胸液细胞DNA倍体分析和癌胚抗原测定在恶性胸液中诊断价值的对比研究

目的　应用流式细胞术 (FCM )测定胸液细胞DNA倍体 ,并与胸液癌胚抗原 (CEA)水平进行比较 ,探讨其在恶性胸液诊断中的价值。方法　 65例胸液患者分为恶性胸液组及结核性胸液组 ,用FCM检测胸液中DNA倍体 ,同时测定CEA。结果　 (1 )胸腔积液DNA倍体分析 :恶性胸液组 1 9例 (67 86 % )出现异倍体 ,结核性胸液组 1例 (2 70 % )出现异倍体 (为四倍体 ) (P <0 0 0 1 ) ,DNA倍体分析灵敏度为 0 6786 ,特异度为 0 972 9,诊断指数为 0 651 6。 (3)胸腔积液CEA水平 :恶性胸液组 1 3例 (48 1 5 % )阳性 ,结核性胸液组 3例 (8 1 1 % )阳性 (P <0 0 0 1 ) ,其诊断的灵敏度0 481 5 ,特异度为 0 91 89,诊断指数为 0 383 2。两个诊断试验的特异度及诊断指数均有显著差异 ,灵敏度间无显著差异。结论　采用FCM进行DNA倍体分析是鉴别结核性及恶性胸液的一项重要指标 ,其诊断价值优于CEA。     

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的 探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍休、细胞周期特征，并分析其临床意义。方法 采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例，并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系。结果 40例舌体鳞癌中，异倍体检出率为70％(28／40)；舌体鳞癌与正常舌组织相比，DI、SPF有显著性差异，相对于低分化组而言，高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异。结论 流式细胞仪可用来分析舌体鳞癌的DNA；DI可以鉴别细胞的良恶性；DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标。     

高血压颈动脉粥样硬化与P-选择素及C-反应蛋白的关系

目的:通过对高血压患者血小板P-选择素(CD62P)百分率及血清C-反应蛋白(CRP)的检测,探讨CD62P及CRP在高血压颈动脉粥样硬化(CAS)中的意义。方法:采用流式细胞术和免疫比浊法检测高血压组及对照组的CD62P及CRP,结合超声检查颈动脉内膜-中膜厚度(I MT),进行对比研究。结果:高血压组CD62P阳性百分率及血清CRP分别为(24.56±10.63)%和(4.02±1.83)mg/L,明显高于对照组(P<0·01,P<0·05),高血压I MT增高亚组的CD62P阳性百分率、血清CRP亦高于I MT正常亚组(P<0·01,P<0·05),且颈动脉I MT与CD62P、CRP正相关。结论:CD62P、CRP与高血压CAS严重程度相关,可作为评价高血压动脉粥样硬化的良好指标。     

急性髓系白血病细胞c-Kit受体表达与外周血白细胞数量的关系

目的探讨急性髓系白血病细胞c-Kit受体表达与外周血WBC数量的关系。方法以流式细胞仪分析57例急性髓系白血病患者骨髓原始细胞c-Kit受体表达及血细胞仪检测外周血WBC总数量（包含原始细胞及成熟白细胞）。结果低WBC组c-Kit受体表达显著高于高WBC组（t=4.01,P〈0.01）;CR组c-Kit受体表达略低于部分缓解组和未缓解组,但无统计学意义（t=0.67,P〉0.05）。结论急性髓系白血病患者外周血白细胞总量与骨髓原始细胞c-Kit受体表达有关。     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

急性髓系白血病CD44v6的表达和ERK磷酸化水平的关系

目的 探讨CD44v6和p-ERK1/2在AML中的表达及临床意义.方法 应用流式细胞仪检测22名健康对照者及152例AML患者骨髓原始细胞上CD44v6及p-ERK1/2的表达.对其中129例AML患者进行了跟踪随访,分析CD+44v6和CD-44v6对AML患者的复发率以及生存时间是否存在影响.结果 22名健康对照者中,各有1例(4.5%)CD44v6和p-ERK1/2阳性.152例AML患者中,55例(36.2%)CD44v6阳性,97例(64.5%)p-ERK1/2阳性.AML患者组骨髓原始细胞p-ERK1/2的MFI为14(7～58),高于健康对照组的8(6～10),差异有统计学意义(U=4.2,P＜0.01).CD+44v6 AML患者p-ERK1/2的MFI为28(15～61),高于CD-44v6 AML患者的18(6～37),差异有统计学意义(U=6.7,P＜0.01).CD44v6的MFI与p-ERK1/2的MFI呈显著性正相关(ra=0.7,P＜0.01).对129例AML患者进行了4～65个月的随访,其中CD-44v6患者的复发率为32.1%(26/81),低于CD+44v6患者的复发率81.3%(39/48),差异有统计学意义(x2=29.1,P＜0.01).生存分析表明,CD+44v6AML患者平均生存时间为(28.5±1.8)个月,CD-44v6AML患者平均生存时间为(51.2±2.0)个月,差异有统计学意义(x2=48.2,P＜0.01).结论 CD44v6阳性的AML患者生存时间明显缩短、预后差.CD44v6可能通过上调p-ERK1/2水平促进白血病细胞增殖.     

急性髓系白血病干细胞免疫表型和信号通路蛋白活化检测及意义

目的为了解急性髓系白血病干细胞(AML-LSCs)免疫表型特点和信号转导通路活化状态,以探讨其生物学特征。方法应用流式细胞术检测(AML-LSCs)免疫表型、P-gp、PTEN、p-Akt、p-ERK的表达,以正常造血干细胞(HSCs)为对照。结果正常HSCs主要免疫表型:CD34+、CD38-、CD123-、CD96-、CD117+、CD44+、、CD33-、CD13-。PTEN蛋白阳性率为72.09%,p-Akt及p-ERK蛋白均阴性,P-gp蛋白阴性。AML-LSCs主要免疫表型:CD123+、CD96+、CD117-、CD44+、CD13+、CD33+,与HSCs免疫表型差异主要为CD123+、CD96+、CD117-、CD13+、CD33+。LSCs PTEN蛋白阳性率为25.58%,低于正常HSCs(χ2=30.88,P<0.01),p-Akt阳性率为63.95%,p-ERK阳性率为70.93%,高于正常HSCs(χ2=24.43、30.87,P均<0.01)。P-gp蛋白阳性率为67.44%。79例AML患者预后分析表明,高AML-LSCs的患者较低AML-LSCs患者复发率增高(χ2=5.69,P<0.05);无病生存率(DFS)分析显示,高AML-LSCs的患者无病生存时间中位数14个月,较低AML-LSCs患者无病生存时间中位数28个月明显缩短(P<0.01)。结论 LSCs免疫表型特征为CD34+、CD38-、CD123+、CD96+、CD117-,P-gp高表达。AML-LSCs数量高的AML患者复发率高、无病生存时间短、预后差。MEK/ERK,PI3K/PTEN/Akt信号通路被激活,可能与LSCs克隆性增殖和自我更新有关。     

产妇乙型肝炎病毒感染与母婴传播关系

乙型肝炎病毒(HBV)可经胎盘传播至胎儿,造成胎儿宫内感染.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带孕妇的胎儿宫内感染率为5%～15%[1～4].母婴传播已经成为乙型肝炎病毒的重要传播途径之一,可通过胎盘、分娩等途径传播.为了解产妇病毒感染与母婴传播的关系,我们进行了检测分析.结果报告如下.     

CD_(19)~+CD_(23)~+在婴幼儿支气管哮喘淋巴细胞上的表达及临床意义

目的探讨婴幼儿支气管哮喘B淋巴细胞表面CD19+CD23+的表达及临床意义。方法采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法检测32例哮喘发作期患儿(哮喘发作组)和29例哮喘缓解期患儿(哮喘缓解组)外周血B淋巴细胞CD19+CD23+表达率和血清总IgE水平,并与23例健康体检者(正常对照组)对照。结果哮喘发作组B淋巴细胞CD19+CD23+及血清IgE水平均高于哮喘缓解组和正常对照组(P<0.01);哮喘缓解组CD19+CD23+的表达率明显高于正常对照组(P<0.01);哮喘发作组CD19+CD23+表达率与血清IgE呈正相关(P<0.01)。结论外周血B淋巴细胞表面CD19+CD23+检测有助于婴幼儿支气管哮喘的诊断和预后判断。     

流式CBA检测TH1/TH2细胞因子谱在细菌感染中的应用

目的 探讨流式细胞术(FCM)微球芯片技术(CBA)分析TH1/TH2细胞因子谱在细菌感染中的应用价值。方法CBA方法检测67例健康对照,111例细菌感染患者,42例非细菌感染患者TH1/TH2细胞因子表达水平,同时对比各组C反应蛋白(CRP)水平,绘制各指标的受试者工作特征(ROC)曲线并评价TH1/TH2细胞因子谱用于诊断细菌感染的价值。结果 TH1细胞因子在G+ 细菌感染组和G- 细菌感染组表达水平略高于健康对照组。TH2部分细胞因子在G⁺细菌感染组和G-细菌感染组表达水平显著高于健康对照组。其中IL-6在G⁺细菌感染组和G-细菌感染组表达水平显著高于健康对照组(P均<0.01),达10倍以上,IL-10在G-细菌感染组表达水平显著高于健康对照组(P<0.01),达10倍以上。ROC曲线下面积比较,IL-6/G⁺细菌感染组与CRP G⁺细菌感染组比较差异有统计学意义(z=4.49,P<0.01)。IL-6/G-细菌感染组与CRP/G-细菌感染组比较差异有统计学意义(z=4.64,P<0.01)。IL-10/G-细菌感染组与CRP/G-细菌感染组比较,差异有统计学意义(z =4.38,P<0.01)。抗菌治疗后7天,IL-6、IL-10在细菌感染患者中的表达水平基本恢复正常,而CRP表达水平仍高于正常(P均<0.01)。结论 CBA技术分析的TH1/TH2细胞因子谱早期诊断细菌感染性能优于CRP,并能进一步辅助鉴别G⁺细菌和G-细菌感染及临床疗效判断。