低氧预适应对肢体缺血/再灌注大鼠肝脏的保护作用研究

目的:探讨低氧预适应(HPC)对肢体缺血-再灌注(I/R)大鼠肝脏的保护作用。方法:重复性低氧5次建立大鼠HPC模型,以橡皮带环绕结扎大鼠双后肢跟部,阻断血流4h后再灌注4h复制肢体I/R模型,设立对照组、I/R组和HPC+I/R组。检测各组血中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH),血中和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、丙二醛(MDA)的含量变化及肝组织的湿/干重比值(W/D)。结果:I/R组大鼠血中ALT、AST、LDH含量升高;血中和肝组织中XOD、MDA含量升高;血中和肝组织中SOD活性降低;肝组织的W/D增高。HPC+I/R组大鼠上述指标较I/R组均明显改善,差异有显著性。结论:低氧预适应对肢体缺血/再灌注后肝脏的损伤有明显的保护作用。     

整合组织胚胎学与病理学课程和实施比较教学方法的实践与思考

为了帮助学生理解、融合各学科知识,培养学生的自主学习能力,提高学生的综合素质,湖北民族学院医学院根据组织胚胎学和病理学各章节的特点及共性,将组织学和病理学的教学内容重新整合,建立组织胚胎学与病理学综合课程,采用比较教学方法在部分五年制临床医学专业学生中进行教学实践,取得了较好的效果.     

亚硒酸钠对体外培养的慢性乙型肝炎患者外周树突状细胞功能的影响

目的： 体外培养慢性乙型肝炎患者外周树突状细胞（DCs）,检测其经过亚硒酸钠作用后功能的改变。方法：(1)建立用人重组粒细胞－单核细胞刺激集落因子（GM-CSF）、人重组IL-4、人重组IFN-α等细胞因子诱导、AIM-V培养外周血单个核细胞的方法。(2)收集慢性乙肝患者30例外周血，每份血分成2份，在诱生中不加亚硒酸钠处理者为乙肝组，加硒者为加硒组。健康献血者18例为对照组。(3)透射电镜观察其形态；MTT法检测DCs对同种异体淋巴细胞的增殖能力(MLR)及ELISA法检测细胞因子IL-12的分泌和GSH-Px、MDA的活性。结果：(1)DCs分泌IL-12水平和刺激淋巴细胞反应能力：乙肝组明显低于对照组(P<0.05)；加硒组比乙肝组高 (P<0.05)。(2)DCs细胞内的GSH-Px、MDA的活性：GSH-Px活性乙肝组明显低于对照组(P<0.05)；加硒组高于乙肝组和对照组(P<0.05)。MDA的活性乙肝组明显高于加硒组、对照组(P<0.05)。结论： 乙肝患者DCs功能缺陷可能与HBV感染DCs后产生的氧自由基损伤和GSH-Px过度消耗有关。体外经亚硒酸钠作用后的乙肝患者的DCs功能可在一定程度上恢复，可望为以后基于DCs的慢性乙型肝炎的免疫治疗提供新思路。     

乙型肝炎患者外周血树突状细胞Toll样受体4表达

目的 研究慢性乙型病毒性肝炎患者外周血树突状细胞内Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达和功能状态.方法 用人重组粒细胞-巨噬细胞刺激集落因子(rhGM-CSF)、人重组白细胞介素4(rhIL-4)、干扰素α(IFN -α)诱生慢性乙型肝炎患者和健康人外周血来源的树突状细胞(DC).酶联免疫吸附(ELISA)法检测DC培养上清中自介素-12(IL-12)的分泌水平.四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TLR4的表达.结果 慢性乙肝患者DC分泌IL-12(13.21±0.21)pg/ml的水平显著低于对照组(20.74±0.19)pg/ml(P<0.01);刺激同种异体淋巴细胞的增值能力显著下降(P<0.01);TLR4mRNA表达乙肝患者外周血DC(1.26±0.07)pg/ml显著高于健康对照组(0.79±0.11)pg/ml(P<0.01).结论 慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞功能存在缺陷,可能与TLR4 mRNA的表达上调抑制IL-12的分泌有关.     

延龄草总皂苷对D-gal诱导的衰老大鼠认知功能及线粒体自噬的影响

目的 探讨延龄草总皂苷(total saponins from Trillium tschonoskii maxim,TST)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老大鼠认知功能及线粒体自噬的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组(D-gal,皮下注射)、干预组(TST,灌胃给予低、中、高3个剂量),每组10只,连续给药6周。Morris水迷宫评价大鼠认知功能;HE、Nissl染色观察海马及皮质组织形态;免疫组织化学法检测Pink1、Parkin的定位表达;Western blot检测Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ、p62、Beclin1的表达水平。结果 与正常对照组相比,D-gal模型组逃避潜伏期时间延长、穿越平台次数减少(P<0.05);大鼠海马组织内神经元数量明显减少;海马组织Pink1、Parkin阳性细胞表达减少;Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白的表达明显下降,p62的表达明显升高(P<0.05)。与D-gal模型组相比,TST各剂量组逃避潜伏期时间缩短、穿越平台次数增多、停留在平台所在象限时间增加(P<0.05);海马...     

HBV感染对人体T细胞免疫功能影响的研究

目的:通过检测乙型肝炎病毒(HBV)感染后外周血及感染肝组织内CD4 T和CD8 T细胞的数量及功能,探讨HBV对人体T细胞免疫的影响及其可能机制.方法:(1)用流式细胞仪检测36例HBV感染者和20例正常人外周血中T细胞亚群的数量.(2)用免疫组化S-P法检测64例慢性肝病的肝脏标本的HBsAg和HBcAg,将HBsAg和(或)HBcAg阳性的50例作为HBV感染组,而将肝组织HBsAg和HBcAg及血清病原学检查均为阴性的10例作为非HBV感染组(HBV阴性组).检测其中CD4、CD8、CD25表达情况.结果:(1)HBV感染组外周血T细胞亚群测定值中,CD4 T细胞和CD4 T/CD8 T比值明显低于对照组(Pb＜0.05);CD8 T细胞升高,明显高于对照组(Pb＜0.05);(2)肝组织内浸润的淋巴细胞主要聚集在汇管区和小叶坏死区,免疫组化结果显示HBV感染组肝组织内的CD8 T和CD4 T细胞数量多于非HBV感染组,统计学上其差异有非常显著意义(Pc＜0.01).HBV感染组肝组织内与T细胞活性有关的CD25 T细胞数量与对照组相比有所减少,但统计学上无显著意义.结论:乙型肝炎病毒感染者外周血和肝内的T细胞亚群紊乱,且活性可能有下降,免疫功能受损.     

竹节参总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注神经元凋亡的影响

目的：研究竹节参总皂苷（total rhizome panacis japonica saponins,tRPJS）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响及机制。方法：采用大鼠右侧大脑中动脉阻断（middle cerebral artery occulusion,MCAO）局灶性脑缺血再灌注模型,大鼠随机分为假手术组、损伤模型组、tRPJS不同剂量组（50、100、200mg·kg^-1ip）,观察各组大鼠神经功能状态,应用TUNEL法和免疫组化染色分别检测神经凋亡细胞数及bcl-2、Bax蛋白表达。结果：与损伤模型组比较,tRPJS治疗组可明显改善大鼠神经功能的受损程度,并减少神经细胞凋亡数,明显增加bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达,并呈剂量依赖性。结论：tRPJS在局灶性脑缺血再灌时具有抗神经细胞凋亡作用,改善受损的神经功能,从而对脑缺血再灌注损伤起保护作用,其机制可能与上调bcl-2蛋白,下调Bax蛋白的表达有关。     

亚硒酸钠对全脑缺血再灌注脊髓损伤的保护作用

目的探讨亚硒酸钠对全脑缺血再灌注所致脊髓损伤的保护作用及其机制.方法家兔18只,随机分成假手术组,缺血再灌注组,亚硒酸钠预防组.采用改进的缺血再灌模型对家兔全脑缺血10min复流1h,重复1次,术后12h取材测定血清和脊髓组织匀浆中GSH-Px活力;电镜观察脊髓前角运动神经元形态的改变.结果亚硒酸钠预防组脊髓组织中GSH-Px活力明显增加,与缺血再灌注组比较有显著差异(P＜0.01),血清中GSH-Px活力也明显增加,与缺血再灌注组比较有显著差异(P＜0.01);电镜观察亚硒缺钠预防组能使脑缺血再灌注所脊髓前角运动神经元的损伤明显减轻.结论亚硒酸钠对缺血再灌注所致脊髓神经元损伤有明显的保护作用.     

亚硒酸钠、维生素E对被动吸烟大鼠肺部炎症和抗氧化能力的影响

目的研究亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟大鼠肺部炎症和抗氧化能力的影响。方法将大鼠随机分为5组(每组10只),A组:正常对照组;B组:模型组;C组:每天吸烟3次,亚硒酸钠灌胃;D组:每天吸烟3次,维生素E灌胃;E组:每天吸烟3次,维生素E+亚硒酸钠灌胃,连续6周。通过肺组织HE染色观察气道炎症改变、收集支气管肺泡灌洗液进行细胞计数并分类。取血测活性氧类物质(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)。结果各用药组气道炎症浸润较被动吸烟组明显减轻,其SOD、GSH-Px含量均有不同程度的升高(P<0.05),ROS和MDA含量降低(P<0.05)。结论亚硒酸钠、维生素E可对抗被动吸烟引起的氧化损伤和清除过量自由基的作用,从而减轻肺部炎症。