肝癌相关神经节苷脂的分离纯化及其结构分析

从BERH-2大鼠肝癌组织中分离纯化与肝癌相关的神经节苷脂(Gg-A、Gg-B),用酸解、酶解,气相色谱、气相-质谱联用测定其糖残基顺序、异头结构、糖基的连接位点、脂肪酸成分、唾液酸组成等。Gg-A、Gg-B除长链脂肪酸百分含量不同外,其结构均为NeuAc-NeuAc-3Galβ1-4Glcβ1-Ceramide。     

人精子鞘糖脂组分的纯化与分析

为进一步探索人精子鞘糖脂(hsGSL)在精卵识别中的重要作用,本文采用了Ladisch分配,Vance法,高效薄板层析及薄层扫描等方法对hsGSL进行了纯化、鉴定和定量.人精了神经节苷脂(hsGls)中脂结合唾液酸的含量为0.18±0.05μg/10~8个精子细胞;人精子中性鞘糖脂(hsNGSL)中鞘氨醇的含量为0.64±0.10μg/10~8个精子细胞.hsGls主要由GM3(26.93±8.82%),GM2(15.60±3.35%),GD3(28.94±4.02%),GDla(18.56±3.42%),及GTlb(9.87±1.56%)五种组分组成.hsNGSL主要由CMH(10.95±4.41%),CDH(16.09±2.0%),CTH-1(32.73±0.09%),CTH-2(20.95±3.05%),CQH(11.24±1.74%)及CPH(8.04±0.57%)六种组分组成.     

人胃癌、乳腺癌组织中神经节苷脂的提纯及其薄层层析图谱的分析

本文比较分析了人胃癌和乳腺癌与对照组织中神经节苷脂(GLS)结合型唾液酸含量和GLS高效硅胶薄层层析图谱的差别。胃癌及乳腺癌组织中GLS结合型唾液酸含量较对照组织明显升高,分别为对照组织的1.4倍和2.8倍。胃癌组织的主要GLS组分与对照组相比虽无明显改变,但在移动距离相当于GD_(1a)—Gal NAc处出现一条小带,含量仅约4.7%,而在对照组织的GLS图谱中未见此带。乳腺癌组织的GLS图谱中,位于GD_3和GD_(1a)之间的一条带较对照明显增多,由3.7%增加到13.6%,实际含量增加9.7倍。同时,在GM_3和GM_2之间出现一条对照组织中没有的带,含量甚微,仅约为1.98%。     

组织神经节苷脂的简易快速薄层分离纯化法

组织神经节苷脂(Gls)传统的分析方法,是用薄层层析,在分析之前要先进行操作步骤繁杂的分离纯化。Harth等于1978年报告用组织粗提液直接点样于层析薄板,再以三种不同的溶剂系统展开的方法,得清晰的薄板层析图谱。它们的展开剂为:1.氯仿;2.氯仿-甲醇-水(70:30:4,V/V/V);3.氯仿-甲醇-0.25%KCl(60:35:8,V/V/V)。此法简便,但未能推广采用。根据我们的经验它未能推广的原因是粗提液颜色较深,对唾液酸测定干扰甚大,薄板上的点样量较难掌握。我们用硅胶G层析薄板(5×20厘米),将组织的氯仿-甲醇粗提液直接点样于其上,以Harth的前两种展开剂展开后,用问苯二酚显色,参考定位,刮下含Gls部分硅胶,经洗脱、离心、氮气吹干后,溶于C:M(1:1),以唾液酸含量为参数,点样于高效层析(HPTLC)薄板上,在氯仿-甲醇-0.15%CaCl_2(60:40:9,V/V/V)展开,可得良好的图谱。这一改良可去掉呈色物质,大大减少HPTLC板的用量,降低了成本,同时本法未经Folch分配,有可能获得比传统方法更为真实的结果。     

抗磷酸酪氨酸抗体的制备、纯化和应用

目的 制备抗磷酪氨酸多克隆抗体,利用引抗体研究缺血再灌注对海马磷酸酪氨酸蛋白（ｐ－ｔｙｒ－ｐｒ）免疫反应性的影响。方法 以偶联磷酸化酪氨酸的牛血清白蛋白（ＢＳＡ）作为免疫原免疫兔获得抗血清。将磷酸酪氨酸偶联到溴化氰活化的ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ上。抗血清经到酪氨酸－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱纯化,所得抗体专一性强,并经ｄｏｔ ｂｌｏｔ鉴定。结果 抗体仅对酪氨酸磷酸化的蛋白质包括酪氨酸磷酸化的血清白     

大鼠实验性肾内钙化及组织化学改变的观察

本研究的目的是用高磷饲料(普通饲料加NaH_2PO_4·2H_2O,使磷含量为1％)诱发大鼠肾内钙化时,对其钙化灶的形成与分布作组织学动态观察。实验分三组,第Ⅰ组:雄大鼠57只,分为9组,每组6至7只,Ⅰ-1组于实验当日喂高磷饲料前处死;Ⅰ-2至Ⅰ-9组依次分别于实验后第3、5、7、9、16、24、32、50天处死,取左肾的一半(余肾做生化分析),及心、肝、脾、肺、胰、小肠、大肠,石腊包     

早早孕期人子宫蜕膜蛋白质的变化

为进一步阐明着床的分子机制,为生育的控制和不孕症的治疗提供新的实验基础,利用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）及银染法对正常人增殖期（ＰＰ）、分泌期（ＳＰ）、以及尽可能接近于着床期（早早孕期）包括二级绒毛期（ＳＶＰ）和三级绒毛期（ＴＶＰ）的子宫内膜蛋白质进行了研究,结果发现：子宫内膜水溶性蛋白质于增殖期含量最高,增殖期后降低,存在显著性差异（Ｐ＜００５）,而十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）溶解蛋白在各个功能时期无显著性差异（Ｐ＞００５）;早早孕期人子宫蜕膜蛋白质有阶段特异性变化,有４５７千道尔顿（ｋＤ）阶段特异性蛋白出现。其确切的功能以及在胚泡着床过程中的作用均待进一步阐明     

18种中草药中痕量锗的定量测定

用混酸（发烟硝酸＋浓硫酸）回流消化中草药样品，Fe（OH）3共沉淀富集锗，苯基荧光酮－溴化十六烷基三甲胺（CTMAB）胶束增溶分光光度法测定了18种中草药中的锗含量，灵芝和白花蛇舌草含量较高，分别为2．46和0．35μg／g。本法检出界限为193ng／g，变异系数为0．89％，在不同中草药中的回收率为91％～93％。     

神经节苷脂GM3对国人单核样白血病细胞系J6—2细胞的促分化作用及促分化前后鞘糖脂、磷脂、蛋白激酶C活性的比较研究

神经节苷脂(Gls)广泛存在于各种脊椎动物细胞质膜的外侧面。它不仅是细胞膜的组分之一,而且与细胞的物质代谢、分化、增殖及肿瘤发生也密切相关。Gls GM_3对白血病细胞系促分化的研究还刚刚起步,对 Gls 促分化前后细胞     

人子宫肌肉及内膜的鞘糖脂及其在月经周期、妊娠和老化过程中的变化

本文报告了人子宫肌肉及内膜在成熟及生殖的不同阶段中鞘糖脂的组成。子宫肌肉和内膜的主要中性糖脂,经高效薄板层析证实都为globo-系列的Gb_3及Gb_4。主要的酸性糖脂(神经节苷脂)同样都为GM_3及GD_3,其次为GM_1、GD_(1a)及GT_(1b)。妊娠时,GD_3的表达变弱,而GM_3表达增强。GM_3/GD_3的负相关表达从其合成相关的糖基转移酶的活性变化上也有佐证,即:α2→3唾液酸基转移酶活性在妊娠时增加约3倍,而α2→8唾液酸转移酶活性则下降80％。上述结果提示人们注意子宫组织的糖脂、其表达的调节、以及它们在生殖及受精过程中的作用。