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乙型肝炎病毒核酸探针压电晶体传感器的初步研究 总被引:7,自引:0,他引:7
核酸探针压电晶体传感器,即由特异的单链DNA片断与压电晶体镀膜电板交联固定制成探针,并与标本中待测的变性DNA杂交成双链,杂交前后DNA量的变化,可通过压电晶体振荡频率的改变判定。从含pBR322-HBVDNA的大肠杆菌HB101中提取纯化重组质粒DNA,制成乙型肝炎病毒核酸探针压电晶体传感器,检测12例乙型肝炎感染者血清标本,结果显示5例阳性,与PCR检测结果一致,提示其具有良好的特异性与敏感性,并且更快速、简便。 相似文献
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Objective Toinvestigatetherelationshipbetweenβglucuronidaseandtumordifferentiationandinvasioninhumancolorectalcarcinoma.Methods Theexpressionofβglucuronidaseinhumancolorectalcarcinomatissuewasdeterminedbystreptavidinperoxidaseimmunohistochemicalme… 相似文献
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目的:了解血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa对基质金属蛋白酶(MMP-2,9)mRNA表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分别用酶谱法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-2,-9活性和mRNA表达。待细胞融合成单层后,分别加入无血清培养基,静息期血小板,活化后血小板及白细胞介素-1β(IL-β),共同培养60min后,洗去血小板,内皮细胞继续培养6h。上清液及细胞分别用于酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性,以及RT-PCR分析mRNA表达。结果:内皮细胞与活化血小板共同培养后,酶谱法显示:与对照组相比,未活化的血小板轻微诱导MMP-2和MMP-9分泌(P〈0.05),而活化状态的血小板能显著诱导这二者的分泌(P〈0.01),与IL-1β的作用相当;而且还可以见到62kDaMMP-2活化形式。加入阻断剂GRGDSP以及GPⅡb/Ⅲa单克隆抗体(7E3)后检测发现,MMP-2和MMP-9分泌减少。与活化血小板共同培养后的内皮细胞表面表达uPAR和MT1-MMP以及上清液中MMP-2的mRNA与对照组相比明显增高(P〈0.01),而静息状态的血小板作用不显著。加入GRGDSP或7E3后,mRNA的表达降低。结论:(1)活化状态的血小板与IL-8的作用相当,能显著诱导MMP-2和MMP-9分泌;能明显增高内皮细胞uPAR和MT1-MMP及上清液中MMP-2mRNA的表达;(2)GPⅡb/Ⅲa阻断剂可能抑制血小板在不稳定斑块部位聚集、粘附等一系列炎症反应。 相似文献
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目的:探讨小泛素样修饰蛋白(SUMO)化修饰对核因子(NF)-κB通路激活的负性调控在2型糖尿病大鼠脑部病变中的干预作用,为前列地尔对其病变的早期干预提供依据。方法:随机抽取40周龄的lO只GK大鼠为前列地尔组(前列地尔2.5μg/g,尾尖静脉注射给药,1次/d,共10d)、10只为糖尿病对照组,另取10只Wistar雄性大鼠作为正常对照组。正常对照组和糖尿病对照组给予等剂量生理盐水,均为尾尖静脉注射给药。三组均给予普通饲料。测定和观察血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)变化及NF-κB抑制因子(IκB)、NF-κB、SU—M01的水平变化。结果:(1)糖尿病对照组、前列地尔组大鼠的血糖、TG、TC均显著高于正常对照组(P均〈0.05);(2)HE染色观察:正常对照组脑组织细胞形态正常,糖尿病对照组、前列地尔组脑组织可见细胞肥大,疏松样改变,前列地尔组病变较轻;(3)免疫组化测定的IκB、NF-κB、SUM01:正常对照组少许阳性表达,糖尿病对照组、前列地尔组表达均显著增加(P〈0.05或〈0.01),但前列地尔组较糖尿病对照组IκB[(0.242±0.034)比(0.268±0.017)]、NF-κB[(0.373±0.015)比(0.486±0.013)]表达显著减少,SUM01[(0.463±0.015)比(0.343±0.018)]表达显著增加(P均〈0.05)。结论:小泛素样修饰蛋白在糖尿病大鼠脑组织表达增多,在前列地尔组表达更多,前列地尔对糖尿病大鼠脑组织病变有一定改善作用。 相似文献
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一种简便实用的RNA制备方法陈誉华宋今丹(细胞生物学卫生部重点实验室,沈阳110001)关键词核糖核酸;核酸杂交;反转录—多聚酶链反应cDNA克隆或从mRNA来分析细胞内某蛋白表达的首要步骤是提纯细胞的总RNA。迄今有关细胞总RNA的制备方法虽已常规... 相似文献
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大鼠原位肝移植后微循环障碍及前列腺素E1对其保护作用的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 研究大鼠肝脏徽循环变化及PGE1对其的作用,同时观察血清酶ALT、LDH变化及超截结构变化。方法 通过供肝切取前静脉输注前列腺素E1(PGE1)(0.5μg/kg/min)及灌洗保存藏中加入PGE1(1mg/L),以三袖套法建立大鼠原位肝移植模型.共焦澈光扫描活体显微镜技术,生化检测技术、透射电镜技术。结果 1.移植再灌注后,鼠肝微循环紊乱,部分小叶无灌注,肝窦内可见大量白细胞粘附;实验组则好于对照组;实验组灌注指数及灌流率分别高于对照组(P<0.05)。2.移植后血清ALT、LDH升高.实验组较对照组有明显降低。(P<0.05)。3.实验组电镜下的形态学改变明显轻于对照组。结论 肝移植过程中,缺血再灌注损伤可造成肝脏微循环紊乱,是供肝失活的一个重要原因。供体肝脏切取前静脉应用PCE1及灌洗保存液中加入PGE1能改善肝脏微循环,减轻缺血再灌注损伤,对供肝有保护作用。 相似文献
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维甲酸诱导大肠癌细胞分化后内质网结构及标志酶G6PA细胞化学的改变 总被引:2,自引:0,他引:2
葡萄糖-6-磷酸酶(G6PA)是内质网的标志酶,它的改变与肿瘤代谢有一定的关系.观察经维甲酸(RA)作用前后人大肠癌细胞系(CCL-187)生物学特性的改变和内质网结构及标志酶G6PA电镜细胞化学分布的改变.结果表明:RA可诱导CCL-187细胞成熟分化,碱性磷酸酶的活性明显提高;内质网的结构及标志酶G6PA的细胞化学分布亦趋同于正常分化细胞。 相似文献
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Nitric oxide (NO) is an inorganic free radical gas synthesized from L-arginine by a family of three isoenzymes called NO synthase[1]. Two of these NO synthases are constitutively expressed, and expression of a third NO synthase is induced by immunologic stimuli[2]. The NO released by the constitutive enzymes acts as an important signal molecule in the cardiovascular and nervous systems. NO released by the inducible NO synthase (iNOS) lasts for long periods in cells of the immune system … 相似文献