轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成影响的体内外实验研究

Objective To study influence on angiogenesis of placenta by gene silencing of netrin-1.Methods Netrin-1 gene in human umbilical vein endothelial cells(HUVEC)and placenta of pregnant rats were silenced by RNA interference.The following methods were used in this study,including the phenytetrazoliumromide(MTT)for viability,clone formation for proliferation,transwell for migration,and tube formation for angiogenesis in vitro.The change of fetal growth was recorded.Placental microvessel density in pregnant rats was measured by immunohistochemical CD34 staining in vivo.Results (1)HUVEC:viability and proliferation of HUVEC were remarkably inhibited by gene silencing of netrin-1.which number of clone formation,migration cell,tube formation were from(69±6)%,86±17,37±9 decreased to(46±5)%,46±13 and 17±5(P＜0.05)respectively.(2)Placenta of pregnant rats:after netrin-1gene silenced,fetal weight were decreased from(2.39 ±0.17)g to(2.12±0.10)g(P＜0.05).Placental microvessel density was decreased from(258±38)/mm2 to(197±32)/mm2 in vivo(P＜0.05).Conclusions Gene silencing of netrin-1 could inhibit viability,proliferation,migration,tubal formation of HUVEC and angiogcnesis of placenta.Netrin-1 plays an important role in regulating angiogenesis in placenta.     

妊娠合并胰腺疾病的糖代谢与脂代谢

妊娠是一种特殊而复杂的生理过程.随着胎儿的生长发育,胎儿对母体的物质需求日益增多.为满足胎儿在胚胎期、器官分化发育期和成熟期的需要,母体的代谢及能量需求显著增加,其糖、脂等代谢均会发生一系列相应的生理性变化.     

单个胎儿有核红细胞的DNA分析

目的：获取孕妇外周血中的极少量胎儿有核红细胞（ＮＲＢＣ）,并进行单个ＮＲＢＣ的基因分析,探讨其在产前基因诊断中的价值。方法：将孕妇外周血进行不连续密度梯度离心,将分离后的细胞进行制片,光学显微镜下识别ＮＲＢＣ,然后用显微操作仪获取单个ＮＲＢＣ进行引物延伸预扩增（ＰＥＰ）及Ｙ染色体特异性ＤＹＺ１基因的聚合酶链反应（ＰＣＲ）,以确定其来源于胎儿。结果：单个ＮＲＢＣ的ＰＥＰ－ＰＣＲ法检测结果,６０％检出     

脑卒中后精神障碍调治35例分析

大部分脑卒中患者临床表现为偏瘫、偏盲、偏身感觉障碍、失语、意识障碍等,亦有部分患者以精神症状就诊或脑卒中后继发精神障碍而住院。我们收集到35例进行调治。     

汉语阅读障碍儿童家庭环境因素路径分析

目的 探讨家庭环境因素对汉语阅读障碍儿童的影响,为寻求有效的预防和治疗措施提供理论依据.方法 抽取湖北省武汉市某城区2所普通小学3～5年级587名学生及其家长、班主任教师进行问卷调查;根据国际疾病分类诊断第10版(ICO-10)中阅读障碍的定义,采用逐层筛选的方法筛出汉语阅读障碍儿童,进行相关因素路径分析.结果 筛查出阅读障碍学生23人,发生率为3.92%,其中女生5人,男生18人;路径分析图显示,汉语阅读障碍的内层影响因素有提供资源,鼓励阅读、完成作业困难、亲子共读,外层因素有父母文化水平、家庭经济水平.结论 提供丰富的阅读资源,创造良好的阅读环境,注重亲子共读有助于预防阅读障碍的发生.     

家庭阅读环境对汉语阅读障碍儿童的影响因素分析

目的:探讨家庭阅读背景和家庭阅读环境对汉语阅读障碍儿童阅读能力的影响,为儿童阅读障碍的预防提供理论依据。方法:采取整群抽样的方法,抽取武汉某城区2所普通小学654名3～5年级平均年龄9.37岁学生,根据阅读障碍诊断标准,筛出阅读障碍儿童并和正常儿童作病例对照研究,对他们家庭背景和家庭阅读环境进行评定。结果:阅读障碍儿童和对照组儿童在父母文化程度、父母小学语文数学成绩、父母教育态度一致性、固定阅读时间、鼓励孩子看课外书及买孩子喜欢的书间差异有统计学意义(P0.05)。结论:亲子共读、因材施教对预防儿童阅读障碍有重要作用,而家庭经济地位的作用并不明显。     

UNC5B在人早孕胎盘微血管内皮细胞中的表达及意义

目的:探讨神经轴突导向因子Netrin-1受体在人早孕胎盘微血管内皮细胞(HPMECs)中的表达及意义。方法:采用Percoll密度梯度离心法分离HPMECs,并进行鉴定。实时定量PCR技术检测HPMECs中Netrin-1的6种受体(UNC5A、UNC5B、UNC5C、UNC5D、DCC和neogenin)mRNA的表达;应用RNA干扰技术检测Netrin-1受体对HPMECs凋亡的影响。结果:①成功分离HPMECs,免疫荧光鉴定结果显示Ⅷ因子相关抗原和CD34呈阳性。②实时定量PCR结果显示,Ne-trin-1的6种受体中,仅检测到UNC5BmRNA在HPMECs中存在表达。③转染siRNA-UNC5B质粒后,HPMECs凋亡率较对照组明显下降(P<0.05)。结论:Netrin-1受体UNC5B在HPMECs中表达且能促进HPMECs的凋亡,提示其在胎盘血管形成过程中有重要作用。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的：探讨内皮型一氧化氮合酶基因(eNOS)第4内含子27bp可变数目的短片段重复序列(variable number tandem repeats,VNTR)的多态性现象与妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy)的相关性研究,并探讨该位点的多态性在发病机制中的作用。方法：应用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺电泳,银染技术检测患者和健康孕妇的eNOS基因第4内含子多态性。采用RT-PCR技术检测对照组、病例组胎盘中eNOS mRNA的含量,对两组中不同基因型胎盘eNOS mRNA表达水平分别进行半定量比较。结果：eNOS基因VNTR 4a等位基因频率在正常孕妇组为7．50％,明显低于病例组的16．00％(χ^2=4．63,P=0．031,OR值为2．35,95％可信限为4．74～23．2),4a／4b+4a／4a基因型频率在两组分别为28．00％和13．75％(χ^2=5．08,P=0．024,OR=2.69,95％可信限为6.12～35.4)差异具有统计学意义。病例组eNOS mRNA的表达明显低于正常组,病例组中464b基因型组的eNOS mRNA水平明显高于4a／4b+4a／4a基因型组(76．81±1．41vs62．79±0．95,t=11．63 P=0．012)。结论：eNOS基因第4内含子VNTR与妊娠期高血压疾病具有相关性,这可能与该位点的突变可能引起eNOS mRNA转录减少有关。     

心脏机械换瓣术后妊娠妇女孕期处理效果的临床观察

目的:探讨心脏机械瓣膜置换术后妊娠妇女孕期终止妊娠的方式、孕期抗凝以及母婴并发症。方法:对32例次有记录换瓣术后妇女妊娠期的处理进行回顾性分析。结果:32例次妊娠中,14例次非意愿性妊娠,2例人流后放置曼月乐环效果好;整个孕期均常规应用华发林抗凝,无1例孕产妇发生瓣膜血栓和栓子栓塞并发症,胎儿发生流产3例,死胎1例,畸形2例。15例次晚期妊娠,11例择期剖宫产,其中1例发生产后大出血,1例急诊剖宫产出现产后大出血,3例阴道分娩中1例产后大出血;1例孕妇中孕引产过程中发生心衰,同时产后大出血。结论:换瓣术后生育年龄妇女急需有效控制生育,曼月乐环可能满足她们的需要;孕期单一、小剂量华发林抗凝对孕产妇比较安全;终止妊娠方式宜选择择期剖宫产。