓肠肌和心脏组织中扩增出两端带有HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点的FNDC5编码片段,经回收、纯化酶切后,依次连接到质粒PMD19-T和pEGFP-C3上,获得过表达载体后转染至C2C12肌细胞,48h后以激光共聚焦显微镜拍摄线粒体荧光强度,以荧光定量PCR检测与线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达情况。结果 PCR及测序结果表明:重组质粒pEGFP-C3含有FNDC5段,方向及大小正确,过表达FNDC5可以增强线粒体荧光强度,并增加线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达。结论 成功构建了小鼠真核表达载体pEGFP-C3-FNDC5,过表达FNDC5可以增强线粒体能量代谢。     

不同浓度罗汉松实醇提物调血脂及抗氧化的作用研究

目的研究不同浓度罗汉松醇提物调血脂及抗氧化的作用。方法通过自制高脂饲料喂养昆明雄性小鼠,构建高血脂症模型,给药4周,测定小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(GPT/ALT)、谷草转氨酶(GOT/AST)和丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力,计算脏器指数、动脉硬化指数(AI),并观察肝脏病理切片。结果相比于模型对照组,95%醇提物在给药30d后,小鼠血清中TC、TG、LDL-C、AST、ALT及肝指数均有显著性降低(P0.05,P0.01),并显著提高HDL-C水平(P0.01),也能显著的提高SOD活力和降低小鼠血清中MDA的含量(P0.01),由计算出的AI值,也能看出其在降低动脉硬化指数有显著性的效果(P0.01)。结论不同浓度的罗汉松实醇提物有降血脂、保肝及抗氧化的作用,为罗汉松实的临床应用提供依据。     

染砷大鼠脑砷代谢研究

目的研究染砷大鼠脑中砷形态代谢产物、代谢酶含量水平及其相关性,初步探讨砷代谢与砷毒性机制关联性。方法雄性清洁级Wistar大鼠20只,分成对照组及砷酸钠低、中、高剂量组4组。各组大鼠砷酸钠经口染毒3个月后处死并摘取脑组织。采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法(HPLC-HGAFS)测定并比较砷酸钠各剂量染毒组大鼠脑组织中砷形态代谢产物[i As(Ⅲ)、i As(Ⅴ)、总砷(Total As)含量以及一甲基化率(PMI)、二甲基化率(SMI)]及代谢酶GSSG含量、甲基转移酶活力、GST活力、GSH含量;通过试剂盒法分析各组大鼠脑中甲基转移酶的活力,并探讨大鼠脑中砷形态代谢产物与代谢酶的相关性。结果染毒组大鼠随染毒剂量和时间的增加,出现生长发育迟缓及狂躁、相互撕咬等现象;砷染毒剂量升高会促进脑中i As(Ⅲ)和总砷含量增加;同时砷染毒组脑组织中GSSG含量有所升高而GSH含量有所下降;随染毒剂量升高,GST活力也随之呈现升高趋势;与对照组比较,砷酸钠染毒各剂量组大鼠脑中PMI值均较低,SMI值有所升高(P<0.05)。砷酸钠染毒组甲基转移酶活力与i As(Ⅲ)%含量呈负相关(r=-0.714,P<0.05),与PMI和SMI均呈正相关(rPMI=0.714,rSMI=0.805,P<0.05);砷酸钠染毒组GSH含量与i As(Ⅲ)%含量呈正相关(r=0.855,P<0.05),与PMI和SMI均呈负相关(rPMI=-0.855,rSMI=-0.858,P<0.05)。结论低剂量砷酸钠染毒会打破脑组织中GSSG与GSH的动态平衡,造成脑组织的氧化损伤,砷酸钠染毒后其代谢产物在脑组织中可能具有一定的蓄积能力。     

经皮冠状动脉介入术前应用不同剂量氯吡格雷的疗效与安全性

目的在经皮冠状动脉介入术(PCI)前应用高剂量(450 mg)氯吡格雷和常规剂量(300 mg)氯吡格雷预治疗的临床疗效及安全性研究。方法将我院206例拟行PCI患抽签随机分为高剂量组与常规剂量组,每组103例,术前分别给予450 mg、300 mg氯吡格雷预治疗,比较两组血小板活化指标、血小板聚集率,并随访30 d、6个月对心血管事件及出血事件进行记录。结果高剂量组CD63、CD62 P、TSP各为(4.13±1.34)%、(8.22±3.46)%、(2.54±0.34)%与常规剂量组(5.32±2.31)%、(10.52±4.11)%、(2.90±0.54)%比较为低(P0.05);两组MAADP及血小板聚集率治疗后显著下降(P0.05),血小板抑制率显著上升(P0.05),组间比较用药后MAADP、血小板抑制率、血小板聚集率差异显著(P0.05);高剂量组30 d、6月联合终点事件发生率分别为0.0%、1.9%低于常规剂量组3.9%、8.7%,但无显著差异(P0.05),总发生率高剂量组30 d、6月后分别为13.6%、22.3%,均显著低于常规剂量组32.0%、58.3%,对比差异显著(P0.05);两组不同时间点出血时间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 PCI术前应用450 mg高负荷的血小板抑制效果优于常规300 mg剂量,可降低不良事件发生率。     

强直性脊柱炎患者细胞毒性T淋巴细胞变化

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞(T-lymphocytes,Tc)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者中的表达变化.方法 筛选42例AS患者作为研究对象(病例组),20例同时期健康查体者作为对照(对照组).检测2组血小板计数、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-neactveprotein,CRP)水平并记录强直性脊柱炎病情活动指数调查表(bath ankylosing spondylitis disease activity index,BASDAI)评分.应用流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞表型(CD3+CD8+)、胞浆内细胞因子γ干扰素、白细胞介素4的表达.采用t检验分析两组间外周血中Tc、Tc1、Tc2、Tc1/Tc2比值的差异;相关分析采用Pearson检验.结果 病例组与对照组外周血中Tc分别为(21.22±4.27)％ vs (14.23±4.15)％ (t=6.177,P＜0.01),Tc1分别为(0.35±0.08)％vs(1.45±0.27)％(t=24.640,P＜0.01),Tc2分别为(0.53±0.12)％vs(0.41±0.12)％(t=3.608,P＜0.01),Tc1/Tc2比值分别为0.72±0.29vs3.93±1.63(t=6.431,P＜0.01).相关分析显示AS患者外周血中Tc、Tc1、Tc2、Tc1/Tc2比值与血小板计数、ESR、CRP、BASDAI均无相关性.结论 AS患者外周血中Tc1细胞减少,Tc2细胞增多,的确存在Tc1/Tc2细胞的失衡,而且是Tc2细胞占优势.     

多点穿刺标准通道经皮肾镜治疗鹿角形结石的体会

目的探讨多点穿刺标准通道术在双导管碎石清石系统治疗鹿角形肾结石中的价值。方法分析268例鹿角形肾结石患者的临床资料,男性148例,女性120例,年龄18~68岁。合并集合系统积水(包括某一肾盏的扩张)186例,积脓26例。均使用标准通道多点穿刺技术双导管碎石清石系统治疗。全麻或硬膜外(分2次手术者)麻醉。彩色多普勒超声引导下建立标准通道,手术中B超实时监测下选择和使用肾盂和肾盏穿刺点。结果268例共建立标准通道270个,选择和使用穿刺点486个,使用4个19例,3个27例,2个107例,1个115例。平均取石时间45.4 min。一期清石率96.7%(259/268),二期清石率98.9%(265/268)。输血9例(3.4%)。介入治疗4例(1.5%),术后发热26例(9.7%)。无死亡病例,无肾切除病例。结论彩色多普勒超声实时监测下,使用标准通道多点穿刺技术,在双导管碎石清石系统对鹿角形肾结石的治疗中安全、快速,能够提高清石率,降低手术并发症。     

高良姜不同提取部位对实验性胃溃疡的影响及作用机理研究

目的:筛选高良姜抗胃溃疡有效部位,探讨抗溃疡作用机理。方法:将高良姜提取分离为不同部位,观察各部位对无水乙醇、阿司匹林诱导的小鼠胃溃疡模型溃疡指数、胃组织病理切片、血浆胃泌素(GAS)、白介素1(IL-1)、环氧酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的影响。结果:与模型组小鼠比较,高良姜水提物、80%乙醇洗脱物可以显著减少胃溃疡模型小鼠的胃溃疡指数,显著降低血浆GAS、IL-1、TNF-α浓度,显著升高血浆COX-2、PGE2浓度,30%乙醇洗脱物、95%乙醇洗脱物对溃疡指数无显著影响,但可调节血浆GAS、IL-1、PGE2浓度。结论:高良姜各提取分离部位中水提物、80%乙醇洗脱物具有较好的抗胃溃疡效果,抗溃疡作用可能通过减少血浆GAS、IL-1、TNF-α浓度,提高血浆COX-2、PGE2浓度产生。     

健脾祛湿方对2型糖尿病并非酒精性脂肪肝患者脂联素、肿瘤坏死因子-α和肝脏脂肪含量的影响

【目的】观察健脾祛湿方对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）并非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）患者脂联素（adiponectin, APN）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis facto al’pha, TNF-α）及肝脏脂肪含量变化的影响。【方法】将120例T2DM并NAFLD患者随机分为健脾祛湿方组（治疗组）和吡格列酮组（对照组）各60例,在基础降糖治疗的同时,分别给予健脾祛湿方和吡格列酮治疗,观察时间均为24周。利用声触诊组织量化成像技术（virtual touch tissue quantification technique, VTQ）、酶联免疫吸附（ ELISA）法和生化分析仪观察2组治疗前后肝脏脂肪含量、 APN、TNF-α、血糖、血脂和肝功能等指标的变化。【结果】治疗后,2组空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、 TNF-α含量及肝实质ARFI (acoustic radiation force impulse)值较治疗前均显著下降(P<0．05),高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、 APN含量较治疗前显著上升(P<0．05);治疗组治疗前后FINS、 TNF-α差值大于对照组(P<0．05)。【结论】健脾祛湿方可能通过升高APN、降低TNF-α,从而达到纠正糖脂代谢紊乱,保护胰岛功能以及减少肝脏脂肪含量的功效。     

陈宝田教授创小乌桂汤治疗顽固性痹证

小乌桂汤由陈宝田教授所创立,该方由《千金要方》的小续命汤、《金匮要略》的乌头汤和桂枝芍药知母汤三个经方的合方加减,主要用于治疗顽固性痹证,具有疏风通络,散寒除湿,益气养血的作用.陈宝田教授认为,顽固性痹证多因风寒湿邪阻滞经络肢体关节,且邪实甚重,非一般之剂能除之.临证治疗类风湿性关节炎及强直性脊柱炎,加全蝎以加强通络止痛之力;多发性动脉炎加黄连解毒汤,以增清热解毒之功;退行性骨关节病及年老病久、体质虚弱明显者,加独活寄生汤以补肝肾,强筋骨;寒盛者,加大辛温药量;化热者则减辛温药量,并加大黄芩、知母、白芍之用量.     

中医药治疗子宫内膜异位症致痛经的优势及思路

目前,子宫内膜异位症引起疼痛的发病机制未明,现代医学在其治疗上有一定的局限性.中医药在整体观念指导下,可根据患者的不同症情、不同体质进行辨证用药,调整整个机体的内分泌失衡状态,达到减轻或解除患者症状的目的.中药具有抗菌消炎、缓解疼痛、抑制血管形成及改善机体免疫力的功能,能多途径、多环节、多靶点的发挥作用,远期疗效好,毒副作用小,并可长期用药.