GITC柱前手性衍生化HPLC测定吡喹胺光学异构体纯度

以乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,用反相高效液相色谱法成功地拆分了吡喹胺(1,3,4,6,7,11b-六氢-2H吡嗪[2,1-a]并异喹啉-4-酮)光学异构体。在此基础上建立了测定吡喹胺光学异构体纯度的方法,并已用于d-和l-吡喹胺纯度的测定。     

重组人GM-CSF-IL_3融合蛋合(G_3)单克隆抗体的研制和鉴定

用重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子－白细胞介素３（ｒｂＧＭ－ＣＳＦ－ＩＬ３）融合蛋白（Ｇ３）作为免疫原．通过Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术建立了两株稳定分泌抗ｒｈＧＭ－ＣＳＦ－ＩＬ３（Ｇ３）单克隆抗体的杂交瘤细胞株．分别命名为ＭＧ３１和ＭＧ３２。经鉴定，两种单抗均为小鼠ＩｇＧ１亚类。其染色体众数分别为９１和８６．并能特异地识别分子量约３０ＫＤ的Ｇ３。ＭＧ３１和ＭＧ３２经３个月传代培养及冻存复苏．在培养沿及Ｂａｌｂ／ｃ小鼠腹水中均能产生而滴度抗体。抗Ｇ３单克隆抗体的获得为深入研究Ｇ３的亲和层析纯化、Ｇ３的免疫学测定及其生物学特性提供了必要的条件。     

茅莓总皂苷的主要药效学研究

目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)的主要药效学和急性毒性。方法:观察TGRP对断尾小鼠对出血时间的影响,对肝素化小鼠出血时间和出血量的影响;对小鼠常压耐缺氧生存时间的影响;对断头小鼠喘气时间的影响;结扎双侧总动脉建立小鼠脑缺血模型,观察TGRP对小鼠6h、12h死亡率和存活时间;采用颈动、静脉旁路方法观察TGRP对大鼠实验性血栓形成的影响。结果:TGRP非常显著的延长断尾小鼠出血时间;对肝素化小鼠TGRP使小鼠出血量明显增加;延长小鼠常压缺氧生存时间;延长断头小鼠喘气时间;降低结扎双侧总动脉小鼠死亡率,延长存活时间;同时,对大鼠血栓形成有明显抑制作用。结论:TGRP对脑缺血缺氧有明显的保护作用。     

茅莓的化学成分及药理学研究进展

中药茅莓为民间常用草药,来源于蔷薇科悬钩子属植物茅莓Rubus parvifoliusL·的干燥全草[1]。茅莓为落叶小灌木,生于山坡、路旁、灌丛和草丛中,适应性强,资源十分丰富,分布于河北、山西、陕西、四川以及中南和华东各省[2]。民间将茅莓根用于妇科止血,疗效显著。药理实验表明,茅莓的水提物具有止血和活血化淤作用,并且与已成功用于治疗冠心病、心绞痛等多种心血管疾病的活血化淤药物丹参的药理作用相同[3]。近年来,陆续有茅莓的相关研究论文发表,如郑永玲等[4]发现茅莓提取物对脑缺血有保护作用,王继生等[5]发现茅莓提取物分离出来的茅莓总…     

甲磺酸甾醇类药物诱导HL60细胞分化及其蛋白质组表达差异的研究

目的研究新的甲磺酸甾醇类药物(NSC67657)对HL60细胞的诱导分化作用,并对HL60细胞在药物诱导分化前后的蛋白质组表达差异进行分析。方法首先在基因和蛋白水平验证NSC67657对CEBPα的诱导作用;然后采用MTT法探索在不同药物浓度作用下HL60细胞的增殖水平;采用细胞化学染色了解HL60细胞药物作用后的大概分化方向;然后采用流式细胞仪检测细胞在不同时间、不同药物浓度作用下细胞表面分化抗原的表达,筛选最佳药物诱导浓度和时间;再用流式细胞技术和电镜观察,对以最佳的药物浓度和诱导时间作用下HL60细胞进行细胞周期和超微结构观察,以及预测在该药物作用浓度和时间下是否有凋亡发生;最后应用改良双向电泳技术对药物作用前后HL60细胞蛋白质组进行分离,并对差异蛋白点进行质谱分析。结果NSC67657可以促进CEBPα基因和蛋白的表达增高。通过比较可见药物处理后的HL60细胞增殖受抑,细胞化学染色的结果表明NSC67657处理后的HL60细胞向单核系分化,并以药物浓度为10μmol·L-1、连续诱导5d为最佳。处理后的细胞G0～G1期数目增多,流式细胞检测和电镜观察都显示无凋亡现象发生。经过双向电泳分离药物处理前后的HL60细胞全蛋白质组,发现有14个蛋白点仅在分化细胞检测到,20个蛋白点仅在未分化细胞检测到。结论NSC67657可以促进CEBPα基因和蛋白的表达升高,并可诱导HL60细胞向单核系分化,分离分析处理前后细胞的蛋白表达差异,为后续关键蛋白的筛选及其功能研究奠定了基础。     

胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的探讨应用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术（钳夹法）对模型动物进行胰岛素敏感性评价的可行性。方法雄性Wistar大鼠喂以富含不饱和脂肪酸的特殊高脂肪膳食5周。应用钳夹法评价大鼠的胰岛素敏感性。结果与常规喂养大鼠相比，高脂膳食组的葡萄糖输注率显著降低，空腹血浆胰岛素显著升高。同时，高脂膳食大鼠出现高脂血症。结论应用钳夹法评价大鼠的胰岛素敏感性较为灵敏、准确、可靠。     

茅莓水提取物对大鼠局灶性脑缺血-再灌注的保护作用

目的:研究茅莓水提取物对局灶性脑缺血-再灌注的保护作用。方法:采用大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血／再灌注模型;以HE染色观察神经元形态病理改变,用氯化三苯四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死范围,采用测试药盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量。结果:茅莓水提取物1,2 mL·kg-1可明显减轻神经元形态病理改变,改善大鼠异常神经症状,使脑缺血-再灌注大鼠缺血区脑组织的SOD,GSH-Px活力提高,MDA含量减少。结论:茅莓水提取物对脑梗死有保护作用,其作用机制可能与抗自由基有关。     

重庆垫江牡丹皮生产历史与生产现状分析

通过深入垫江县各乡镇调查、考证表明,垫江丹皮生产历史悠久,产量大,质量好,并长期出口,垫江县太平镇素有“丹皮之乡”的美称。全县现种植规模达11000多亩,集中分布在明月山内槽地带毗邻的5个乡镇。针对目前生产中存在的问题,提出了推进丹皮产业化发展的建议。     

羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后线粒体蛋白质组表达差异的定量分析

目的 对羟基喜树碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡前后的线粒体进行定量蛋白质组学研究.方法 用羟基喜树碱诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,提取线粒体并鉴定其纯度;用可裂解的同位素标记的亲和标签技术标记线粒体蛋白质,利用二维液相色谱串联质谱分析鉴定蛋白质.结果 获得了羟基喜树碱诱导细胞凋亡前后的高纯度线粒体;分析鉴定了细胞凋亡前后,相对表达量差异有统计学意义的蛋白质74种,其中42种线粒体蛋白质在细胞凋亡后的表达量下调,32种蛋白质的表达量在凋亡细胞中上调.这些差异蛋白的分子功能主要表现为能量代谢和核酸的翻译、转录、复制以及细胞骨架等.结论 获得了羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后的线粒体差异蛋白信息,将促进对癌细胞凋亡机制及羟基喜树碱药理作用的深入理解,同时,实验所采用的整合技术平台将有助于亚细胞定量蛋白质组学研究.