人类自身花结形成细胞的检测及其临床意义

介绍一种较能确切反映机体细胞免疫功能的简易方法—自身花结法。本法的最佳试验条件是:①pH7.0;②外周血单个核细胞与自身红细胞之比为1比7.5,③4℃孵育18小时。经多次实验证实,本法稳定,重复性好,不受异体因素影响。用本法检测60例正常人、12例慢性鼻炎和70例癌患者外周血自身花结形成细胞(ARFC)所占百分比,结果癌患者ARFC显著降低,治疗缓解后明显升高,提示ARFC值可用作癌症诊断和预后估计的指标,有临床应用价值。     

△6,7-~3H雌二醇-3-环戊醚的合成

动物实验表明,雌二醇3-环戊醚对中度急性放射病具有明显的防治效果,为一口服有效药物。合成△6,7-~3H-环戊醚雌二醇是为了研究该药在动物体内的分布和代谢机理。此标记药物国内外尚未报导,但国外     

非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白的分离纯化

目的优化非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白质片段的分离纯化方法。方法采用盐析、透析脱盐、超滤浓缩、弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,优化Hap。蛋白质片段的洗脱条件,包括pH值和离子强度,测定各洗脱液样品在280nm波长处的光吸收值（D280）,用折线图显示,SDS-PAGE电泳检测分布图中处于峰值的样品,观察目的蛋白条带的出现。结果弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,缓冲液l洗脱液的D280分布为基线,缓冲液2洗脱液的D280分布折线图中有峰值出现,但峰有拖尾,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰主要为低分子量的蛋白条带;五种不同离子强度的缓冲液3洗脱液在100mmol／L NaCl离子强度时,D280的分布折线图显示有较高洗脱峰出现,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰有较明显的110000D的目的条带,其余离子强度下均未见明显洗脱峰出现。结论Sepharose CM FF层析柱分离纯化Haps蛋白质片段时,不同pH值的缓冲液对目的蛋白的洗脱没有明显影响,而主要影响杂蛋白的洗脱;100mmol／L NaCl离子强度的缓冲液3洗脱液获得较好的洗脱效果。     

流感病毒血凝素基因HA1区的克隆及其真核表达载体的构建

目的　克隆甲型流感病毒血凝素基因HA1区及构建其真核表达载体。方法　从接种人流感病毒株A/PR/ 8/ 34(H1N1)的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA ,用特异引物进行RT PCR ,扩增血凝素基因HA1区。将所扩增片断克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1(+) ,转化感受态大肠杆菌JM 10 9并筛选阳性克隆。结果　经双酶切、PCR及测序鉴定证实血凝素基因HA1区的真核表达载体构建成功。结论　甲型流感病毒血凝素的HA1区是与宿主细胞膜表面受体结合的部位并起着诱导机体产生保护性抗体的作用 ,HA1区的克隆和其真核表达质粒的构建将为防治病毒侵入宿主细胞及核酸疫苗的研究打下基础。     

dendrimers的结构特点及其在生物领域的应用

dendrimers(树枝状聚合物)是人工合成的一种具有高度分枝状结构的纳米级分子。由于其特殊的结构和表面特性，dendrimers已经被应用于生物领域的多个方面，包括诊断试剂、基因和药物载体、抗癌和抗病毒试剂、疫苗等。     

聚乙二醇不同修饰度对水蛭素活性和半衰期的影响

目的：通过优化聚乙二醇（PEG）对水蛭素的化学修饰反应条件，得到具有生物学活性、半衰期延长的修饰产物。方法：通过改变化学反应中聚乙二醇与水蛭素的比例获得不同修饰度的产物；采用SDS-PAGE分析产物的修饰度；TH发色底物法分析聚乙二醇修饰前、后水蛭素的活性；用凝胶过滤层析对水蛭素的PEG修饰产物进行分离纯化；采用部分活化凝血酶时间（APTT）鉴定PEG修饰水蛭素在动物体内延长半衰期的效果。结果：化学反应中PEG与水蛭素摩尔比超过3：1时，水蛭素被修饰后抗凝活性明显下降。凝胶过滤层析方法分离得到不同修饰程度的水蛭素。活性分析表明，连接1个和2个聚乙二醇分子的水蛭素保持了原有活性，并可不同程度地延长体内半衰期；连接3个以上PEG的水蛭素活性明显降低。结论：通过控制PEG对水蛭素的修饰反应条件，得到了具有生物学活性、体内半衰期延长的修饰产物。     

抑制端粒酶活性的pSUPER RNAi系统的构建

目的 构建抑制端粒酶活性的siRNA表达载体。方法 化学合成2段编码短发夹RNA序列的、靶向端粒酶hTERT基因的寡核苷酸，各64个碱基，退火，克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切同时CIP处理后的pSUPER载体的polⅢH1启动子的下游，重组构建RNAi质粒，同时设立非特异对照．结果 重组构建的pSUP—hTE载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析，结果表明64个碱基成功插入到预计位点，并且序列完全一致。结论 载体的成功构建，为进一步研究其对端粒酶活性的抑制作用打下基础。同时使我们发展了在体内合成siRNA的方法，这项技术能广泛的用在分析基因功能、肿瘤治疗等，更加便捷地把RNAi技术用于细胞培养和哺乳动物研究。     

膜结合骨形成蛋白和单独用膜引导种植体周围骨组织再生的比较研究

为研究单纯用膜及膜结合ＢＭＰ修复与种植体有关的骨缺损的愈合速度及界面情况，应用ＨＡ喷涂钛种植体植入伴有裂状缺损的拔牙窝内。实验分两组进行，一组用聚四氟己烯膜（ＰＥＴＥ膜）结合ＢＭＰ，另一组单纯用聚四氟己烯膜。术后２、４、８、１２周分别行大体，Ｘ线，光镜观察。结果发现：单纯用膜能促进种植体周围新骨生成，而膜结合ＢＭＰ处理的种植体骨修复启动早，骨界面愈合速度较单纯用膜可提前约４～６周。两种方法为扩大种植体的适应证范围，解决植床质和量问题提供了可能     

颞下颌关节痛综合征的治疗

本文对384例颞下颌关节痛综合征患者进行了治疗。由于本病普遍存在着(牙合)干扰、咬(牙合)功能异常和髁突位置的改变,因此着重对(牙合)异常进行矫治。通过调(牙合)、正畸、(牙合)垫、修复等治疗措施,使患者重建正常(牙合),去除(牙合)干扰,恢复生理咬(牙合)功能,疗效显著而巩固。     

色素失禁症一家系NEMO基因缺失

目的：检测家族性色素失禁症（incontinentia pigmenti,IP）患者NEMO基因的缺失突变.方法：选取NEMO基因特异引物nemo-Int3S、nemo-Rep3S和nemo-L2Rev,采用多重聚合酶链反应对家系内成员NEMO基因的缺失位点进行检测.结果：IP家系内所检测患者中皆有NEMO基因外显子4～10缺失,家系内正常人未见NEMO基因缺失.结论：该家系患者的基因突变方式为NEMO外显子4～10缺失.