产气荚膜梭菌实时荧光定量PCR方法的应用

目的利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的产气荚膜梭菌检测方法。方法以产气荚膜梭菌基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以产气荚膜梭菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的灵敏度、特异性、重复性。结果反应体系在上、下游引物浓度均为1μmol/L,探针浓度为0.1μmol/L时,具有良好的特异性和灵敏度,与创伤弧菌等24种相关细菌均无交叉反应,对纯菌检测的灵敏度为9×102CFU/ml,重复性试验证实该体系重复性好,稳定性高;3例临床样本检测结果与细菌培养结果相符。结论建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对临床气性坏疽做出快速准确的报告,实现对气性坏疽战时高发性疾病安全、快速和定量检测。     

高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值

目的 评价分析GP73和GP73 mRNA在PHC中的诊断价值,探讨血清中GP73和AFP联合检测对PHC诊断和高危人群普查的意义,为PHC诊断和普查提供一种新方法 .方法 采用ELISA对73例PHC、13例肝硬化、32例肝炎和62名健康人的血清GP73、AFP水平进行检测,采用SYBR Green实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞GP73 mRNA的相对表达量,以Ct值比较法计算GP73 mRNA相对表达水平,同时检测分析8份正常肝组织和8份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平.结果 ELISA检测4组血清GF73、AFP结果 显示,总体比较经Kruskal-Wallis检验,4组间差异有统计学意义(H值分别为89.6、52.0,P均＜0.01),全血GP73 mRNA含量4组间差异无统计学意义(H=4.33,P＞0.05).组间多重比较Mann-Whitney检验结果显示,PHC组血清GP73的含量[166.7(162.7-231.8)μL]与肝硬化[57.3(46.6～113.6)μg/L]、肝炎[29.6(26.2～54.5)μg/L]及健康对照组[25.1(20.8～29.4)μg/L]比较,差异有统计学意义(U值分别为246、297、349,P均＜0.01),各组血清AFP的含量分别为380.9(258.5～ 503.2)μg/L、3.8(1.3～14.5)μg/L、5.1(2.4～7.8)μg/L、2.8(2.2～5.7)μg/L,差异亦有统计学意义(U值分别为246、419、790,P均＜0.01).肝癌组织GP73 mRNA表达量(12.64)显著高于正常肝组织(1.00).以ROC曲线确定诊断PHC的GP73临界值为123.2μg/L和AFP临界值为10.6 μg/L时,PHC组血清GP73、AFP单项检测的敏感度分别为65.8%和53.4%,特异度分别为95.3%和92.5%,两者联合检测的敏感度为79.5%,特异度为90.7%.结论 GP73蛋白对PHC诊断具有较好的敏感度和特异度;全血标本GP73 mRNA检测不能作为诊断PHC的肿瘤标志,肝组织标本GP73 mRNA检测可作为诊断PHC的肿瘤标志,但存在创伤性大、风险大、患者痛苦等缺点.血清GP73联合AFP检测可有效提高PHC诊断,可用于PHC高危人群的普查及筛选.     

老年髋关节置换术后护理

随着我国逐渐步入人口老龄化,老年性股骨胫骨折患者越来越多,老年人股骨头血液循环很差,骨折后容易坏死须行人工髋关节置换术,基于老年人骨质疏松,骨质脆性增加,关节不灵活,对外界反应迟钝,易受到外力失去平衡跌倒引起骨折,因骨折住院治疗人数逐年增加,髋部骨折是老年人常见疾病.人工髋关节置换术已经成为治疗老年髋关节损伤疾病的常用方法,人工髋关节置换不仅能有效的解除髋关节疾病患者的病情,纠正畸形,而且能够更极大地恢复患者关节功能,随着人工髋关节置换术的广泛开展,术后康复越来越受到重视,正确的康复指导,可促进患者肢体功能恢复,预防并发症的发生,提高患者的生活质量,增加手术效果.     

胱抑素C在高胆红素血症新生儿血清中的水平变化及临床意义

目的探讨不同程度高胆红素血症患儿血清中尿酸、肌酐及胱抑素C的水平变化及其临床意义,为评价新生儿高胆红素血症肾脏损伤提供客观的临床生化指标。方法选择2011年1月至2011年9月广州市妇女儿童医疗中心收治的高胆红素血症(TBil≥220.6μmol/L)新生儿为高胆红素血症组,根据胆红素水平分为轻度(220.6~256.5μmol/L)、中度(256.6~342.2μmol/L)和重度(≥342.2μmol/L)高胆红素血症。同时,选择同期自然分娩、足月无黄疸(日龄1-30 d)的健康新生儿作为对照组。应用常规生物化学方法分析高胆红素血症组和对照组新生儿血清中的尿酸、肌酐及胱抑素C水平,并用SPSS17.0软件对数据进行统计分析。结果高胆红素血症组血清胱抑素C水平高于对照组(P0.01);高胆红素血症组血清尿酸、肌酐水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。Spearman直线相关分析结果显示,高胆红素血症新生儿的胱抑素C水平与其血清总胆红素呈正相关(r=0.679,P=0.000);尿酸、肌酐与血清总胆红素水平无相关性(P0.05)。结论胱抑素C是反映高胆红素血症新生儿肾功能水平的重要监测指标,可辅助临床医生及时诊断,及早进行干预治疗。     

6-磷酸葡萄糖异构酶检测对类风湿关节炎的诊断意义

目的 探讨检测6-磷酸葡萄糖异构酶抗原(GPI)及其联合抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)和抗角蛋白抗体(AKA)的检测在自身类风湿关节炎(RA)的诊断意义。方法 应用酶联免疫固相吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法,对65例RA患者,55例非RA相关疾病患者血清中GPI、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)和抗角蛋白抗体(AKA)水平进行检测,设本院门诊健康体检73例为正常对照。结果 RA患者GPI、抗CCP和AKA阳性检出率分别为86.2% 、70.8%、33.8%,若抗CCP联合AKA检测,阳性率可提高到73.8%;联合三个指标检测,RA诊断阳性率为95.4%,临床符合率高达91.2%。结论 GPI是协助诊断RA的一个新的特异性血清学指标,同时结合抗CCP抗体和AKA的检测可以提高RA阳性诊断率,适合在各级实验室推广使用。     

血浆置换治疗重型肝炎的疗效及安全性分析

目的 分析血浆置换治疗重型肝炎的疗效及安全性.方法 随机抽取2016年1月~2017年1月收治的重型肝炎患者90例,分为M组(n=45)和N组(n=45).N组患者进行常规内科综合治疗,M组患者在N组患者的基础上进行血浆置换治疗.对比M、N两组患者的治疗效果、临床指标(PTA、ALT、ALB、TBil)以及不良反应发生率.结果 相对于N组患者的治疗效果、临床指标(PTA、ALT、ALB、TBil),M组患者的较优,差异有统计学意义(P<0.05);相对于N组患者的不良反应发生率(11.1%),M组患者的(6.7%)比较差异无统计学意义.结论 血浆置换治疗重型肝炎取得了显著的临床疗效,患者的肝功能明显改善,且不良反应发生率极低,值得借鉴和支持.     

血培养阳性报警时间联合未成熟粒细胞及C反应蛋白鉴别儿童凝固酶阴性葡萄球菌血流感染与污染

目的 评估血培养阳性报警时间(TTP)与血液未成熟粒细胞百分比(IG％)、未成熟粒细胞计数(IG#)、C反应蛋白(CRP)、白细胞总数(WBC)和中性粒细胞百分比(NE％)等炎症指标联合检测对儿童凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)血流感染与污染的鉴别诊断价值.方法 回顾性分析广州市妇女儿童医疗中心2019年1月～12月收集...     

高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值

Objective To explore the diagnostic value of GP-/3 protein in gene detection in the patient of primary hepatic carcinoma, to discuss the joint roles of serum GP73 and AFP, and provide a novel method for the diagnosis for PHC and screening for high-risk population. Methods ELISA was used to detect the serum level of GP73 and AFP in 73 cases of PHC, 13 cases of hepatic cirrhosis, 32 cases of hepatitis and 62 cases of health people. SYBR Green real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the relative value of GP73 mRNA in the peripheral blood cells of each group. Comparative Ct method was used to evaluate the relative expression levels. Eight cases of normal liver tissues and 8 cases of PHC tissues were detected at the same time to compare the relative expression levels. Results Kruskal-Wallis test showed that the serum levels of GP73 and AFP had significant differences between four groups(H value were 89. 6 and 52.0, P ＜ 0. 01) and the whole blood GP73 mRNA had no significant differences(H =4. 33, P ＞ 0. 05). Mann-Whitney test showed that the serum levels of GP73 had significant differences among PHC groups[166. 7 (162. 7-231.8) μg/L] and liver cirrhosis[57. 3 (46. 6-113. 6) μg/L], hepatitis[29. 6(26. 2-54. 5) μg/L], health group[25.1 (20. 8-29. 4) μg/L] (U value were 246, 297, 349, P ＜ 0. 01).The A FP levels of the four groups were 380. 9 (258.5-503.2) μg/L, 3.8 (1.3-14. 5) μg/L, 5. 1 (2. 4-7. 8)μg/L and 2. 8(2. 2-5.7) μg/L. It also showed significant differences (U value were 246,419 and 790,P ＜0. 01). The GP73 mRNA expression of PHC liver tissues(12. 64) was significant higher than normal liver tissues (1.00). The critical values for GP73 and AFP was determined to be 123. 2 μg/L and 10. 6 μg/L through the 8OC curves. Under the critical value the sensitivity of GP73 and AFP were 65.8% and 53.4% ,and the specificity of CP73 and AFP were 95.3% and 92. 5% respectively. Joint detection could increase the sensitivity up to 79. 5%, and achieve the high specificity of 90. 7%. Conclusions As a new diagnositic marker of primary hepatic carcinoma, GP73 protein has the very good sensitivity and specificity. The GP73 mRNA in the whole blood sample could not be used for the diagnosis of PHC. But it woule be a good molecular marker for diagnosis of PHC in the liver tissue sample. The joint detection of GP73 and AFP could improve PHC diagnostic performance, and provide an effective approcach to the PHC high-risk screening.     

婴儿肝炎综合征血清前白蛋白、腺苷脱氨酶和总胆汁酸联合检测的临床应用

目的探讨婴儿肝炎综合征（IHS）血清前白蛋白（PA）、腺苷脱氨酶（ADA）、总胆汁酸（TBA）的变化规律及其诊疗价值。方法应用全自动生化分析仪检测198例IHS患儿的血清PA、ADA、TBA,并与健康对照组比较。结果 IHS组PA浓度低于对照组,差异有统计学意义（t=2.512,P〈0.05）;IHS组ADA、TBA浓度均高于对照组,差异有统计学意义（t分别为3.517,8.753,P均〈0.05）。单项检测时IHS患儿PA的阳性率为90.4%,ADA的阳性率为92.4%,TBA的阳性率为96.0%,联合检测三项指标阳性率可高达100%。结论联合检测血清PA、ADA、TBA水平能较早地反映肝脏合成及代谢功能,对IHS的病情判断和预后有重要的临床价值。     

创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌快速定量检测方法的建立及应用

目的 建立检测创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌的实时荧光定量PCR方法,为气性坏疽的早期快速诊断提供新手段.方法以产气荚膜梭菌16S rDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物及探针,以PCR扩增产物重组质粒作为定量检测的标准品,绘制标准曲线.对荧光定量PCR体系和反应条件进行优化,并验证方法的特异性、敏感性、重复...