慢病毒介导的降钙素基因相关肽转染对大鼠骨髓间充质干细胞内皮分化的影响

 目的：研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）内皮分化功能的影响。方法：用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs,未转染MSCs作为对照,应用ELISA法检测CGRP蛋白表达;实验分为转染Lenti-CGRP的MSCs（CGRP）组、转染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受体拮抗剂（CGRP8-37）组（CGRP +CGRP8-37）及未经转染的对照组。应用免疫细胞化学检测细胞CD31和Ⅷ因子相关抗原的表达以鉴定其分化能力;细胞计数法观察转染CGRP后MSCs增殖的影响;Matrigel实验观察转染CGRP对MSCs形成管腔样结构能力的影响。结果：MSCs转染CGRP基因经诱导分化后的CD31和Ⅷ因子相关抗原阳性细胞数量增多,与对照组相比有显著差异(P<0.05);转染CGRP组细胞数量增长较快,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);Matrigel实验显示转染CGRP组细胞微血管新生明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而CGRP+CGRP8-37组上述作用明显被抑制。结论: 转染CGRP基因能促进MSCs向内皮分化,并能促进内皮细胞增殖,在一定的条件下,可促进微血管新生。     

环磷腺苷葡胺对急性冠脉综合征左心功能的影响研究

环磷腺苷葡胺是环磷腺苷(cAMP)衍生物,是非洋地黄类正性肌力药物。本院自2005年开始应用环磷腺苷葡胺治疗急性冠脉综合征(ACS)伴左心功能不全,取得较好疗效,现报道如下。     

重组人粒细胞集落刺激因子对兔颈动脉粥样硬化球囊损伤后再内皮化和内膜增生的影响

Objeelive To investigate the effect of rhG-CSF on mobilizing bone marrow-MSCs, reendothelialization and intima hyperplasia in carotid artery of rabbits post balloon catheter injury, nethods Rabbits were treated with rhG-CSF (25 μkg, twice daily, i. p, n =35) or saline (n =32) for 5 days, then, carotid arteries of rabbits were injured by balloon catheter. The number of peripheral MSCs was detected with FACS. The morphology of injuried artery was examined with hematoxylin and eosin stain, PCNA was determined with immunohistochemistry. Results (1) Number of peripheral MSCs was similar at baseline and significantly increased at 24 hours and peaked at 7 days and remained increased till 14 days post rhG-CSF. (2) Significant endothelial cell deletion was evidenced in the control group, while scatter endothelial cells was observed in the rhG-CSF group at 1 week post injury. Two weeks after injury, new endothelial area was significantly higher in rhG-CSF group compared to control group. At 4 weeks post injury, endothelial connection was evidenced and regularly displayed in rhG-CSF treated group. (3) PCNA-positive cells in the tunica intima were significantly lower in rhG-CSF treated rabbits at 7, 14 and 28 days compared that in control rabbits (all P ＜ 0.01). Conclusion rhG-CSF could mobilize the bone marrow-MSCs and promote re-endothelialization and attenuate intima hyperplasia post balloon catheter injury in carotid arteries of rabbits.     

复方丹参滴丸对冠心病PCI后血液流变学的影响

目的:观察复方丹参滴丸对冠心病患者冠状动脉介入治疗(PCI)后血液流变学的影响,探讨复方丹参滴丸治疗冠心病的临床实用价值。方法:选择确诊冠心病行PCI治疗的患者160例,随机分为治疗组(n=83)和对照组(n=77),对照组于PCI后给予常规用药,包括阿司匹林和氯吡格雷,而治疗组在此基础上,加用复方丹参滴丸口服,于术前和术后3个月,检测并分析其血液流变学指标。结果:与治疗前相比,两组患者在全血粘度高切、中切和低切方面明显降低(P<0.05),且复方丹参滴丸治疗组在治疗后全血粘度低切指标下降更明显,与对照组相比P<0.05,有统计学差异;此外,治疗组在全血还原粘度、红细胞聚集和卡松曲服应力方面与治疗前相比,亦明显降低,具有统计学差异;而对照组治疗后虽有下降趋势,但未达到统计学差异。与对照组相比,复方丹参滴丸治疗组治疗后在全血还原粘度和卡松曲服应力方面水平低于对照组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:冠心病PCI后患者在常规用药基础上加用复方丹参滴丸,可明显改善其血流动力学指标,缓解心绞痛症状,具有临床应用价值。     

冠脉内支架植入术后血清C-反应蛋白的变化探讨

目的观察冠状动脉内支架植入术后血清C 反应蛋白 (CRP)的变化 ,并分析术后CRP浓度变化的临床意义。方法急性冠状动脉综合征组 :选择急性冠状动脉综合征 (ACS)病人 2 7例 ,行PCI;稳定性心绞痛组 :2 1例稳定性心绞痛病人 ,择期仅行冠状动脉造影 ,显示有冠状动脉不同程度狭窄 ,而未行PCI,且两组病例均严格执行冠心病二级预防治疗 ;上述两组病人用放射免疫法分别测定术前、术后 1天 ,术后 14天外周静脉血清CRP ,并以冠脉造影正常病人 2 0例作为正常对照组。结果正常对照组、稳定性心绞痛 (AP)组和急性冠脉综合征 (ACS)组 ,其血清CRP水平呈逐渐递增趋势 ,尤其是ACS组较稳定性心绞痛CRP水平升高更显著 ;PCI术后 2周血清CRP水平较术前明显降低 (P<0 .0 1)。结论CRP水平的急剧升高对急性心血管事件具有预测价值 ;介入治疗加剧了局部炎症反应 ,并随着血管开通 ,炎症反应逐渐减弱。     

间充质干细胞移植对兔粥样硬化颈动脉损伤后再狭窄的影响

目的探讨间充质干细胞（mesenchymals temcells,MSCs）对球囊损伤的粥样硬化颈动脉再狭窄的影响及可能的作用机制。方法制作颈动脉粥样硬化狭窄大白兔模型38只。分为MSCs移植组（n=28）和对照组（n=10）。MSCs移植组于球囊损伤前经外周血采集MSCs并体外培养扩增,于球囊损伤后即刻、1周和2周经静脉移植MSCs,而对照组给予等量生理盐水。于球囊损伤后4周收集血管标本,经免疫化学染色后观察血管病理形态学特点、计算新生内膜和中膜面积并检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）。结果①MSCs移植组外周血分离MSCs经荧光激活细胞分类术（FCAS）鉴定,其表面抗原CD44阳性而CD34和CD45阴性,纯度达95％以上;②MSCs移植组颈动脉内皮细胞少量缺失,管壁部分区域轻度增厚,管腔轻度狭窄,增厚处中膜可见少量泡沫细胞沉积,部分区域伴少量纤维组织增生,呈动脉粥样硬化早中期（脂质条纹-纤维斑块期）改变,而对照组颈动脉见内皮细胞片状缺失,动脉管壁全周明显增厚,管腔狭窄较明显,内膜管腔面可见纤维组织增生形成纤维帽,纤维帽下中膜内可见较多的泡沫细胞沉积,并伴有淡红染无定形物质形成,呈动脉粥样硬化中晚期（纤维斑块-粥样斑块期）改变;⑧与对照组相比较,MSCs移植组新生内膜面积和中膜面积均明显减少,差异有统计学意义[（0．336±0．018）mm^2比（0．845±0．046）mm^2,P〈0．01;（0．245±0．017）mm^2比（0．951±0．024）mm^2,P〈0．01];而两组间新生内膜面积／中膜面积,差异无统计学意义[（1．371±0．158）比（1．534±0．014）,P〉0．05]。同时,血管壁PCNA测定显示：MSCs移植组PCNA阳性细胞率显著低于对照组（0．236％±0．014％比0．881％±0．017％,P〈0．05）。结论MSCs静脉移植可明显降低兔球囊损伤动脉粥样硬化颈动脉的新生内膜增生,促进损伤内皮再生。     

冠状动脉支架植入术后再狭窄危险因素的分析

目的 回顾性分析经皮冠状动脉支架植入术后复查冠状动脉造影患者冠状动脉支架内再狭窄(in-stent restenosis,ISR)的相关危险因素.方法 纳入2007年1月至2015年5月在遵义医学院附属医院心内科住院行冠状动脉支架植入术并于术后8～12个月随访行冠状动脉造影的患者1 136例,其中男性835例,女性301例,年龄(61.61 ±12.32)岁.根据随访造影结果支架相关病变血管是否狭窄及程度将其分成ISR组(n=72)和非ISR组(n=1 064),记录两组患者的心血管危险因素、临床合并症、用药情况以及介入治疗相关参数等,分析可能导致ISR的相关因素.结果 本组病例资料造影随访显示ISR发生率为6.3％.与非ISR组比较,ISR组患者在吸烟、糖尿病、血脂异常、高血压、术后服药依从性差、长病变和多支病变、支架直径和长度及最小管腔直径(MLD)等方面差异具有统计学意义(P＜0.05).长期规律服用阿司匹林、氯吡格雷和大剂量他汀类患者的比例,在非ISR组与ISR组比较差异亦具有统计学意义(P＜0.05).结论 冠状动脉支架植入术后再狭窄是临床多因素共同作用结果,与未控制的心血管危险因素、抗血小板治疗和他汀治疗依从性以及支架治疗病变特征相关.     

G—CSF对颈动脉狭窄模型兔内皮祖细胞的动员作用

目的观察粒细胞集落刺激因子（Granuloeyte Colony Stimulating Factor,G—CSF）对动脉狭窄模型兔外周血内皮祖细胞（Endothelial Progenitor Cells．EPCs）数量的影响。方法以颈动脉狭窄模型兔为研究对象,随机分为两组,G—CSF注射组（n=14）和对照组（n=10）,两组动物分别予以25μg/kg·d的G—CSF和等量的生理盐水腹部皮下注射,连续注射7d后,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞。将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7天后贴壁细胞进行化学分析。激光共聚焦显微镜鉴定Dil—acLDL和HTC—UEA-1双染色阳性细胞为正在分化的EPCs。用倒置荧光显微镜进行细胞计数。结果G—CSF组外周血内皮祖细胞比对照组明显增多,两组差异有统计学意义（t=4．815P〈0．001）。结论短期应用G—CSF对颈动脉狭窄模型兔外周血内皮祖细胞有动员作用。     

骨髓间充质干细胞移植后颈动脉损伤球囊核转录因子κBp65和增殖细胞核抗原的表达

背景：炎症反应在经皮腔内冠状动脉支架置入后再狭窄的发生中起了重要作用。近年的研究发现,骨髓间充质干细胞具有较强的免疫调节特性。然而骨髓间充质干细胞对损伤血管炎症反应影响的报道较少。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植对兔颈动脉球囊损伤后核转录因子κBp65和增殖细胞核抗原表达的影响,分析其与内膜增殖作用的相关性。 方法：制作颈动脉粥样硬化狭窄兔模型36只,随机分成2组,骨髓间充质干细胞移植组球囊损伤后接受4’,6-二脒基-2-苯基吲哚标记的骨髓间充质干细胞移植,对照组球囊损伤后接受等量的PBS液注射。造模前和细胞移植后7,14,28 d分别抽取外周血,ELIAS法检测血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的质量浓度;细胞移植后14 d取血管组织,采用免疫组织化学分析法测定局部组织核转录因子κBp65和增殖细胞核抗原的表达,细胞移植后28 d对血管组织行苏木精-伊红染色检测血管形态学变化。 结果与结论：细胞移植后14 d 骨髓间充质干细胞移植组损伤血管局部核转录因子κBp65和增殖细胞核抗原的表达均较对照组明显减少(P < 0.05)。细胞移植后7,14,28 d骨髓间充质干细胞移植组血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6质量浓度均较对照组显著降低(P < 0.05)。细胞移植后28 d 骨髓间充质干细胞移植组新生内膜面积、新生内膜/中膜面积及血管狭窄率均较对照组显著降低(P < 0.05)。提示骨髓间充质干细胞可能通过抑制损伤血管核转录因子κBp65活性,减轻炎症反应进而下调增殖细胞核抗原的表达,对抑制损伤血管新生内膜的增殖可能发挥有益作用。     

左、右冠状动脉病变心肌缺血症状的对比

目的:比较冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)右冠状动脉(RCA)病变与左冠状动脉(LCA)病变心肌缺血症状的差异。方法:将408例CHD患者分为急性心肌梗死(AMI)组和心绞痛(AP)组。在AMI组中,比较RCA病变与LCA病变在AMI前心肌缺血症状的差异。在AP组中,根据冠状动脉造影结果分为单支血管病变和多支血管病变两个亚组,统计各亚组RCA与LCA病变检出率的差异。结果:在AMI组中,LCA病变组在AMI前有心肌缺血症状的患者明显较RCA病变组多(P<0.05)。在AP组中,多支病变亚组中RCA病变检出率和LCA病变检出率差异不明显(P>0.05),而单支病变亚组中RCA病变检出率明显低于LCA病变检出率(P<0.001)。结论:RCA病变时心肌缺血症状少,甚至缺乏,不易被发现。