暴发性肝衰竭小鼠细菌侵袭肠黏膜方式的研究

目的 通过研究细菌侵袭肠黏膜屏障的方式,探讨暴发性肝衰竭(FHF)并发自发性腹膜炎(SBP)的机制.方法 取240只雄性BALB/c小鼠,分为等渗盐水(NS)组(40只)、脂多糖(LPS)组(40只)、氨基半乳糖(GalN)组(40只).FHF模型组(120只).分别腹腔注射相同体积的NS、LPS(10μg/kg)、GalN(800 mg/kg)、LPS(10μg/kg)/GalN(800 mg/kg).注射处理后,分别于2、6、9、12 h和24 h处死小鼠(每个时间点处死8只小鼠).实验小鼠均在相应时间点摘取眼球,留取血清,并断头处死动物,留肝脏及大肠组织标本.用全自动生物化学分析仪检测ALT;对肝组织和大肠组织进行HE染色检测;透射电镜观察大肠黏膜超微结构及细菌侵袭肠黏膜的方式.用SPSS13.0统计软件进行数据分析,两组间ALT水平的分析采用Mann-Whitney U检验.结果 FHF模型组ALT水平、肝组织病理学检测结果及病死率和临床表现均符合FHF的诊断标准.4组小鼠注射处理后9 h,HE染色发现大肠组织仅有轻微水肿及少量炎性细胞浸润,此时,透射电镜下观察发现FHF模型组肠上皮细胞微绒毛断裂、脱落、变短,紧密连接(TJs)不完整,细胞器变化明显,HE染色发现FHF模型组肝脏呈成片的出血性坏死,残存的肝细胞肿胀,出血坏死区见较多炎性细胞浸润,但NS组、LPS组、GalN组肝脏组织病理形态及大肠黏膜超微结构变化不明显.FHF模型组注射处理后6～9 h,细菌以胞饮的形式穿入肠壁,细菌穿入肠壁区域的肠道黏膜绒毛脱落,TJs出现断裂,注射处理后12 h发现穿入的细菌以囊胞的形式存在.结论 LPS(10μg/kg)/GalN(800 mg/kg)联合注射建立的FHF小鼠模型是成功的.FHF时,肠黏膜TJs的断裂可能为肠道内细菌进入肠黏膜提供了条件,TJs的断裂可能是FHF并发SBP的原因之一.

Abstract：

Objective To explore the mechanism of fulminate hepatic failure (FHF) complicated with spontaneous peritonitis (SBP) through the research of bacteria invading the intestinal mucosa barrier.Methods 240 BalB/c male mice were divided into four groups as isotonic NS group (n = 40), lipopolysaccharide (LPS) group (n = 40), galactosamine (GalN) group (n = 40) and FHF model group (n = 120). Each mouse received same volume of NS, LPS (10 μ g/kg), GalN (800 mg/kg) or LPS (10 μ g/kg)/GalN (800 mg/kg)intraperitoneal injection according to its group. 8 mice were executed at 2, 6, 9, 12 and 24 hours after injection, respectively, and the liver and intestinal tissue samples were taken at the same time. ALT was measured by automatic biochemical analyzer and was compared between groups using Mann-Whitney U test.Liver and intestinal tissue received HE staining. The ultrastructure of intestinal mucosa and the method by which bacteria invaded the intestinal mucosa were observed by transmission electron microscopy. All data were analyzed by SPSS13.0 statistic software. Results ALT level, results of hepatic pathology, mortality and clinical manifestations of mice in the FHF model group met the diagnostic criteria of FHF. Intestinal tissue was found with slight edema and little inflammatory cells infiltration through HE staining in all the 4 groups of mice 9 hours after injection. Microvilli were found broken, shed and shorten in the intestinal epithelial cells with incomplete tight junction (TJs) and obviously changed organelles in the FHF model group of mice observed by transmission electron microscope. Mass hemorrhagic necrosis of liver cells with remnant liver cells swelling and many inflammatory cells infiltration by HE staining in the FHF model group. But the changes in hepatic pathology and intestinal mucosa ultrastructure were not so obvious in the mice of NS, LPS and GalN groups. Bacteria penetrated the intestinal wall by pinocytosis 6-9 hours after injection in the FHF model group, the microvilli were broken off and TJs turned rupture in the areas that the bacteria penetrated.The bacteria were found in the form of cyst 12 hours after injection. Conclusions LPS (10 mg/kg)/GalN (800 mg/kg) combined injection was successful in establishing the FHF mice model. The rupture of TJs may provide conditions for intestinal bacteria to penetrate the intestinal mucosa in FHF. Rupture of TJs may be one of the reasons why FHF was complicated with SBP.     

骨髓间充质干细胞对大鼠减体积肝移植术后肝细胞再生与修复的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）对大鼠减体积肝移植术后肝脏再生与修复的影响。方法采用生化、免疫组化等方法检测术后不同时间的血清和肝脏标本。（1）取同周龄Wistar大鼠骨髓体外培养BMSCs,标记CSFE荧光后制备悬液;（2）建立大鼠50%减体积肝移植模型（供体鼠为SD大鼠,受体鼠为Wistar大鼠）,分为实验组（取BMSCs悬液经门静脉植入）和对照组（取等量生理盐水经门静脉注射）,观察大鼠生存状态,测量肝再生的相关指标。结果 （1）成功分离培养BMSCs;（2）术后2h,大鼠均自由活动饮水;（3）实验组肝组织中存在大量BMSCs,术后第2、3 d实验组肝体比显著高于对照组。病理显示：实验组肝细胞损伤较对照组轻微。结论植入BMSCs后,可以促进大鼠减体积肝移植术后肝细胞增殖和修复。     

医药分业面临的问题与对策

建国以来,我国一直采用医药合业模式,医院以国家的社会福利载体的身份出现,实行低于成本的医疗服务收费,收支差额一部分由医院销售药品所得的15％差价利润补偿,其余由政府财政拨款补偿。在计划经济体制下,由于医院的收入上缴,费用支出由上级下拨,医院无权自行发放奖金,因而医院职工的经济收入与医院的经济效益无关。同时,药品生产企业按国家计划进行生产,其产品由国家统购包销,无需争市场、搞推销。因此,在这种情况下,采用医药合业模式不仅满足了我国人民求医用药的传统习惯,而且医生能较好地从患者利益出发全权代理患者选择药品种类及用量,基本上实现了医疗的安全有效及用药的经济合理,同时使政府财政对医院的经济补偿机制得以最大限度地简化。医药合业模式在我国的特定历史时期和历史条件下无疑起到了积极的作用。 改革开放以来,随着计划经济向市场经济的转变,使医药合     

重组人促红素-β注射液联合常规治疗在脑损伤早产儿中的应用效果

目的：观察重组人促红素-β注射液联合常规治疗在脑损伤早产儿中的应用效果。方法：回顾性分析2020年2月至2022年2月该院收治的86例脑损伤早产儿的临床资料,按治疗方案不同分为研究组和对照组各43例。对照组采用常规治疗,研究组在对照组基础上予以重组人促红素-β注射液治疗,比较两组治疗总有效率、新生儿行为神经测定（NBNA）评分、血气分析指标[动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、pH]水平和血清细胞因子[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、中枢神经特异性蛋白（S100β）、髓鞘碱性蛋白（MBP）]水平。结果：研究组治疗总有效率为93.02%,明显高于对照组的74.42%,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,两组PaCO2、HIF-1α、NSE、S100β、MBP水平低于治疗前,且研究组低于对照组,两组pH水平、NBNA评分高于治疗前,且研究组高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：重组人促红素-β注射液联合常规治疗应用于脑损伤早产儿可提高治疗总有效率和NBNA评分,改善血气分析指标水平,以及降低血清细胞因子水平,效果优于单纯常...     

新型封闭式腹水超滤系统初步临床应用观察

腹水浓缩回输是治疗顽固性肝硬化腹水的有效方法之一 ,但国内一直缺乏理想的中空纤维腹水超滤器 ,为此我们应用一种新型封闭式腹水超滤系统 ,对其性能及临床疗效进行观察 ,现报告如下。1　临床资料1 1　一般资料　我院 1999年 1月～ 2 0 0 0年 8月完成了 56例腹水浓缩回输术治疗 ,观察 2 1例 ,男性14例 ,女性 7例 ,年龄 ( 61.2± 10 .4 )岁。1 2　应用指征　均为肝炎肝硬化患者 ,且限钠、限水、利尿、静脉输液白蛋白无效的顽固性腹水 ;ＣｈｉｌｄＣ级 ,无肝性脑病者 ,腹水均为漏出液 ,细胞培养阴性。2　器材和方法选用德国费森尤斯公司生产…     

门脉高压性胃病与肠道菌群失调及内毒素相关性研究

目的　探讨肝炎后门脉高压性胃病 (PHG)发病机制、门脉高压时肠道菌群的分布以及与内毒素之间的关系、药物治疗对肠道菌群和内毒素的影响。方法　选择 2 0 0 2 - 0 2～ 2 0 0 3- 12大连市第六人民医院住院的肝炎后肝硬化及门脉高压性胃病患者 ,均做电子胃镜、治疗前后大便菌群分析、鲎实验检测血浆内毒素 (LPS)。结果　门脉高压胃病组与肝炎后肝硬化组和对照组相比较 ,拟杆菌、双歧杆菌显著减少 ;而肠杆菌科细菌、酵母菌显著增加。门脉高压胃病组与肝炎后肝硬化组血内毒素较对照组均显著增加 (P <0 0 1)。结论　内毒素与肠道菌群产生异常变化可能对门脉高压性胃病的发病有直接或间接的影响。     

他克莫司在体外对肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15增殖的影响

目的：研究他克莫司（tacrolimus ,FK506）在体外对肝癌肿瘤株HepG2和乙肝相关肝癌株HepG2.2.15增殖的影响。方法：体外培养肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15,采用MTT法、流式细胞技术,分别检测细胞增殖、细胞周期、CyclinA。结果：FK506可以显著抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,其抑制增殖作用随剂量增加而增强;FK506诱导细胞产生G0/G1期阻滞,这种抑制作用有浓度依赖性;FK506对周期蛋白CyclinA表达的影响呈浓度负相关性,FK506浓度越高,周期蛋白CyclinA表达越少。结论：FK506可以抑制肝癌细胞HepG2和乙肝相关肝癌细胞HepG2.2.15的增殖,这种作用可能与诱导细胞周期阻滞有关。     

肝移植后乙型肝炎病毒再感染患者的病毒S区与P区重叠基因变异

目的 探讨乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)和拉米夫定对肝移植术后HBV再感染患者的HBV S基因与P基因重叠区变异的影响.方法 对2002年6月-2003年12月320例因乙型肝炎相关性终末期肝病行原位肝移植手术患者随访1.5～3.0年,选择资料完整的HBV再感染者14例为研究对象.直接基因测序法分析术前、术后HBV S基因及重叠P基因的序列改变情况;荧光定量PCR检测HBV DNA含量;微粒子捕捉酶免疫法检测血清HBIG浓度. 结果 14例患者术前、术后S区与P区氨基酸变异数量无明显改变,变异位点略有改变.基因型检测结果显示12例为C型,2例为B型,无其他基因型.S区"a-决定簇"基因变异发生在I126S、T131N、S143T和G145R位点,"a-决定簇"的上游和下游变异的有L110F、I113S和T160K位点.S区核苷酸突变时S区氨基酸存在同义与错义变异,可引起相应的P区氨基酸错义变异,其中包括已知的拉米夫定耐药位点变异及其以外的多位点氨基酸变异,且变异位点差异较大,大部分变异位点移植前已存在变异.术前有4例血清HBV DNA低于检测限,术后均阳性.HBIG浓度为0U/L者7例,≤100 U/L 5例,＞100U/L2例.结论 肝移植术后免疫抑制剂治疗对氨基酸变异位点的数目影响不大,对变异位点的位置有一定的影响;除了"a-决定簇"的基因变异点以外,"a-决定簇"的上游或下游基因位点也存在变异,可能是引起HBV再感染的另一原因;S区核苷酸位点的突变可引起S区氨基酸的同义和错义变异,并可同时引起重叠P区相应位点的错义变异,其临床意义有待进一步探讨.     

重症肝炎与肠粘膜损伤

重症肝炎是病毒性肝炎中最严重的病症 ,研究认为重症肝炎与肠粘膜损伤关系密切。机体内环境的改变 ,细胞因子的激活 ,细胞信号转导的改变及细胞凋亡的失调等 ,均与肠粘膜损伤的发生有关。