益康唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究(英文)

目的为了研究益康唑(Econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞 WEHI-3凋亡的机制。方法利用 Annexin-V/PI 双染实验测定细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]i),并抽取 WEHI-3细胞内质网部分蛋白,利用 Western blot 测定 Caspase-7、Caspase-12的蛋白表达。结果 Econazole 作用后 WEHI-3出现典型的凋亡改变。细胞内游离[Ca~(2+)]i 较对照明显升高,Western blot 结果显示随着细胞内钙离子浓度的提高,Caspase-12和 Caspase-7表达逐渐增加。结论 Econazole 能诱导 WEHI-3细胞凋亡,caspase-12在此过程中起重要作用。     

Caspase-3在脐血CD34+造血干/祖细胞中的表达及其意义

目的 为了探讨脐血CD34~+干/祖细胞在不同细胞因子支持下体外扩增过程中Caspase-3表达及意义,我们采用了RT-PCR、Western blot和流式细胞仪技术测定了脐血CD34~+细胞在体外扩增过程中的生物学特性及Caspase-3的表达。检测结果显示,Caspase-3mRNA在新鲜分离的脐血CD34~+细胞中低水平表达,在细胞因子支持下体外培养3天,扩增的CD34~+细胞中Caspase-3mRNA和蛋白质水平表达上调,但在这两种细胞中仅能检测到分子量为32KDa的非活性酶原形式的Caspase-3;随着体外培养时间的延长,在IL-3,IL-6和GM-CSF组合条件下,Caspase-3被激活,可检测到分子量力20KDa的裂解片段。本研究表明,虽然造血干细胞的凋亡是个复杂的过程,但在脐血CD34~+干/祖细胞体外扩增过程中,Caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要的作用。     

Caspase抑制剂对冻存脐血造血干/祖细胞的保护效应

脐血因其独特的生物学特性、资源优势及临床移植适应证广泛，已成为造血干细胞移植（HSCT）的细胞来源之一。如何将脐血造血干／祖细胞进行有效的保存和复苏，降低其冻存损伤，是HSCT治疗的关键环节之一。随着对低温冻存理论的深入认识，人们发现细胞凋亡参与了细胞冷冻损伤的分子机制，造血干细胞凋亡严重损害其克隆形成能力和移植后的造血重建功能。     

急性单核细胞白血病M5a和M5b的细胞生物学和临床行为比较分析

目的比较急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学和免疫表型差异,并了解其与临床行为之间的相互关系。方法采用骨髓直接法和24h短期培养法制备染色体标本，用G显带技术对58例成人初发急性单核细胞白血病进行核型分析，并用免疫荧光标记法及流式细胞术进行免疫表型检测，同时对其临床资料进行回顾性分析。结果58例患者中正常核型28例，异常核型30例，其中，正常核型在M5b出现率高于M5a（P〈0．01）。异常核型中11q23异常和＋8染色体在M5a中均较M5b常见（P〈0．01）；CD68和CD11b在M5a的表达高于M5b（P〈0．01）；不同患者急性单核白血病细胞的免疫表型呈现一定的异质性，但急性单核细胞白血病M5a、M5b两亚型的临床行为未见显著差异。结论M5a和M5b存在各自较独特的细胞生物学特点。     

大鼠非经胸体外循环模型的建立

目的建立大鼠非经胸体外循环(CPB)模型。方法选体重350～500g雄性SD大鼠10只,采用颈动脉灌注、腔静脉右心房引流建立CPB,转流时间1h,监测血流动力学和血气变化。结果9只大鼠顺利建立CPB,1只死于大出血。CPB期间平均动脉压(MAP)维持在60～80mmHg,平均灌注流量(85.0±12.5)ml·kg-1·min-1,动脉血气正常。CPB停止后心肺功能顺利恢复。结论本方法建立的大鼠CPB模型操作简单、经济实用,是进行CPB基础研究的理想模型。     

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。     

首乌藤超微饮片的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 研究首乌藤超微饮片的指纹图谱.方法 色谱柱为大连依利特公司Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5μm).流动相为乙腈-1%冰醋酸,柱温为35℃,流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,进样量为20μl.结果 初步建立了首鸟藤超微饮片的HPLC指纹图谱,标定了9个共有指纹峰.结论 利用首乌藤超微饮片高效液相色谱(HPLC)指纹图谱可以较好地反映首乌藤超微饮片的内在质量.     

四川省婚检率下降成因及对策初探

目的:为了解人们对现有婚检的态度和婚检下降的主要原因。方法:在5个市州对围婚期青年进行调查。结果:①人们健康和生殖健康知识缺乏。②婚检服务欠完善。结论:①加强健康教育。②进行政府干预。③完善婚检服务。④加强监管。     

抗慢性粒细胞性白血病bcr/abl mRNA真核表达载体的构建

目的：构建一个含M1RNA、具有特异性抗慢性粒细胞性白血病（CML）细胞融合基因bcr/ablmRNA的真核表达载体，以用于CML的分子靶向治疗。方法：以pTK117为模板，通过PCR方法合成一个带有导引序列（GS）的M1RNA，再将PCR产物克隆到真核表达载体pNAV-1上，得到重组质粒pAVGS4，转化大肠埃希菌JM109，以碱裂解法小量抽提，酶切电泳鉴定，并测序鉴定。结果：以EcoRI和SalI酶切、1％的琼脂糖凝胶电泳显示在500和6500bp附近各有一条明亮的条带。应用PCR方法测序的结果与模板序列一致。结论：构建的pNAV-1经酶切和测序鉴定，与目标序列一致，含有核酶、具有抗bcr/abl mRNA的真核表达载体构建成功，预期可用于CML细胞株和原代细胞的实验研究。     

老年女性患者导尿管气囊注水量对留置效果的影响

目的探讨老年女性患者留置导尿过程中,气囊注水量对留置效果的影响。方法将164例神经内科老年女性 需留置导尿患者(平均年龄74.18岁)随机分为对照组与观察组,各82例。观察组患者导尿管气囊内注入15～20 ml生理盐水固定,对照组气囊内注入生理盐水5～8ml。结果观察组溢尿率显著低于对照组(P<0.01),且留置导 尿管2周泌尿系感染(发热、混浊血性尿液、膀胱刺激征、尿道口异常分泌物等)发生率显著低于对照组(P<0.01)。 结论老年女性患者气囊导尿管注入15～20ml生理盐水,可有效地防止尿液外渗及导尿管脱出,减少泌尿系感染 率的发生,对临床留置导尿技术有指导意义。