奶牛血浆钙离子浓度及胎儿胎盘eNOS表达的研究

本试验采用终点法检测血浆中Ca2+浓度变化,分别采用免疫组织化学SP法及荧光定量PCR法检测奶牛胎儿胎盘eNOS蛋白及其mRNA的表达。通过对血浆中Ca2+浓度的检测及胎儿胎盘内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达量的研究,探讨奶牛胎衣不下的发生与这些物质变化的关系。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中Ca2+浓度在分娩前后均低于正常组;两组eNOS蛋白均在胎盘绒毛滋养层细胞和内皮细胞胞浆内表达,蛋白的表达量差异显著(P0.05);两组胎儿胎盘eNOS mRNA表达量差异显著(P0.05)。本研究证明分娩前后血浆中Ca2+水平对奶牛胎衣不下的发生有重要的调节作用,低浓度的Ca2+容易导致子宫收缩无力,同时影响eNOS在胎儿胎盘绒毛中的表达。     

复合菌系脱除氨氮效果的研究

为保护畜禽养殖场周围的空气质量,控制氨气是养殖业必须要解决的基本问题。从养猪场土样中分离出具有除臭的微生物菌株2株:X-3菌株和X-5菌株。利用纳氏比色法检测除氨复合菌系去除氨氮的能力;采用平板稀释活菌计数法分析活菌数与除氨效果之间的关系。除氨复合菌系具有良好的氨氮去除能力,7 d的氨氮平均去除率为87.43%,相关性分析结果显示,活菌数量与氨氮去除效果呈正相关。该除臭剂具有良好的除臭效果,并延长除臭时间。     

犬膝关节骨关节炎动物模型血清及关节液中IL-1、TNF-α和HA的分析

测定模型组与对照组犬的血清和关节液中IL-1、TNF-α和HA浓度,为验证犬膝关节骨关节炎(OA)不同阶段与其浓度变化是否具有临床意义。将36只犬随机平均分成为模型组和对照组,模型组采用前十字韧带切断法建立犬膝关节骨性关节炎模型,对照组只切开关节囊不切断前十字韧带。造模后第4、8、12周分别采集各组血清和关节液样品,用ELISA方法定量测定各项指标浓度。结果在第4、8、12周模型组与对照组IL-1、TNF-α和HA浓度比较分别差异显著,具有统计学意义P0.05。随着模型组犬骨性关节炎的加重,犬关节液和血清中IL-l、TNF-α的浓度均呈逐渐升高趋势,犬关节液中HA浓度呈逐渐升高,犬血清中HA的浓度呈下降。说明犬膝关节骨关节炎模型组血清及关节液各成分变化与OA的致病机制密切相关,能作为反应OA病程的临床指标。     

胎衣不下奶牛胎儿胎盘解剖组织学变化的研究

胎衣不下(RFM)是严重影响奶牛饲养业的一种繁殖障碍性疾病,可引起奶牛产奶量下降、繁殖效率降低[1-3].目前对胎盘娩出机理和胎衣不下的发病机制还没有很清晰的解释,多数研究只停留在血液生化指标和激素水平变化对胎衣不下的影响,而有关奶牛胎儿胎盘解剖学改变与胎衣不下发生之间关系的研究却甚少.     

犬胃内异物X光射线诊断的研究

在已有病例的基础上通过鉴别对比,分析各种胃内异物X光片的特点,为临床诊断提供依据。利用X光机对犬胃内异物病例进行X光平片的拍摄观察,并对犬胃内大小、形状、密度不同的异物的诊断效果进行了归类、比较和分析。结果显示：X光平片检查能够清晰、直观地显示胃内高密度异物,并且能够对其准确地定位;但对于胃内低密度异物几乎不成像,甚至观察不到胃内异物的存在。但是使用造影剂后,就可以使低密度异物成像;胃内中等密度的异物虽然能够通过X光显示,但其轮廓不十分清晰。结果表明：对于中高密度的胃内异物,X光平片检查效果明显好于低密度的胃内异物,而低密度异物借助造影剂后能够较准确地定位。     

胎衣不下奶牛母体胎盘α-烯醇化酶异常表达分析及验证

试验通过对胎衣不下奶牛母体胎盘组织中差异α-烯醇化酶(enolase,ENO1)的分析验证,探讨ENO1在胎衣不下中的作用。本研究选取了年龄、胎次、体重和泌乳量均相近的产后胎衣不下和产后胎衣正常排出奶牛各3头,分为两组,提取了胎衣不下组与胎衣正常排出组母体胎盘组织中的总蛋白,采用双向凝胶电泳的方法筛选出差异蛋白,并利用Western blotting及实时荧光定量PCR的方法对其中差异表达量大的ENO1进行验证。结果发现,胎衣不下组和胎衣正常组母体胎盘组织中ENO1差异表达量大且倍数较大,Western blotting及实时荧光定量PCR验证发现ENO1在胎衣不下奶牛母体胎盘中的表达量升高,t检验结果分别为P=0.015<0.05,差异显著;P=0.001<0.01,差异极显著。该基因参与机体的能量调节、免疫和纤溶等过程,而这些过程与奶牛胎衣不下密切相关,提示ENO1可能参与该病的发生发展。     

牛乳溶菌酶在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析

为真核表达牛乳溶菌酶,本研究在通过酵母偏爱密码子改造并人工合成LYZ1基因的基础上,将LYZ1基因经克隆构建了高效表达具有生物活性牛乳溶菌酶的分泌型表达载体pPICZα-A-LYZ1,将其经SacⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母菌株GS115中,通过Zeocin筛选和PCR鉴定后的阳性重组菌用甲醇诱导60h后,进行SDS-PAGE和western blot鉴定,用溶壁微球菌对其进行活性检测,并对其进行体外抑菌效果检测分析。结果表明:分泌表达的重组目的蛋白约16ku,而且抗血清具有良好的反应原性。活性检测表明,培养液中重组溶菌酶活性达到2842u/mL。体外抑菌试验结果表明,重组牛乳溶菌酶对标准葡萄球菌及大肠杆菌菌株具有较好的抗菌作用,而对无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌作用较弱。