不同转移潜能癌细胞亚系分离鉴定和细胞克隆模型建立及在转移机理研究中的应用

不同转移潜能癌细胞亚系分离鉴定和细胞克隆模型建立及在转移机理研究中的应用高进，刘玉琴，韩立群，于晓，赵雪梅等（中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所，北京１００００５）本研究包括对３个转移性癌细胞，系即动物癌细胞系ＭＦＣ、ＬＡ７９５和人癌细胞...     

2-氯脱氧腺苷(2-CDA)诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的机制探讨

目的探索2-氯脱氧腺苷(2-CDA)诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的机制。方法取对数生长期A375细胞,MTT比色法检测2-CDA对其体外增殖的抑制作用,Annexin V/PI双标法流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测细胞内蛋白水平的变化。结果 2-CDA对A375细胞增殖具有明显抑制作用,且随浓度增加及作用时间延长而逐渐增强,48h时的半数抑制浓度(IC50)为3.04μmol/L;Annexin V/PI双染并经流式细胞术检测显示2-CDA能够明显诱导细胞凋亡;Western blotting检测显示2-CDA能够显著下调Stat3的磷酸化水平,2-CDA作用后细胞凋亡信号蛋白caspase-3发生剪切而活化,导致其下游蛋白PARP发生剪切而诱导细胞凋亡。结论 2-CDA可通过抑制Stat3蛋白活性并激活Caspase-3而诱导A375细胞发生凋亡。     

O型血型孕妇血浆中IgG抗体效价与孕妇年龄、孕期、孕次关系探讨

目的探讨O型血型孕妇IgG抗A（B）抗体效价与孕妇年龄、孕期、孕次的关系,预防母婴血型不合HDN发生。方法选取2012年5月～2013年5月在我院产前诊断中心接受检查的302例0型血型孕妇,其中丈夫均为非O型。采用微柱凝胶法检测孕妇血浆中IgG抗A（B）抗体效价,分析孕妇年龄、孕期和孕次与孕妇血浆IgG抗A（B）抗体效价的关系。结果302例夫妻ABO血型不合0型血型孕妇血浆IgG抗A（B）抗体效价随孕妇年龄、孕次的增长而升高,即母婴血型不合新生儿发生HDN的患病率也随之升高。结论监测夫妻ABO血型不合的0型血型孕妇不同孕龄、孕期、孕次和血浆中IgG抗A（B）抗体效价,可预测ABO-HDN的发生。     

拮抗细胞程序性坏死——机体应激损伤防护的新策略

应激是机体对内外环境变化做出的总体反应,过度应激导致机体的组织坏死和器官衰竭,从而诱发应激损伤。细胞程序性坏死是一种新鉴定的可调控的程序性细胞死亡,具有明确的调控靶点和信号转导通路,且在缺血再灌注、外源微生物感染和炎症反应等应激因素诱导的组织损伤过程中具有重要的调控作用。同时,细胞程序性坏死抑制剂在多种应激损伤动物模型中都表现出显著的预防和治疗效果,从而表明阻断细胞程序性坏死将成为应激损伤预防和治疗的新策略,而细胞程序性坏死的调控靶蛋白也为应激损伤的药物设计提供了新的靶点。     

后装腔内插植放疗与三维后装腔内放疗治疗局部晚期宫颈癌的疗效与剂量学比较

目的探讨后装腔内插植放疗与三维后装腔内放疗治疗局部晚期宫颈癌的疗效与剂量学差异。方法将212例局部晚期宫颈癌患者,按照治疗方法的不同分为A组(106例)和B组(106例)。在体外三维适形调强放疗的基础上,A组采用后装腔内插植放疗,B组采用三维后装腔内放疗。对比两组近期疗效、并发症发生率以及剂量学差异。结果B组患者高危临床靶区D100、D90和中危临床靶区D100、D90均明显低于A组,膀胱、直肠、乙状结肠的D2cm3均明显高于A组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。A组患者总有效率明显高于B组,放射性直肠炎、放射性膀胱炎发生率均明显低于B组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论后装腔内插植放疗能够在提升肿瘤组织受照剂量的同时,降低危及器官的受照剂量,提升近期缓解率、控制率,减少不良反应。     

人多药耐药基因-1及二氢叶酸还原酶基因共转导小鼠造血细胞

耐药基因转导骨髓细胞对化疗病人造血系统的保护作用已受到人们的重视.本研究利用多药耐药基因-1(mdr-1)及二氢叶酸还原酶(dhfr)双基因转染小鼠骨髓细胞,观察造血细胞对两种耐药谱化疗药物的抵抗能力.结果表明,所用逆转录病毒载体转染率达到15%左右,转基因骨髓细胞CFU-GM对taxo1及MTX的耐药能力明显增强,说明外源基因在造血祖细胞中的正确表达;转基因骨髓细胞回输给同系小鼠7个月后,FCM技术仍可检测到外周血白细胞gp170的表达,且其基因组DNA中可检测到mdr-1及dhfr基因特异序列,表明两种基因可能已稳定整合至造血干/祖细胞中.上述结果为以骨髓细胞为靶体的耐药基因治疗提供了有用的实验室资料.     

生物技术在中药资源研究中的应用及其前景

中医药学是中华民族的瑰宝,数千年来为中华民族的繁衍昌盛和世界民族医药学的发展作出了重大贡献。中药作为中医治疗疾病的物质基础,随着人类疾病谱的改变与国际社会“回归自然”潮流的涌起,其用量逐年加大,许多品种供不应求、自然资源濒临灭绝。大力开展中药资源研究,对于保护与保存现有资源、寻找和开发新资源等以达到可持续利用的目的,具有非常重要的意义。生物技术作为一种综合了生命科学与多种现代科学理论与研究手段的高新技术,在中药资源研究领域具有广阔的应用前景。     

FGF2对BMP-Smads信号转导通路的负调节机制初步研究

目的 :利用小鼠前成骨细胞系MC3T3 E1初探FGF2对BMPS Smads信号转导通路的调节机制。方法 :构建含 5个串联的来源于Smad6启动子的R Smads结合序列 (GC2 )的荧光素酶报告基因质粒 ( 5GC2 Lux)。以该质粒探讨FGF2对BMP组成活化型受体I(caALK 2 )激活的Smad5转录调控能力的影响。外源转染去除Smad5分子中MEK ERK通路磷酸化位点的突变体 ,探讨FGF2伙化的MEK ERK对BMPS Smads通路的调节作用。结果 :所构建报告基因质粒能够特异反映Smads的转录激活能力的变化。FGF2能够显著下调BMP组成活化型受体(caALK2 )激活的Smad5转录调控能力。外源转染Smad5突变分子仅能部分逆转FGF2对Smads通路的负调节效应。结论 :FGF2参与调节BMPs活化的信号通路可能不仅限于通过活化MEK ERK信号转导通路来下调Smads转录调控活性     

钙蛋白酶抑制剂对缺血-再灌注心肌肌浆网钙泵功能及其蛋白水平的影响

目的研究钙蛋白酶抑制剂ALLN对缺血-再灌注(I-R)大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA)功能的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常灌注组(对照组)、I-R组、ALLN+I-R组和二甲亚砜+I-R组(DMSO+I-R组),分别检测再灌注15min时冠状动脉流出量(CF)和冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;荧光分光光度计测定荧光强度来反映钙蛋白酶活性;分别采用改良p-NPP法和Millipore过滤技术测定SERCA的活性和ATP依赖的SERCA45Ca2+摄取率,免疫印迹法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与I-R组相比,ALLN+I-R组CF、SERCA蛋白表达水平、SERCA的活性和45Ca2+摄取率显著增高(P<0.01),而LDH漏出量和钙蛋白酶活性显著降低(P<0.01)。结论 ALLN对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,与其抑制钙蛋白酶活性,一定程度减轻I-R损伤对SERCA功能及蛋白表达水平的影响有关。