猪链球菌ZKHY株gdh基因的克隆与序列分析

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,以ZKHY株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,转化宿主菌JM109中进行序列测定。将测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。序列分析显示,成功克隆了猪链球菌ZKHY株的gdh基因,ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有密切的亲缘关系,核酸序列与血清2、7、9型的同源性为97.2%~98.4%,其中与2型菌株同源性为97.2%~97.3%;与7型菌株同源性为98.4%;与9型菌株同源性为97.6%。其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。ZKYH株可能是属于2、7、9型之外的其他血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达以用作免疫学方面的相关研究。     

试论农民专业合作社财务管理中的政府角色定位

通过对农民专业合作社在财务管理及政府角色行为上存在问题的分析,就政府在合作社财务管理中如何进行自身定位、优化政府角色行为,提出对策建议。     

农民专业合作社财务管理的问题与对策思考

通过对农民专业合作社在财务管理意识、管理机构与人员、财务制度、筹资和收益分配等方面存在问题的分析,提出解决合作社财务管理问题的对策,即加强宣传,增强财务管理意识,扩大筹资渠道,加强财会队伍建设,健全财务管理和收益分配制度,加大惠农政策的扶持力度等。     

免疫鸡群肾型传染性支气管炎病毒的分离和鉴定

[目的]鉴定免疫鸡群肾型传染性支气管炎病毒（IBV）。[方法]以接种IBV的鸡胚尿囊液为模板,根据GenBank中登录的IBV的N基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增出目的片段,经酶切鉴定后对其进行测序鉴定。[结果]PCR扩增片段长度为409bp,将其Ⅳ基因核苷酸序列与不同地区分离株（山东、黑龙江等）以及欧洲呼吸型疫苗株（M41）的IBV核苷酸序列进行比较,结果表明,不同毒株的核苷酸同源性在85．6％～100．0％,此次分离所得IBV的N基因与IBVSD0708株（EU352625）N基因的核苷酸同源性高达99．3％,而与呼吸型疫苗株M41（M28566）的同源性仅为87．3％。测序结果及序列分析可以证实分离到的病毒为IBV,命名为HN／HL株。[结论]该研究为鸡传染性支气管炎病毒的控制奠定了基础。     

水稻细胞质雄性不育恢复基因Rf6功能标记开发及微核心种质中Rf6基因的筛选

核恢复基因Rf6是红莲型杂交水稻特有的新恢复基因,为了寻找更多具有Rf6恢复基因的种质,以扩展红莲型杂交水稻的恢复系来源,组配更多优良杂交品系,利用Rf6及其等位基因的序列差异,开发Rf6基因的功能标记,并利用该标记对中国水稻微核心种质进行PCR扩增,筛选具有Rf6恢复基因的种质。结果表明,在324 bp插入片段(Rf6较其等位基因插入324 bp)两侧设计引物(正向引物:5'-ATGACAAGAGGACCAGCGATGCAATGG-3',反向引物:5'-ATTCTTGCAGAGATAGACCATGAGCGTG-3'),利用该引物可扩增出条带清晰且无杂带的差异片段,可用于Rf6基因的鉴定。利用该标记在197份中国水稻微核心种质中筛选出22份具有Rf6恢复基因的种质,可为拓宽红莲型杂交水稻的恢复系来源提供材料。     

低温臭氧处理对草莓常见害虫的熏蒸活性研究

为了在草莓进出口贸易中建立一种高效的替代溴甲烷熏蒸的检疫处理技术,研究了臭氧低温处理对主要草莓害虫的控制效果和效率。以臭氧作为熏蒸剂,在不同低温条件下(2、4℃)设置不同剂量,对草莓主要害虫桃蚜[Myzus persicae(Sulzer)]、朱砂叶螨[Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)]、一种立毛属蚂蚁(Parathrechina spp.)进行室内熏蒸毒力测定。结果表明,3种草莓害虫2 h的LC50(LC99)分别为1.60(3.83)和1.97(4.25)mg/L、0.41(4.16)和0.36(8.64)mg/L、2.08(23.69)和2.67(21.90)mg/L(依次为桃蚜、朱砂叶螨、蚂蚁在2℃和4℃时的数据)。在4℃环境下,利用200 mg/kg(0.43 mg/L)臭氧熏蒸,桃蚜的LT50和LT99分别为10.48和196.28 h,朱砂叶螨的分别为0.69和5.08 h,蚂蚁的分别为16.56和174.75 h。     

口蹄疫病毒5'端非翻译区致病机理的分子基础

该文阐述了口蹄疫病毒5'端非翻译区的结构和功能,综述了近年来口蹄疫病毒5'端非翻译区与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,分析了口蹄疫病毒5'端非翻译区致病机理的分子基础,认为其5'端非翻译区的基因组结构对口蹄疫病毒的复制和扩增是必不可少的,为进一步研究口蹄疫病毒的复制机理、毒力及其决定因素、致弱机理、致病机理及宿主嗜性提供理论参考.     

猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中PCV2和PCV1的基因组序列设计3条引物,并建立了检测PCV2的复合PCR方法。用该方法对河南省7个地市45个猪场的156份样品进行了检测,检出阳性病料98份,阳性率63%;阳性猪场38个,阳性率84%,表明该方法特异性及敏感性高,可用于临床诊断。     

鸡输卵管囊肿病的病理学观察及相关病原的初步检测

为研究卡氏杆菌与鸡输卵管囊肿之间的关系,对42例自然发病鸡进行症状观察、病理剖检,并采取气管、肺脏、输卵管与卵巢组织块,经固定,脱水,石蜡切片,HE染色,光镜观察,利用PCR方法对上述组织进行卡氏杆菌检测,并对其病原混合感染进行了初步研究。结果表明,卡氏杆菌可以引起鸡呼吸道感染和生殖道损伤,显微镜下主要表现为呼吸道黏膜充血、肿胀,输卵管固有层腺体增多,卵巢中卵泡退化,呈空泡状;PCR方法对鸡群卡氏杆菌的阳性检出率为14%,组织阳性检出率为5.4%,且在被检组织中卡氏杆菌很少与其他病原体混合感染。